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A亚群禽白血病病毒gp85囊膜蛋白原核表达及初步应用

中文摘要第1-12页
Abstract第12-14页
1 引言第14-21页
   ·ALV病原学特征第14页
   ·禽白血病病毒基因结构第14-15页
   ·ALV-A致病性第15-16页
   ·ALV-A流行病学第16-17页
   ·ALV-A的诊断检测方法第17-19页
     ·病毒分离和鉴定第17-18页
     ·血清学检测方法第18页
     ·分子生物学法第18-19页
   ·我国ALV-A的防治现状第19页
   ·目前在ALV-A净化中存在的主要问题第19-20页
   ·本研究的目的和意义第20-21页
2 材料与方法第21-39页
   ·材料第21-22页
     ·病毒和细胞来源第21页
     ·菌种和载体质粒第21页
     ·主要试剂第21页
     ·实验动物第21-22页
     ·主要仪器第22页
     ·实验地点第22页
   ·ALV-A gp85基因的表达及蛋白的纯化鉴定第22-28页
     ·病毒DNA的获取第22页
     ·引物设计与合成第22-23页
     ·大肠杆菌感受态的制备第23页
     ·ALV-A gp85基因原核表达载体的构建第23-26页
     ·重组gp85蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化第26-28页
   ·A亚群gp85重组蛋白亚单位疫苗抗原的研究第28-31页
     ·试验材料第28页
     ·试验设计第28-29页
     ·免疫原的制备第29页
     ·检测指标第29-30页
     ·雏鸡抗血清与ALV-A-SDAU09C1毒株体外中和试验和抗体的IFA鉴定第30-31页
     ·数据处理第31页
   ·A亚群gp85重组蛋白用于A亚群单克隆抗体的研究第31-39页
     ·小鼠的免疫第31-32页
     ·SP2/0 骨髓瘤细胞与饲养层细胞的制备第32-33页
     ·细胞融合第33-34页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选、鉴定与克隆化培养第34-36页
     ·单克隆抗体腹水的制备第36-37页
     ·单克隆抗体的鉴定第37-39页
3 结果与分析第39-50页
   ·ALV-A gp85基因的原核表达第39-40页
     ·ALV-A gp85基因克隆PCR产物的鉴定第39页
     ·重组表达质粒的鉴定第39页
     ·gp85蛋白的诱导表达、纯化及鉴定第39-40页
   ·AVL-A gp85重组蛋白的免疫保护作用研究第40-46页
     ·ALV-A gp85重组蛋白与免疫佐剂联合接种种母鸡诱导抗体的变化第40-43页
     ·母源抗体对雏鸡的免疫保护作用第43-44页
     ·雏鸡血清抗体与ALV-A-SDAU09C1毒株体外中和试验和抗体的IFA鉴定第44-46页
     ·攻毒后健康状况检测第46页
     ·疫苗安全性评估第46页
   ·A亚群gp85重组蛋白制备单克隆抗体的研究第46-50页
     ·杂交瘤细胞的融合第46-47页
     ·阳性杂交瘤细胞分泌抗体的鉴定第47-48页
     ·单克隆抗体腹水的制备与鉴定第48-50页
4 讨论第50-54页
   ·ALV-A gp85重组蛋白的制备第50-51页
   ·ALV-A gp85亚单位疫苗的保护作用第51-53页
   ·ALV-A单克隆抗体的制备第53-54页
5 结论第54页
6 创新点第54-55页
参考文献第55-60页
致谢第60-61页
攻读学位期间发表的论文第61页

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