| 致谢 | 第5-8页 |
| 中文摘要 | 第8-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 缩略语表(按首字母顺序) | 第17-23页 |
| 引言 | 第23-31页 |
| 第一章 基于Screenfect A的基因转染体系的研究 | 第31-49页 |
| 1.1 实验仪器与材料 | 第32-33页 |
| 1.1.1 仪器 | 第32页 |
| 1.1.2 试剂 | 第32-33页 |
| 1.1.3 实验动物 | 第33页 |
| 1.2 实验方法 | 第33-38页 |
| 1.2.1 MSC的提取分离与纯化、培养 | 第33-34页 |
| 1.2.2 MSC的鉴定 | 第34页 |
| 1.2.3 脂质转染复合物的制备 | 第34-35页 |
| 1.2.4 MSC的基因转染 | 第35-36页 |
| 1.2.5 基因转染效率的测定 | 第36页 |
| 1.2.6 基因转染后MSC的细胞活性检测 | 第36-37页 |
| 1.2.7 不同SF/pDNA复合物的优化 | 第37页 |
| 1.2.8 优化的SF转染复合物的表征 | 第37页 |
| 1.2.9 转染过程中的细胞摄取检测 | 第37页 |
| 1.2.10 血清对SF和Lipo转染MSC的研究 | 第37-38页 |
| 1.2.11 SF运载的质粒在MSC中胞内转运情况考察 | 第38页 |
| 1.3 结果与讨论 | 第38-48页 |
| 1.3.1 MSC的表面标志物鉴定 | 第38-40页 |
| 1.3.2 基于SF的MSC转染体系的优化 | 第40-42页 |
| 1.3.3 基于SF的MSC转染体系与Lipo 2000的比较性研究 | 第42-46页 |
| 1.3.4 基于SF的基因传递体系转染MSC时质粒入胞入核行为的考察 | 第46-48页 |
| 1.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第二章 肽修饰的透明质酸凝胶支架的构建及细胞相容性考察 | 第49-77页 |
| 2.1 实验仪器与材料 | 第49-51页 |
| 2.1.1 仪器 | 第49-50页 |
| 2.1.2 试剂 | 第50-51页 |
| 2.1.3 动物 | 第51页 |
| 2.2 实验方法 | 第51-56页 |
| 2.2.1 凝胶支架的制备 | 第51-52页 |
| 2.2.2 凝胶支架的肽修饰 | 第52页 |
| 2.2.3 凝胶流变学性质检测 | 第52-53页 |
| 2.2.4 凝胶支架吸水性能检测 | 第53页 |
| 2.2.5 核磁共振检测 | 第53页 |
| 2.2.6 同步辐射显微断层成像 | 第53-54页 |
| 2.2.7 MSC的三维培养 | 第54页 |
| 2.2.8 扫描电镜检测 | 第54页 |
| 2.2.9 细胞免疫荧光染色 | 第54-55页 |
| 2.2.10 MSC在支架中黏附的激光共聚焦检测 | 第55页 |
| 2.2.11 支架浸提液的细胞毒性考察 | 第55页 |
| 2.2.12 三维培养条件下细胞Live/Dead染色 | 第55页 |
| 2.2.13 三维培养条件下MSC神经元标志物染色 | 第55-56页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第56-76页 |
| 2.3.1 凝胶支架的处方优化 | 第56-63页 |
| 2.3.2 凝胶支架的肽修饰 | 第63-66页 |
| 2.3.3 PPFLMLLKGSTR肽修饰支架的细胞黏附性考察 | 第66-67页 |
| 2.3.4 PPFLMLLKGSTR肽修饰支架的表征 | 第67-70页 |
| 2.3.5 PPFLMLLKGSTR肽修饰支架的细胞相容性考察 | 第70-76页 |
| 2.4 本章小结 | 第76-77页 |
| 第三章 凝胶支架埋植体系的脊髓修复功能研究 | 第77-104页 |
| 3.1 实验仪器与材料 | 第78-79页 |
| 3.1.1 仪器 | 第78页 |
| 3.1.2 试剂 | 第78页 |
| 3.1.3 细胞 | 第78-79页 |
| 3.1.4 实验动物 | 第79页 |
| 3.2 实验方法 | 第79-82页 |
| 3.2.1 实验动物分组 | 第79页 |
| 3.2.2 大鼠脊髓横切与支架埋植手术 | 第79-80页 |
| 3.2.3 大鼠后肢运动功能评分 | 第80页 |
| 3.2.4 组织收集与冰冻切片 | 第80-81页 |
| 3.2.5 HE染色 | 第81页 |
| 3.2.6 免疫组织化学染色 | 第81页 |
| 3.2.7 形态学定量分析 | 第81-82页 |
| 3.2.8 统计学分析 | 第82页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第82-103页 |
| 3.3.1 MSC埋植初期在脊髓组织中的存活及分布情况考察 | 第82-84页 |
| 3.3.2 大鼠的后肢运动功能恢复情况考察 | 第84-86页 |
| 3.3.3 脊髓组织修复的组织完整性考察 | 第86-90页 |
| 3.3.4 脊髓组织修复的神经再生情况考察 | 第90-95页 |
| 3.3.5 恢复初期炎症细胞浸润情况考察 | 第95-98页 |
| 3.3.6 恢复初期胶质疤痕形成情况考察 | 第98-101页 |
| 3.3.7 恢复初期脊髓组织修复情况考察 | 第101-103页 |
| 3.4 本章小结 | 第103-104页 |
| 第四章 基因修饰干细胞的局部递送和脊髓修复研究 | 第104-118页 |
| 4.1 实验仪器与试剂 | 第104-105页 |
| 4.1.1 仪器 | 第104页 |
| 4.1.2 试剂 | 第104-105页 |
| 4.1.3 细胞 | 第105页 |
| 4.1.4 实验动物 | 第105页 |
| 4.2 实验方法 | 第105-108页 |
| 4.2.1 BDNF基因修饰的MSC的制备 | 第105页 |
| 4.2.2 ELISA检测 | 第105-106页 |
| 4.2.3 BDNF基因修饰的MSC在支架中的存活检测 | 第106页 |
| 4.2.4 BDNF的表达水平检测 | 第106-107页 |
| 4.2.5 实验动物分组 | 第107页 |
| 4.2.6 支架携载BDNF基因修饰的MSC的体内脊髓埋植 | 第107页 |
| 4.2.7 大鼠后肢运动功能评分 | 第107页 |
| 4.2.8 组织染色 | 第107页 |
| 4.2.9 统计学分析 | 第107-108页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第108-116页 |
| 4.3.1 支架对基因修饰的MSC的细胞相容性考察 | 第108-110页 |
| 4.3.2 埋植治疗后大鼠运动功能的BBB评分 | 第110-112页 |
| 4.3.3 神经再生情况考察 | 第112-115页 |
| 4.3.4 脊髓组织修复的组织完整性考察 | 第115-116页 |
| 4.4 本章小结 | 第116-118页 |
| 第五章 甲基泼尼松龙明胶微球的构建及其与BDNF-MSC的联合埋植递送 | 第118-145页 |
| 5.1 实验仪器与材料 | 第119-121页 |
| 5.1.1 仪器 | 第119-120页 |
| 5.1.2 试剂 | 第120-121页 |
| 5.1.3 实验动物 | 第121页 |
| 5.2 实验方法 | 第121-126页 |
| 5.2.1 明胶微球的制备 | 第121-122页 |
| 5.2.2 载微球凝胶支架的制备 | 第122页 |
| 5.2.3 药物检测波长选择 | 第122页 |
| 5.2.4 不同药物明胶微球的释药性质考察和载药明胶微球初选 | 第122页 |
| 5.2.5 甲泼尼龙的高效液相色谱条件 | 第122-123页 |
| 5.2.6 甲泼尼龙高效液相检测的标准曲线绘制 | 第123页 |
| 5.2.7 专属性检测 | 第123页 |
| 5.2.8 精密度测定 | 第123页 |
| 5.2.9 回收率测定 | 第123-124页 |
| 5.2.10 稳定性检测 | 第124页 |
| 5.2.11 明胶微球和支架的载药量和包封率测定 | 第124页 |
| 5.2.12 甲泼尼龙明胶微球和支架的释药性质测定 | 第124页 |
| 5.2.13 微球对凝胶支架成型的影响检测 | 第124-125页 |
| 5.2.14 载微球凝胶支架的吸水性检测 | 第125页 |
| 5.2.15 载微球凝胶支架的MSC细胞相容性检测 | 第125页 |
| 5.2.16 BDNF-MSC和MP的联合埋植手术 | 第125页 |
| 5.2.17 组织染色 | 第125页 |
| 5.2.18 联合埋植物对炎症因子水平的影响检测 | 第125-126页 |
| 5.2.19 统计学分析 | 第126页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第126-144页 |
| 5.3.1 药物最大紫外吸收波长的检测 | 第126-127页 |
| 5.3.2 不同药物明胶微球的释药性质考察和载药明胶微球初选 | 第127-128页 |
| 5.3.3 甲泼尼龙液相检测方法的确立及标准曲线的绘制 | 第128-129页 |
| 5.3.4 液相检测方法的专属性考察 | 第129-131页 |
| 5.3.5 精密度检测 | 第131页 |
| 5.3.6 方法回收率检测 | 第131-132页 |
| 5.3.7 稳定性考察 | 第132页 |
| 5.3.8 明胶微球的表征 | 第132-133页 |
| 5.3.9 明胶微球的释药曲线 | 第133-134页 |
| 5.3.10 载MP明胶微球凝胶支架的构建 | 第134-137页 |
| 5.3.11 MP明胶微球对支架吸水性的影响 | 第137页 |
| 5.3.12 载微球支架的药物释放行为考察 | 第137-138页 |
| 5.3.13 载甲泼尼龙微球的支架的细胞相容性考察 | 第138-139页 |
| 5.3.14 甲泼尼龙微球与BDNF基因修饰MSC联合埋植的脊髓修复作用考察 | 第139-141页 |
| 5.3.15 联合埋植对脊髓组织炎症因子水平的影响 | 第141-144页 |
| 5.4 本章小结 | 第144-145页 |
| 全文总结与展望 | 第145-149页 |
| 本研究的创新点 | 第147页 |
| 对未来研究的展望 | 第147-149页 |
| 参考文献 | 第149-157页 |
| 文献综述 | 第157-177页 |
| References | 第172-177页 |
| 作者简历 | 第177-180页 |
