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拟南芥锌指转录因子PLATZ5在盐胁迫响应中的功能研究

中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-27页
    1.1 PLATZ基因家族第12页
    1.2 锌指蛋白第12-15页
        1.2.1 锌指蛋白结构第12-13页
        1.2.2 锌指蛋白的功能第13-14页
            1.2.2.1 锌指蛋白与核酸的相互作用第13页
            1.2.2.2 锌指蛋白与蛋白的结合第13-14页
        1.2.3 植物锌指蛋白第14-15页
            1.2.3.1 锌指蛋白与盐胁迫第14页
            1.2.3.2 锌指蛋白与干旱胁迫第14-15页
            1.2.3.3 锌指蛋白与温度胁迫第15页
            1.2.3.4 锌指蛋白与植物激素第15页
    1.3 盐胁迫第15-26页
        1.3.1 盐胁迫影响植物生长发育第16页
        1.3.2 盐胁迫影响植物代谢第16-17页
            1.3.2.1 盐胁迫对植物光合作用的影响第16-17页
            1.3.2.2 盐胁迫对植物呼吸作用的影响第17页
            1.3.2.3 盐胁迫对植物其他代谢的影响第17页
        1.3.3 盐胁迫对植物的毒害机理第17-18页
            1.3.3.1 离子毒害第17-18页
            1.3.3.2 渗透胁迫第18页
        1.3.4 植物体内钠离子的转运第18-22页
            1.3.4.1 HKT基因家族第19页
            1.3.4.2 NHX基因家族第19-20页
            1.3.4.3 SOS基因家族第20-22页
        1.3.5 植物CBL-CIPK信号第22-26页
            1.3.5.1 CBL基因家族第23-24页
            1.3.5.2 CBL-CIPK信号网络的调控功能第24-26页
    1.4 本研究的目的与意义第26-27页
2 材料与方法第27-43页
    2.1 实验材料第27-29页
        2.1.1 植物材料第27页
        2.1.2 菌株和载体第27页
        2.1.3 酶及生化试剂第27页
        2.1.4 引物第27-29页
    2.2 实验方法第29-43页
        2.2.1 CTAB法提取植物基因组总DNA第29-30页
        2.2.2 植物总RNA的提取和纯化第30-32页
            2.2.2.1 通用植物总RNA提取试剂盒提取拟南芥RNA第30-31页
            2.2.2.2 RNA质量检测第31页
            2.2.2.3 RNA中基因组DNA的除去反应第31页
            2.2.2.4 RNA反转录反应第31-32页
        2.2.3 转录水平表达量的检测第32页
            2.2.3.1 半定量RT-PCR(Semiquantitative RT-PCR)第32页
            2.2.3.2 实时定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)第32页
        2.2.4 相关载体的构建第32-36页
            2.2.4.1 目的基因PCR扩增第32-33页
            2.2.4.2 平末端加A反应第33页
            2.2.4.3 载体连接第33-34页
            2.2.4.4 酶切及胶回收第34-35页
            2.2.4.5 小量碱法提取质粒第35-36页
        2.2.5 大肠杆菌感受态制备及转化第36-37页
            2.2.5.1 大肠杆菌TOP10感受态制备第36页
            2.2.5.2 DNA转化大肠杆菌第36-37页
        2.2.6 农杆菌感受态制备及转化第37页
            2.2.6.1 农杆菌GV3101感受态制备第37页
            2.2.6.2 质粒转化农杆菌GV3101感受态第37页
        2.2.7 拟南芥转基因株系的获得及鉴定第37-39页
            2.2.7.1 拟南芥的转化第37-38页
            2.2.7.2 拟南芥转基因株系的鉴定第38-39页
        2.2.8 GUS染色第39页
        2.2.9 烟草瞬时转化第39-41页
        2.2.10 植物双荧光素酶报告系统第41-42页
        2.2.11 Na~+荧光染色第42-43页
3 结果与分析第43-54页
    3.1 AtPLATZ5表达模式分析第43-44页
    3.2 PLATZ5的亚细胞定位分析第44页
    3.3 PLATZ5的转录活性分析第44页
    3.4 盐胁迫下AtPLATZ5的功能鉴定第44-47页
        3.4.1 AtPLATZ5超表达株系对盐敏感第44-45页
        3.4.2 platz5对盐不敏感第45-47页
    3.5 AtPLATZ5超表达促进根与叶片中Na~+积累第47-49页
    3.6 AtPLATZ5调控植物离子胁迫响应第49-50页
    3.7 PLATZ5负调控SOS3/CBL4与CBL10的表达第50-51页
    3.8 外源Ca2+能部分恢复OE-PLATZ5盐敏感表型第51页
    3.9 PLATZ5靶向SOS3启动子第51-54页
4 讨论第54-56页
5 结论第56-57页
参考文献第57-66页
致谢第66页

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