中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
中英文做略语表 | 第13-14页 |
第1章 绪论 | 第14-25页 |
1.1 盐害及植物耐盐生理 | 第14-15页 |
1.1.1 盐对植物的危害 | 第14页 |
1.1.2 植物耐盐生理 | 第14-15页 |
1.2 耐盐基因的研究进展 | 第15-18页 |
1.2.1 植物根部在盐胁迫下的基因调控 | 第15页 |
1.2.2 Na+和K+的转运网络 | 第15-16页 |
1.2.3 Na+/H+转运蛋白NHX和SOS | 第16-17页 |
1.2.4 高亲和K +转运载体 | 第17页 |
1.2.5 渗透调节物质 | 第17-18页 |
1.3 肌醇甲基转移酶的研究进展 | 第18-19页 |
1.3.1 松醇的生理作用 | 第18-19页 |
1.3.2 松醇的合成途径 | 第19页 |
1.4 水通道蛋白的研究进展 | 第19-21页 |
1.4.1 水通道蛋白的分类 | 第19-20页 |
1.4.2 水通道蛋白的生物学功能 | 第20页 |
1.4.3 AQPs参与植物盐胁迫应答的途径 | 第20-21页 |
1.5 苦豆子研究进展 | 第21-22页 |
1.6 分子生物学研究方法 | 第22-23页 |
1.6.1 cDNA文库 | 第22-23页 |
1.6.2 豆科模式转化系统 | 第23页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
第2章 苦豆子苗期酵母表达文库的构建及抗盐基因的筛选 | 第25-41页 |
2.1 材料 | 第25-26页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 菌株 | 第25页 |
2.1.3 酶及试剂 | 第25页 |
2.1.4 引物 | 第25页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第25-26页 |
2.1.6 试剂配制 | 第26页 |
2.2 方法 | 第26-33页 |
2.2.1 植物材料的处理 | 第26-27页 |
2.2.2 苦豆子叶片丙二醛(MDA)含量测定 | 第27页 |
2.2.3 苦豆子叶片相对含水量(RWC)测定 | 第27-28页 |
2.2.4 苦豆子总RNA的提取 | 第28页 |
2.2.5 苦豆子苗期E.colicDNA文库的质量检测 | 第28-29页 |
2.2.6 苦豆子苗期cDNA文库质粒提取 | 第29-30页 |
2.2.7 酿酒酵母INVSC1感受态的制备 | 第30页 |
2.2.8 文库质粒大规模转化酿酒酵母INVSC1感受态细胞 | 第30-31页 |
2.2.9 苦豆子苗期酵母表达cDNA文库的构建 | 第31页 |
2.2.10 酵母植物抗逆基因筛选体系筛选苦豆子抗盐相关基因 | 第31-33页 |
2.2.11 候选基因的生物信息学分析 | 第33页 |
2.3 结果与分析 | 第33-39页 |
2.3.1 苦豆子叶片丙二醛(MDA)含量测定 | 第33-34页 |
2.3.2 苦豆子叶片相对含水量(RWC)测定 | 第34-35页 |
2.3.3 苦豆子苗期E.colicDNA文库重组率及插入片段长度鉴定 | 第35-36页 |
2.3.4 苦豆子苗期酵母表达cDNA文库重组率及插入片段长度鉴定 | 第36-37页 |
2.3.5 筛选到苦豆子抗盐相关基因的生物信息学分析 | 第37-39页 |
2.4 讨论 | 第39-40页 |
2.5 小结 | 第40-41页 |
第3章 SaIMT和SaAQP基因的生物信息学分析及表达模式分析 | 第41-57页 |
3.1 材料 | 第41页 |
3.1.1 植物材料 | 第41页 |
3.1.2 酶及试剂 | 第41页 |
3.1.3 引物 | 第41页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第41页 |
3.2 方法 | 第41-44页 |
3.2.1 材料处理及取样 | 第41-42页 |
3.2.2 植物总RNA的提取 | 第42页 |
3.2.3 cDNA的合成 | 第42-43页 |
3.2.4 生物信息学分析 | 第43页 |
3.2.5 实时荧光定量PCR | 第43-44页 |
3.3 结果 | 第44-55页 |
3.3.1 SaIMT基因的生物信息学分析 | 第44-48页 |
3.3.2 SaAQP基因的生物信息学分析 | 第48-52页 |
3.3.3 SaIMT和SaAQP基因在苦豆子不同组织中的表达 | 第52-53页 |
3.3.4 NaCl胁迫处理下苦豆子中SaIMT和SaAQP基因的表达 | 第53-55页 |
3.4 讨论 | 第55-56页 |
3.5 小结 | 第56-57页 |
第4章 SaIMT基因和SaAQP基因在大豆发状根中的抗盐性分析 | 第57-75页 |
4.1 材料 | 第57-59页 |
4.1.1 植物材料 | 第57页 |
4.1.2 菌株及质粒 | 第57页 |
4.1.3 酶及试剂 | 第57-58页 |
4.1.4 引物 | 第58页 |
4.1.5 主要仪器设备 | 第58页 |
4.1.6 试剂及培养基配制 | 第58-59页 |
4.2 方法 | 第59-66页 |
4.2.1 植物表达载体pCHF1301SaIMT和pCHF1301SaAQp的构建 | 第59-62页 |
4.2.2 K599发根农杆菌感受态细胞的制备 | 第62页 |
4.2.3 电击法转化K599感受态细胞 | 第62-63页 |
4.2.4 发根农杆菌的遗传转化 | 第63-64页 |
4.2.5 转基因大豆发状根的筛选及鉴定 | 第64-65页 |
4.2.6 转基因大豆发状根的耐盐性分析 | 第65-66页 |
4.3 结果 | 第66-73页 |
4.3.1 植物表达载体pCHF1301SaIMT和pCHF1301SaAQp的构建与鉴定 | 第66页 |
4.3.2 转基因的大豆发状根的筛选及鉴定 | 第66-67页 |
4.3.3 转SaIMT和SaAQP基因大豆发状根的耐盐性分析 | 第67-73页 |
4.4 讨论 | 第73-74页 |
4.5 小结 | 第74-75页 |
结论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-90页 |
作者简介及科研成果 | 第90-91页 |
致谢 | 第91页 |