| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 符号说明及缩略词 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-34页 |
| 1.1 黄色粘球菌的运动系统 | 第14-17页 |
| 1.1.1 粘细菌 | 第14页 |
| 1.1.2 黄色粘球菌的S运动系统 | 第14-17页 |
| 1.2 黄色粘球菌的Ⅳ型菌毛 | 第17-24页 |
| 1.2.1 Ⅳ型菌毛 | 第17-19页 |
| 1.2.2 黄色粘球菌Ⅳ型菌毛的组成 | 第19-22页 |
| 1.2.3 Ⅳ型菌毛的功能 | 第22-24页 |
| 1.3 黄色粘球菌的胞外基质 | 第24-26页 |
| 1.3.1 胞外基质的组成 | 第24-25页 |
| 1.3.2 胞外多糖的功能 | 第25-26页 |
| 1.4 研究生物大分子相互作用的技术 | 第26-31页 |
| 1.4.1 表面等离子共振分析 | 第26-28页 |
| 1.4.2 等温滴定量热仪分析 | 第28-29页 |
| 1.4.3 微量热泳动仪技术分析 | 第29-31页 |
| 1.5 论文思路及研究内容 | 第31-34页 |
| 第二章 胞外多糖与PilA蛋白体外互作分析方法的建立 | 第34-50页 |
| 2.1 材料 | 第35-38页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第35页 |
| 2.1.2 培养基 | 第35-36页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-43页 |
| 2.2.1 截短PilA蛋白在E.coli中的表达 | 第38页 |
| 2.2.2 亲和层析法纯化PilA蛋白 | 第38-39页 |
| 2.2.3 胞外多糖的提取 | 第39-40页 |
| 2.2.4 表面等离子共振(SPR)操作方法 | 第40-43页 |
| 2.3 结果与分析 | 第43-48页 |
| 2.3.1 PilA蛋白的纯化 | 第43-44页 |
| 2.3.2 SPR直接偶联法分析壳聚糖与PilA蛋白互作 | 第44-45页 |
| 2.3.3 SPR分析EPS与PilA蛋白互作结果 | 第45-48页 |
| 2.4 本章小结 | 第48-50页 |
| 第三章 胞外多糖与PilA蛋白相互作用时关键位点的探究 | 第50-60页 |
| 3.1 材料 | 第50-51页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第50页 |
| 3.1.2 培养基 | 第50页 |
| 3.1.3 主要实验试剂 | 第50页 |
| 3.1.4 主要仪器设备与耗材 | 第50-51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51-54页 |
| 3.2.1 表面等离子共振操作方法 | 第51-52页 |
| 3.2.2 等温滴定量热仪操作方法 | 第52页 |
| 3.2.3 表面等离子共振竞争实验 | 第52-54页 |
| 3.3 实验结果和分析 | 第54-59页 |
| 3.3.1 SPR直接偶联法分析单糖与PilA蛋白的相互作用 | 第54-56页 |
| 3.3.2 等温滴定量热仪分析单糖与PilA蛋白的相互作用 | 第56-58页 |
| 3.3.3 SPR捕获法-多循环动力学的竞争实验 | 第58-59页 |
| 3.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 第四章 PilA蛋白参与识别胞外多糖关键位点的探究 | 第60-90页 |
| 4.1 材料 | 第61-63页 |
| 4.1.1 菌株与质粒 | 第61-62页 |
| 4.1.2 培养基 | 第62页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第62页 |
| 4.1.4 仪器设备与耗材 | 第62-63页 |
| 4.2 实验方法 | 第63-76页 |
| 4.2.1 PilA突变蛋白与糖类互作分析 | 第63-67页 |
| 4.2.2 PilA回补菌株的构建 | 第67-72页 |
| 4.2.3 表型分析 | 第72-76页 |
| 4.3 实验结果 | 第76-89页 |
| 4.3.1 PilA蛋白中关键位点的预测 | 第76页 |
| 4.3.2 PilA突变载体的构建以及表达 | 第76-78页 |
| 4.3.3 表面等离子共振分析PilA突变蛋白与糖类相互作用 | 第78-83页 |
| 4.3.4 回补菌株表型分析 | 第83-89页 |
| 4.4 本章小结 | 第89-90页 |
| 总结与展望 | 第90-94页 |
| 附录 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第105页 |
