| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩略词一览表 | 第9-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-26页 |
| 1 副猪嗜血杆菌 | 第13-20页 |
| ·副猪嗜血杆菌病概述 | 第13页 |
| ·副猪嗜血杆菌的特性 | 第13-14页 |
| ·病原特性 | 第13页 |
| ·培养特性 | 第13-14页 |
| ·副猪嗜血杆菌主要毒力因子 | 第14-15页 |
| ·外膜蛋白(OMP) | 第14页 |
| ·荚膜多糖(CP) | 第14-15页 |
| ·脂多糖(LPS) | 第15页 |
| ·转铁蛋白 | 第15页 |
| ·菌毛 | 第15页 |
| ·酶类 | 第15页 |
| ·副猪嗜血杆菌病的发病机理 | 第15-16页 |
| ·副猪嗜血杆菌病的流行病学 | 第16页 |
| ·临床症状及病理变化 | 第16-17页 |
| ·副猪嗜血杆菌诊断方法 | 第17-18页 |
| ·细菌分离 | 第17页 |
| ·血清学诊断方法 | 第17页 |
| ·PCR方法 | 第17-18页 |
| ·副猪嗜血杆菌病的治疗与防制 | 第18-20页 |
| ·药物防治 | 第18页 |
| ·疫苗 | 第18-20页 |
| 2 支气管败血波氏杆菌病 | 第20-25页 |
| ·支气管败血波氏杆菌病概述 | 第20页 |
| ·支气管败血波氏杆菌的特性 | 第20页 |
| ·病原特性 | 第20页 |
| ·培养特性 | 第20页 |
| ·支气管败血波氏杆菌主要毒力因子 | 第20-22页 |
| ·丝状血凝素(FHA) | 第21页 |
| ·百日咳杆菌粘附素(PRN) | 第21页 |
| ·菌毛(fimbriae) | 第21页 |
| ·腺苷环化酶溶血素(AC-Hly) | 第21页 |
| ·皮肤坏死毒素(DNT) | 第21-22页 |
| ·Ⅲ型分泌系统(type-Ⅲ secretion system) | 第22页 |
| ·支气管败血波氏杆菌病的发病机理 | 第22页 |
| ·支气管败血波氏杆菌病的流行特征 | 第22-23页 |
| ·临床症状及病理变化 | 第23页 |
| ·支气管败血波氏杆菌诊断方法 | 第23-24页 |
| ·传统诊断方法 | 第23-24页 |
| ·分子生物学诊断 | 第24页 |
| ·支气管败血波氏杆菌病的治疗与防制 | 第24-25页 |
| ·药物防治 | 第24-25页 |
| ·疫苗预防 | 第25页 |
| ·饲养管理 | 第25页 |
| 3 本研究的目的意义及主要内容 | 第25-26页 |
| 第二章 副猪嗜血杆菌和猪支气管败血波氏杆菌双重PCR检测方法的建立 | 第26-44页 |
| 1 材料与方法 | 第26-27页 |
| ·菌株及病料 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·引物的设计与合成 | 第26-27页 |
| ·模板的制备 | 第27页 |
| 2 单一检测Hps和Bb的PCR方法的建立 | 第27-28页 |
| ·单一PCR扩增及Hps各血清型检测 | 第27-28页 |
| ·PCR产物检测 | 第28页 |
| ·单一PCR各参数的优化 | 第28页 |
| ·单一PCR的特异性检验 | 第28页 |
| ·单一PCR的敏感性检验 | 第28页 |
| 3 双重PCR检测方法的建立 | 第28-30页 |
| ·双重PCR条件的优化 | 第28-29页 |
| ·双重PCR方法敏感性试验 | 第29页 |
| ·双重PCR方法的特异性试验 | 第29页 |
| ·双重PCR方法的重复性试验 | 第29页 |
| ·双重PCR阳性产物测序及序列分析 | 第29-30页 |
| ·双重PCR方法与其他检测方法的比较 | 第30页 |
| 4 结果 | 第30-42页 |
| ·单一PCR方法的建立 | 第30-36页 |
| ·单一PCR扩增及Hps各血清型检测 | 第30-31页 |
| ·单一PCR阳性产物的克隆测序与序列分析 | 第31-32页 |
| ·单一PCR扩增各参数的优化结果 | 第32-33页 |
| ·单一PCR特异性试验结果 | 第33-34页 |
| ·单一PCR敏感性试验结果 | 第34-36页 |
| ·双重PCR扩增条件的优化结果 | 第36-42页 |
| ·双重PCR引物浓度的优化 | 第36页 |
| ·双重PCR退火温度优化结果 | 第36-37页 |
| ·双重PCR延伸时间优化结果 | 第37页 |
| ·双重PCR dNTPs浓度的优化 | 第37-38页 |
| ·双重PCR rTaq DNA polymerase浓度的优化 | 第38-39页 |
| ·双重PCR MgCL2浓度的优化 | 第39页 |
| ·双重PCR方法的确定 | 第39页 |
| ·双重PCR特异性试验 | 第39-40页 |
| ·双重PCR敏感性试验 | 第40-41页 |
| ·双重PCR重复性试验 | 第41页 |
| ·双重PCR阳性产物测序及序列分析 | 第41页 |
| ·双重PCR方法与其他检测方法效果比较 | 第41-42页 |
| 5 分析讨论 | 第42-43页 |
| 6 结论 | 第43-44页 |
| 第三章 副猪嗜血杆菌和猪支气管败血波氏杆菌双重PCR检测方法的应用 | 第44-52页 |
| 1 实验材料 | 第44页 |
| ·病料 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-45页 |
| ·病料处理及模板的制备 | 第44页 |
| ·Hps和Bb双重PCR检测 | 第44页 |
| ·双重PCR方法运用于菌落与组织样品的检测 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-49页 |
| ·临床样品中不同组织的感染情况 | 第45页 |
| ·临床病料中Hps和Bb的感染情况 | 第45-49页 |
| ·不同地区感染情况调查 | 第46-47页 |
| ·不同季节感染情况调查 | 第47-48页 |
| ·混合感染情况调查 | 第48页 |
| ·不同日龄感染情况调查 | 第48-49页 |
| ·双重PCR方法运用于菌落与组织样品的检测 | 第49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| ·易感部位 | 第49-50页 |
| ·地区分布 | 第50页 |
| ·季节分布 | 第50页 |
| ·混合感染 | 第50-51页 |
| ·不同日龄感染情况 | 第51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第61页 |
