| 摘要 | 第1-7页 |
| abstract | 第7-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-31页 |
| ·研究背景 | 第17-18页 |
| ·NcRNA | 第18-21页 |
| ·NcRNA的种类 | 第19页 |
| ·NcRNA的功能 | 第19-20页 |
| ·NcRNA小家族成员——miRNA与siRNA | 第20-21页 |
| ·MicroRNA的来源及其作用机制 | 第21-22页 |
| ·MicroRNA的特征 | 第22-23页 |
| ·MicroRNAs的存在形式 | 第22页 |
| ·MicroRNA的生物学特性 | 第22-23页 |
| ·MiRNA、miRNA-1和miRNA-133的功能及其研究进展 | 第23-27页 |
| ·MiRNAs的功能 | 第23-24页 |
| ·MiRNA-1和miRNA-133对动物发育的调控作用 | 第24-25页 |
| ·MiRNA-1和miRNA-133对肌细胞增殖与分化的调控 | 第25-26页 |
| ·MiRNA-1和miRNA-133对动物疾病发生的影响 | 第26-27页 |
| ·MicroRNA基因的鉴定 | 第27-28页 |
| ·构建富集miRNA的cDNA文库法 | 第27页 |
| ·生物信息学分析法 | 第27-28页 |
| ·MiRNA靶基因的预测与鉴定 | 第28-30页 |
| ·MiRNA靶基因的预测 | 第28-29页 |
| ·MiRNA靶基因的鉴定 | 第29-30页 |
| ·MiRNA的研究展望 | 第30-31页 |
| 第二章 山羊miR-1和miR-133及其靶基因(HDAC4和SRF)时空表达规律研究 | 第31-53页 |
| 引言 | 第31页 |
| ·试验材料 | 第31-33页 |
| ·试验对象 | 第31页 |
| ·主要仪器与设备 | 第31-32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·相关溶液配置 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-40页 |
| ·MiRNA-1和miRNA-133引物设计与合成 | 第33页 |
| ·总RNA提取和cDNA合成 | 第33-36页 |
| ·MiR-1和miR-133靶基因的预测 | 第36页 |
| ·3'RACE法扩增靶基因的3'UTR | 第36-38页 |
| ·MiR-1和miR-133及其靶基因(HDAC4和SRF)荧光定量检测 | 第38-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-48页 |
| ·总RNA的抽提与检测 | 第40-41页 |
| ·MiR-1、miR-133以及靶基因(HDAC4和SRF)基因的获得 | 第41-43页 |
| ·3'RACE方法扩增HDAC4 3'UTR和SRF 3'UTR | 第43页 |
| ·3'RACE方法扩增HDAC4 3'UTR和SRF 3'UTR基因测序图 | 第43-44页 |
| ·荧光定量的结果 | 第44-48页 |
| ·讨论 | 第48-52页 |
| ·RNA纯度的测定与检验 | 第48页 |
| ·测序方式的选择 | 第48-49页 |
| ·MiR-1和miR-133的靶基因预测 | 第49页 |
| ·3'RACE方法扩增靶基因HDAC4 3'UTR和SRF 3'UTR以及测序分析 | 第49-50页 |
| ·山羊miR-1和miR-133以及靶基因(HDAC4和SRF)定量方法的建立 | 第50页 |
| ·关于miRNA、miR-1和miR-133及其靶基因的功能 | 第50-51页 |
| ·山羊生长发育与miR-1和miR-133可能的关系 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第三章 MiR-1和miR-133及其靶基因(HDAC4和SRF)在山羊骨骼肌卫星细胞中的表达规律 | 第53-59页 |
| 引言 | 第53页 |
| ·材料和方法 | 第53-55页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| ·常用溶液的配制 | 第53-54页 |
| ·细胞培养 | 第54页 |
| ·细胞中总RNA的提取 | 第54-55页 |
| ·cDNA合成 | 第55页 |
| ·MiR-1和miR-133及其靶基因(HDAC4和SRF)在山羊骨骼肌卫星细胞中的表达规律 | 第55页 |
| ·数据分析 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-57页 |
| ·细胞总RNA提取结果 | 第55-56页 |
| ·MiR-1和miR-133及其靶基因(HDAC4和SRF)在山羊骨骼肌卫星细胞中的表达规律 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57页 |
| ·小结 | 第57-59页 |
| 第四章 MiR-1和miR-133对靶基因(HDAC4和SRF)的调控研究 | 第59-70页 |
| 引言 | 第59页 |
| ·材料和方法 | 第59-63页 |
| ·主要试剂 | 第59-60页 |
| ·主要仪器 | 第60页 |
| ·常用溶液的配制 | 第60-61页 |
| ·Real Time PCR和Western blotting对miR-1和miR-133靶基因表达的验证 | 第61-63页 |
| ·MiRNA mimics转染条件的摸索 | 第61-63页 |
| ·结果 | 第63-68页 |
| ·细胞总RNA提取结果 | 第63-64页 |
| ·MiRNA mimics转染条件的摸索结果 | 第64-65页 |
| ·MiR-1和miR-133 mimics瞬时转染结果 | 第65-66页 |
| ·MiR-1和miR-133 mimics瞬转后HDAC4和SRF mRNA表达的检测 | 第66-67页 |
| ·miR-1和miR-133 mimics转染后HDAC4和SRF蛋白的表达的检测 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-69页 |
| ·小结 | 第69-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 作者简历 | 第80-81页 |
