中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第13-24页 |
1.1 干旱和盐胁迫 | 第13-16页 |
1.1.1 干旱和盐胁迫对植物的危害 | 第13-14页 |
1.1.2 植物应对干旱和盐胁迫的机制 | 第14-16页 |
1.2 植物脂质转运蛋白 | 第16-23页 |
1.2.1 LTPs的结构和生化性质 | 第16-17页 |
1.2.2 LTPs的分类 | 第17-19页 |
1.2.3 LTPs体外脂质结合及转运 | 第19-20页 |
1.2.4 LTPs的生物学功能 | 第20-23页 |
1.2.4.1 LTPs参与蜡质合成及运输 | 第20页 |
1.2.4.2 LTPs参与生长发育调节 | 第20-21页 |
1.2.4.3 LTPs调节生物胁迫抗性 | 第21页 |
1.2.4.4 LTPs调节非生物胁迫抗性 | 第21-23页 |
1.2.4.5 LTPs的其他生物学功能 | 第23页 |
1.3 本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-40页 |
2.1 实验材料 | 第24-26页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第24页 |
2.1.3 酶和各种生化试剂 | 第24页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第24-25页 |
2.1.5 工具软件与数据库 | 第25页 |
2.1.6 PCR引物 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-40页 |
2.2.1 玉米的培养与处理 | 第26-27页 |
2.2.2 植物总RNA的提取 | 第27-28页 |
2.2.3 植物基因组DNA的提取 | 第28页 |
2.2.4 cDNA的合成 | 第28-29页 |
2.2.5 荧光定量PCR | 第29页 |
2.2.6 克隆载体的构建 | 第29-31页 |
2.2.6.1 目的片段的PCR扩增 | 第29-30页 |
2.2.6.2 扩增产物的胶回收 | 第30页 |
2.2.6.3 目的片段与克隆载体的连接 | 第30-31页 |
2.2.7 大肠杆菌感受态的制备 | 第31页 |
2.2.8 大肠杆菌的转化 | 第31-32页 |
2.2.9 目的基因的测序 | 第32页 |
2.2.10 大肠杆菌质粒的提取 | 第32页 |
2.2.11 植物重组表达载体的构建 | 第32-33页 |
2.2.12 农杆菌感受态的制备 | 第33-34页 |
2.2.13 农杆菌感受态的转化 | 第34页 |
2.2.14 农杆菌介导的花序侵染法转化拟南芥 | 第34-35页 |
2.2.15 转基因拟南芥鉴定 | 第35页 |
2.2.16 转基因拟南芥的干旱及盐胁迫处理 | 第35-36页 |
2.2.17 H_2O_2和O~(2-)的染色观察 | 第36页 |
2.2.18 MDA含量测定 | 第36页 |
2.2.19 抗氧化酶活性测定 | 第36-37页 |
2.2.20 ZmLTPL63融合GFP表达载体的构建 | 第37-38页 |
2.2.21 Zm LTPL63的烟草表皮亚细胞定位 | 第38页 |
2.2.22 外源基因在烟草叶片中的瞬时表达 | 第38-39页 |
2.2.23 烟草叶片脂肪酸的提取与检测 | 第39页 |
2.2.24 GUS组织化学染色分析 | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-64页 |
3.1 玉米ZmLTPL63基因的克隆及序列分析 | 第40-44页 |
3.1.1 玉米ZmLTPL63 cDNA的分离 | 第40-41页 |
3.1.2 玉米ZmLTPL63 cDNA序列分析 | 第41-42页 |
3.1.3 玉米ZmLTPL63蛋白序列分析 | 第42页 |
3.1.4 玉米ZmLTPL63蛋白序列相似性及其进化分析 | 第42-44页 |
3.2 玉米Zm LTPL63蛋白的亚细胞定位分析 | 第44-45页 |
3.3 玉米ZmLTPL63基因的表达特性分析 | 第45-47页 |
3.3.1 ZmLTPL63基因表达的组织特异性 | 第45页 |
3.3.2 ZmLTPL63基因表达的非生物胁迫及相关激素响应特性 | 第45-47页 |
3.4 玉米ZmLTPL63基因启动子的克隆及功能鉴定 | 第47-52页 |
3.4.1 ZmLTPL63基因启动子的克隆 | 第47-48页 |
3.4.2 ZmLTPL63基因启动子元件分析 | 第48-50页 |
3.4.3 ZmLTPL63基因启动子的表达调控活性鉴定 | 第50-52页 |
3.5 超表达ZmLTPL63转基因拟南芥的获得 | 第52-54页 |
3.5.1 ZmLTPL63植物表达载体的构建 | 第52-53页 |
3.5.2 超表达ZmLTPL63转基因纯合拟南芥的获得 | 第53-54页 |
3.6 超表达ZmLTPL63调控非生物胁迫抗性 | 第54-61页 |
3.6.1 超表达ZmLTPL63提高拟南芥的抗旱性 | 第54-59页 |
3.6.2 超表达ZmLTPL63提高拟南芥的抗盐性 | 第59-60页 |
3.6.3 ZmLTPL63超表达拟南芥对H_2O_2抗性分析 | 第60-61页 |
3.7 ZmLTPL63表达对脂肪酸代谢的影响 | 第61-62页 |
3.8 超表达ZmLTPL63调节拟南芥的生长发育 | 第62-64页 |
4 讨论 | 第64-67页 |
5 结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-80页 |
致谢 | 第80页 |