中文摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3页 |
中文文摘 | 第4-9页 |
绪论 | 第9-21页 |
1 海洋微生物资源 | 第9-15页 |
1.1 海洋微生物研究概况 | 第9-10页 |
1.2 深海热液区 | 第10-15页 |
2 磷酸酶 | 第15-19页 |
2.1 磷酸酶的分类 | 第15-19页 |
3 研究内容与意义 | 第19-21页 |
第一章 磷酸酶FM2382基因的克隆及生物信息学分析 | 第21-37页 |
第一节 材料与方法 | 第21-27页 |
1.1 实验材料 | 第21-24页 |
1.2 实验方法 | 第24-27页 |
第二节 结果与分析 | 第27-35页 |
2.1 磷酸酶FM2382的PCR扩增 | 第27页 |
2.2 克隆载体的鉴定 | 第27-28页 |
2.3 磷酸酶FM2382理化性质分析 | 第28-29页 |
2.4 FM2382氨基酸序列聚类分析 | 第29-30页 |
2.5 FM2382氨基酸序列的同源性分析 | 第30-34页 |
2.6 FM2382同源建模分析 | 第34-35页 |
第三节 小结与讨论 | 第35-37页 |
第二章 磷酸酶FM2382的表达与纯化 | 第37-49页 |
第一节 材料与方法 | 第37-43页 |
1.1 实验材料 | 第37-39页 |
1.2 实验方法 | 第39-43页 |
第二节 结果与分析 | 第43-48页 |
2.1 表达载体的构建 | 第43-44页 |
2.2 FM2382的诱导表达 | 第44-45页 |
2.3 蛋白质分子量校正曲线绘制 | 第45-46页 |
2.4 蛋白质浓度测定 | 第46-48页 |
第三节 小结与讨论 | 第48-49页 |
第三章 FM2382酶学性质研究 | 第49-61页 |
第一节 材料与方法 | 第49-54页 |
1.1 实验材料 | 第49-50页 |
1.2 实验方法 | 第50-54页 |
第二节 结果与分析 | 第54-60页 |
2.1 FM2382脱卤酶活性 | 第54页 |
2.2 FM2382纯化结果分析 | 第54-55页 |
2.3 温度对磷酸酶FM2382活力的影响 | 第55-56页 |
2.4 pH对磷酸酶FM2382活力的影响 | 第56-58页 |
2.5 金属离子对磷酸酶FM2382活力的影响 | 第58页 |
2.6 酶促动力学参数 | 第58-60页 |
2.7 ATP酶活力的测定 | 第60页 |
第三节 小结与讨论 | 第60-61页 |
第四章 FM2382结构稳定性初步研究 | 第61-71页 |
第一节 材料与方法 | 第61-62页 |
1.1 实验材料 | 第61页 |
1.2 实验方法 | 第61-62页 |
第二节 结果与分析 | 第62-69页 |
2.1 溶解温度 | 第62-63页 |
2.2 去折叠和再折叠过程中二级结构变化 | 第63-64页 |
2.3 去折叠和再折叠过程中三级结构变化 | 第64页 |
2.4 参数A和内源荧光相图法分析 | 第64-68页 |
2.5 去折叠和再折叠酶活力的变化 | 第68-69页 |
第三节 小结与讨论 | 第69-71页 |
第五章 FM2382定点突变分子改造 | 第71-79页 |
第一节 材料与方法 | 第71-74页 |
1.1 实验材料 | 第71页 |
1.2 实验方法 | 第71-74页 |
第二节 结果与分析 | 第74-77页 |
2.1 突变体蛋白的克隆表达与纯化 | 第74-75页 |
2.2 突变体磷酸酶活性分析 | 第75-76页 |
2.3 突变体ATP酶活性分析 | 第76-77页 |
第三节 小结与讨论 | 第77-79页 |
第六章 结论 | 第79-81页 |
附录 主要符号对照表 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-93页 |
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第93-95页 |
致谢 | 第95-97页 |
个人简历 | 第97-99页 |