中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-27页 |
1.1 PLATZ基因家族 | 第12页 |
1.2 锌指蛋白 | 第12-15页 |
1.2.1 锌指蛋白结构 | 第12-13页 |
1.2.2 锌指蛋白的功能 | 第13-14页 |
1.2.2.1 锌指蛋白与核酸的相互作用 | 第13页 |
1.2.2.2 锌指蛋白与蛋白的结合 | 第13-14页 |
1.2.3 植物锌指蛋白 | 第14-15页 |
1.2.3.1 锌指蛋白与盐胁迫 | 第14页 |
1.2.3.2 锌指蛋白与干旱胁迫 | 第14-15页 |
1.2.3.3 锌指蛋白与温度胁迫 | 第15页 |
1.2.3.4 锌指蛋白与植物激素 | 第15页 |
1.3 盐胁迫 | 第15-26页 |
1.3.1 盐胁迫影响植物生长发育 | 第16页 |
1.3.2 盐胁迫影响植物代谢 | 第16-17页 |
1.3.2.1 盐胁迫对植物光合作用的影响 | 第16-17页 |
1.3.2.2 盐胁迫对植物呼吸作用的影响 | 第17页 |
1.3.2.3 盐胁迫对植物其他代谢的影响 | 第17页 |
1.3.3 盐胁迫对植物的毒害机理 | 第17-18页 |
1.3.3.1 离子毒害 | 第17-18页 |
1.3.3.2 渗透胁迫 | 第18页 |
1.3.4 植物体内钠离子的转运 | 第18-22页 |
1.3.4.1 HKT基因家族 | 第19页 |
1.3.4.2 NHX基因家族 | 第19-20页 |
1.3.4.3 SOS基因家族 | 第20-22页 |
1.3.5 植物CBL-CIPK信号 | 第22-26页 |
1.3.5.1 CBL基因家族 | 第23-24页 |
1.3.5.2 CBL-CIPK信号网络的调控功能 | 第24-26页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第26-27页 |
2 材料与方法 | 第27-43页 |
2.1 实验材料 | 第27-29页 |
2.1.1 植物材料 | 第27页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第27页 |
2.1.3 酶及生化试剂 | 第27页 |
2.1.4 引物 | 第27-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-43页 |
2.2.1 CTAB法提取植物基因组总DNA | 第29-30页 |
2.2.2 植物总RNA的提取和纯化 | 第30-32页 |
2.2.2.1 通用植物总RNA提取试剂盒提取拟南芥RNA | 第30-31页 |
2.2.2.2 RNA质量检测 | 第31页 |
2.2.2.3 RNA中基因组DNA的除去反应 | 第31页 |
2.2.2.4 RNA反转录反应 | 第31-32页 |
2.2.3 转录水平表达量的检测 | 第32页 |
2.2.3.1 半定量RT-PCR(Semiquantitative RT-PCR) | 第32页 |
2.2.3.2 实时定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR) | 第32页 |
2.2.4 相关载体的构建 | 第32-36页 |
2.2.4.1 目的基因PCR扩增 | 第32-33页 |
2.2.4.2 平末端加A反应 | 第33页 |
2.2.4.3 载体连接 | 第33-34页 |
2.2.4.4 酶切及胶回收 | 第34-35页 |
2.2.4.5 小量碱法提取质粒 | 第35-36页 |
2.2.5 大肠杆菌感受态制备及转化 | 第36-37页 |
2.2.5.1 大肠杆菌TOP10感受态制备 | 第36页 |
2.2.5.2 DNA转化大肠杆菌 | 第36-37页 |
2.2.6 农杆菌感受态制备及转化 | 第37页 |
2.2.6.1 农杆菌GV3101感受态制备 | 第37页 |
2.2.6.2 质粒转化农杆菌GV3101感受态 | 第37页 |
2.2.7 拟南芥转基因株系的获得及鉴定 | 第37-39页 |
2.2.7.1 拟南芥的转化 | 第37-38页 |
2.2.7.2 拟南芥转基因株系的鉴定 | 第38-39页 |
2.2.8 GUS染色 | 第39页 |
2.2.9 烟草瞬时转化 | 第39-41页 |
2.2.10 植物双荧光素酶报告系统 | 第41-42页 |
2.2.11 Na~+荧光染色 | 第42-43页 |
3 结果与分析 | 第43-54页 |
3.1 AtPLATZ5表达模式分析 | 第43-44页 |
3.2 PLATZ5的亚细胞定位分析 | 第44页 |
3.3 PLATZ5的转录活性分析 | 第44页 |
3.4 盐胁迫下AtPLATZ5的功能鉴定 | 第44-47页 |
3.4.1 AtPLATZ5超表达株系对盐敏感 | 第44-45页 |
3.4.2 platz5对盐不敏感 | 第45-47页 |
3.5 AtPLATZ5超表达促进根与叶片中Na~+积累 | 第47-49页 |
3.6 AtPLATZ5调控植物离子胁迫响应 | 第49-50页 |
3.7 PLATZ5负调控SOS3/CBL4与CBL10的表达 | 第50-51页 |
3.8 外源Ca2+能部分恢复OE-PLATZ5盐敏感表型 | 第51页 |
3.9 PLATZ5靶向SOS3启动子 | 第51-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-66页 |
致谢 | 第66页 |