| 中文摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 中英文缩略词表 | 第13-15页 |
| 引言 | 第15-20页 |
| 1 选题背景 | 第15-18页 |
| 1.1 “带瘤生存”是肿瘤治疗的新理念,发挥中医药控瘤优势是实现患者“带瘤生存”的重要途径 | 第15-16页 |
| 1.2 针灸控瘤效应明确,正向调节肿瘤免疫功能是其发挥控瘤作用的重要机制 | 第16-17页 |
| 1.3 Micro RNAs为探索针灸控瘤效应的调控机制提供了崭新平台 | 第17-18页 |
| 2 研究内容 | 第18-19页 |
| 2.1 电针对荷瘤裸鼠控瘤效应的研究 | 第18页 |
| 2.2 电针控瘤效应的miRNAs表达谱构建与验证 | 第18-19页 |
| 2.3 miR-409-5p靶向抑制TGF-β1的调控网络构建 | 第19页 |
| 2.4 miR-409-5p对HepG2细胞的体外调控影响 | 第19页 |
| 2.5 电针控瘤效应的miR-409-5p靶向抑制TGF-β1分子调控机制研究 | 第19页 |
| 3 技术路线 | 第19-20页 |
| 实验一 电针对荷瘤裸鼠控瘤效应的研究 | 第20-32页 |
| 1 材料 | 第20-23页 |
| 1.1 实验动物、瘤株选备及实验场地 | 第20页 |
| 1.2 主要仪器 | 第20-21页 |
| 1.3 主要试剂 | 第21-22页 |
| 1.4 常用试剂及溶液配置 | 第22-23页 |
| 2 方法 | 第23-26页 |
| 2.1 肝癌细胞株HepG2复苏及培养 | 第23页 |
| 2.2 裸鼠皮下荷瘤模型建立 | 第23-24页 |
| 2.3 分组及干预措施 | 第24页 |
| 2.4 观察指标 | 第24-26页 |
| 2.5 数据处理及统计学分析 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-32页 |
| 3.1 荷瘤裸鼠一般状况观察 | 第26-27页 |
| 3.2 荷瘤生长情况 | 第27页 |
| 3.3 电针对荷瘤裸鼠控瘤效应的观测 | 第27-31页 |
| 3.4 荷瘤组织细胞形态学检查 | 第31-32页 |
| 实验二 电针控瘤效应的miRNAs表达谱构建及验证 | 第32-46页 |
| 1 材料 | 第32-34页 |
| 1.1 组织标本 | 第32页 |
| 1.2 主要仪器及耗材 | 第32-33页 |
| 1.3 主要试剂 | 第33页 |
| 1.4 常用试剂及材料配置 | 第33-34页 |
| 2 方法 | 第34-37页 |
| 2.1 LC Sciences芯片检测 | 第34-36页 |
| 2.2 差异基因miR-409-5p的定量qRT-PCR验证 | 第36-37页 |
| 2.3 数据处理及统计学分析 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-46页 |
| 3.1 基因芯片分析结果 | 第37-43页 |
| 3.2 差异基因miR-409-5p的qRT-PCR验证结果 | 第43-46页 |
| 实验三 miR-409-5p靶向抑制TGF-β1的调控通路构建 | 第46-69页 |
| 1 项目信息 | 第46-50页 |
| 1.1 数据库及使用软件信息 | 第46页 |
| 1.2 原始数据信息 | 第46-50页 |
| 2 方法 | 第50-51页 |
| 2.1 相关数据库的下载及信息提取 | 第50页 |
| 2.2 差异miRNAs的靶基因预测 | 第50页 |
| 2.3 差异miRNAs的GO与KEGG基因功能注释及富集性分析 | 第50-51页 |
| 2.4 miRNAs-KEGG-network网络关联表的构建 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-69页 |
| 3.1 生物信息数据分析 | 第51-58页 |
| 3.2 GO富集性分析 | 第58-63页 |
| 3.3 KEGG富集性分析 | 第63-66页 |
| 3.4 miRNAs-KEGG-network关联信息 | 第66-69页 |
| 实验四 miR-409-5p对HepG2细胞的体外调控影响 | 第69-81页 |
| 1 材料 | 第69-70页 |
| 1.1 细胞株 | 第69页 |
| 1.2 主要仪器 | 第69-70页 |
| 1.3 主要试剂 | 第70页 |
| 2 方法 | 第70-73页 |
| 2.1 肝癌细胞株HepG2复苏及培养 | 第70页 |
| 2.2 miR-409-5p mimics及negative control配制 | 第70-71页 |
| 2.3 细胞转染 | 第71页 |
| 2.4 MTT还原法 | 第71-72页 |
| 2.5 划痕实验 | 第72页 |
| 2.6 靶基因TGF-β1 mRNA的定量qRT-PCR验证 | 第72-73页 |
| 2.7 数据处理及统计学分析 | 第73页 |
| 3 结果 | 第73-81页 |
| 3.1 过表达miR-409-5p对HepG2细胞株增殖的影响 | 第73-76页 |
| 3.2 过表达miR-409-5p对HepG2细胞迁移能力的影响 | 第76-78页 |
| 3.3 靶基因TGF-β1的定量qRT-PCR验证 | 第78-81页 |
| 实验五 电针控瘤效应的miR-409-5p靶向抑制TGF-β1分子调控机制研究 | 第81-96页 |
| 1 材料 | 第81-82页 |
| 1.1 实验动物、瘤株选备及实验场地 | 第81页 |
| 1.2 主要仪器 | 第81页 |
| 1.3 主要试剂 | 第81-82页 |
| 1.4 常用试剂及溶液配置 | 第82页 |
| 2 方法 | 第82-86页 |
| 2.1 肝癌细胞株HepG2复苏及培养 | 第82页 |
| 2.2 荷瘤裸鼠模型建立 | 第82页 |
| 2.3 microOFF~(TM) antagomir-409-5p与miRNA antagomir Ncontrol瘤内定点注射 | 第82-83页 |
| 2.4 分组及干预措施 | 第83页 |
| 2.5 观察指标 | 第83-86页 |
| 2.6 数据处理及统计学分析 | 第86页 |
| 3 结果 | 第86-96页 |
| 3.1 荷瘤裸鼠一般状况观察 | 第86-87页 |
| 3.2 电针对荷瘤裸鼠控瘤作用的观测 | 第87-91页 |
| 3.3 荷瘤组织组织病理学检测 | 第91页 |
| 3.4 TGF-β1血清水平检测 | 第91-92页 |
| 3.5 荷瘤组织TGF-β1免疫组化检测 | 第92-94页 |
| 3.6 荷瘤组织PCNA免疫组化检测 | 第94-96页 |
| 讨论 | 第96-128页 |
| 1 针灸控瘤效应的中医理论基础 | 第96-101页 |
| 1.1 中医肿瘤防治溯源 | 第96-97页 |
| 1.2 针灸治瘤源流考 | 第97页 |
| 1.3 阴阳不和是肿瘤发生的根本原因,正气虚弱是主要病机 | 第97-98页 |
| 1.4 培补正气是中医药实现“带瘤生存”阴平阳秘的核心优势 | 第98-99页 |
| 1.5 表里经配穴阴阳调节理论是针灸控瘤效应发挥的指导依据 | 第99-100页 |
| 1.6 足三里与三阴交是针灸扶正固本、调和阴阳的常用穴位 | 第100-101页 |
| 2 针灸对肿瘤免疫功能的正向调节是实现“带瘤生存”的重要途径 | 第101-106页 |
| 2.1 针灸控瘤效应的肿瘤免疫理论基础 | 第101-102页 |
| 2.2 中医药控瘤优势是肿瘤姑息治疗的重要补充 | 第102-103页 |
| 2.3 “带瘤生存”实现过程中针灸优势凸显 | 第103-105页 |
| 2.4 针灸对肿瘤免疫功能的正向调节是发挥控瘤作用的重要基础 | 第105-106页 |
| 3 电针控瘤效应的验证 | 第106-108页 |
| 3.1 模型选择 | 第106-107页 |
| 3.2 操作选择 | 第107页 |
| 3.3 电针控瘤效应的疗效评估 | 第107-108页 |
| 4 miRNAs是阐释电针控瘤效应生物学机制的新手段 | 第108-116页 |
| 4.1 miRNA生成过程 | 第108-109页 |
| 4.2 miRNA作用机制 | 第109-111页 |
| 4.3 miRNA作用特点 | 第111页 |
| 4.4 miRNAs在恶性肿瘤中的重要作用 | 第111-112页 |
| 4.5 miRNA是中医药肿瘤防治研究中的热点 | 第112-114页 |
| 4.6 miRNAs提供了针灸作用机制研究的新平台 | 第114-115页 |
| 4.7 miRNAs表达谱分析的意义 | 第115页 |
| 4.8 TaqMan~(?)MicroRNA基因芯片检测优势分析 | 第115-116页 |
| 5 miR-409-5p表达谱筛选及验证 | 第116-117页 |
| 5.1 miR-409-5p表达谱筛选 | 第116页 |
| 5.2 miR-409-5p的qRT-PCR验证 | 第116-117页 |
| 6 靶基因TGF-β1预测分析过程 | 第117-119页 |
| 6.1 相关数据库预测结果 | 第117页 |
| 6.2 肿瘤相关miR-409-5p靶向抑制TGF-β1分子调控通路的构建 | 第117-119页 |
| 7 TGF-β1对恶性肿瘤的调控作用 | 第119-121页 |
| 7.1 TGF-β定义及信号转导途径 | 第119页 |
| 7.2 肿瘤相关TGF-β的生物学功能 | 第119-121页 |
| 8 miR-409-5p抑瘤效应的验证 | 第121-122页 |
| 8.1 miR-409-5p mimics控瘤效应体外实验的研究意义 | 第121页 |
| 8.2 miR-409-5p mimics对HepG2细胞体外调控的影响及意义 | 第121-122页 |
| 9 电针控瘤效应的miR-409-5p靶向抑制TGF-β1分子调控机制分析 | 第122-128页 |
| 9.1 miR-409-5p受体阻断模型选择 | 第122页 |
| 9.2 miR-409-5p受体阻断后电针控瘤效应的疗效评估 | 第122-123页 |
| 9.3 电针控瘤效应对TGF-β1的影响和意义 | 第123-124页 |
| 9.4 电针控瘤效应对PCNA的影响和意义 | 第124-125页 |
| 9.5 电针控瘤对miR-409-5p靶向抑制TGF-β1分子调控机制的影响和意义 | 第125-128页 |
| 本研究的创新点 | 第128-129页 |
| 结论 | 第129-130页 |
| 问题与展望 | 第130-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 参考文献 | 第132-145页 |
| 附件 | 第145-169页 |
| 综述一 针灸对肿瘤免疫综合调节作用的研究进展 | 第145-155页 |
| 参考文献 | 第153-155页 |
| 综述二 针灸调控microRNAs相关信号通路的研究思路分析 | 第155-162页 |
| 参考文献 | 第160-162页 |
| 综述三 针灸对TGF-β1调控作用机制的研究进展 | 第162-169页 |
| 参考文献 | 第167-169页 |
| 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第169-170页 |
