摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
上篇 文献综述 | 第8-27页 |
第一章 产酶溶杆菌的研究进展 | 第9-17页 |
1 产酶溶杆菌的分类地位 | 第9-10页 |
2 产酶溶杆菌的生化特性 | 第10-11页 |
3 产酶溶杆菌对植物病害的生防机理 | 第11-17页 |
·胞外水解酶 | 第11-12页 |
·热稳定抗真菌因子HSAF(Heat-Stable Antifungal Factor) | 第12-14页 |
·WAP-8294A | 第14-17页 |
第二章 细菌的群体感应系统 | 第17-27页 |
1 群体感应系统(Quorum Sensing System) | 第17-18页 |
2 依赖DSF的群体感应系统 | 第18-21页 |
·DSF群体感应信号分子的发现 | 第18页 |
·DSF群体感应信号分子的结构 | 第18-19页 |
·DSF群体感应信号分子参与调控的生物学功能 | 第19页 |
·DSF群体感应信号分子的传导通路及调控网络 | 第19-21页 |
3 依赖DF的群体感应系统 | 第21-24页 |
·DF群体感应信号分子的发现 | 第21页 |
·DF群体感应信号分子的结构 | 第21-22页 |
·DF群体感应信号分子参与调控的生物学功能 | 第22-23页 |
·DF与DSF两种群体感应信号分子的累积效应 | 第23-24页 |
4 本研究的目的及意义 | 第24-27页 |
下篇 研究内容 | 第27-65页 |
1 实验材料 | 第29-34页 |
·菌株、质粒和引物 | 第29-31页 |
·培养基 | 第31-33页 |
·酶、试剂盒和化学试剂 | 第33-34页 |
2 实验方法 | 第34-46页 |
·细菌基因组DNA的提取 | 第34-35页 |
·质粒的提取 | 第35页 |
·DNA操作方法和体系 | 第35-36页 |
·质粒的转化 | 第36-38页 |
·缺失突变体的构建 | 第38-39页 |
·lenB2互补菌株和空载体对照菌株的构建 | 第39页 |
·AxanB2的lenB2互补菌株和空载体对照菌株的构建 | 第39页 |
·lenB2基因是不是一个合成酶证明 | 第39页 |
·DF的提取及HPLC检测 | 第39-40页 |
·黄色素的提取及测定 | 第40页 |
·次生代谢产物HSAF、WAP-8294A2的提取及HPLC检测 | 第40-42页 |
·菌落形态观察 | 第42页 |
·四种胞外酶检测 | 第42-43页 |
·相对实时荧光定量PCR和反转录PCR | 第43-46页 |
·lenB2基因的基因芯片分析 | 第46页 |
·数据处理 | 第46页 |
3 结果分析 | 第46-61页 |
·L.enzymobacter OH11中xanB2与rpfF同源基因的鉴定 | 第46-47页 |
·lenB2敲除突变体及lenB2与rpfF_(OH11)双敲除突变体的构建 | 第47-50页 |
·互补菌株的构建 | 第50-51页 |
·LenB2是DF生物合成的关键酶 | 第51-52页 |
·LenB2/DF与RpFF_(OH11)/DSF参与调控黄色素的生物合成 | 第52-53页 |
·LenB2/DF与RpfF_(OH11)/DSF正向平行调控HSAF的生物合成 | 第53-56页 |
·LenB2/DF与RpfF_(OH11)/DSF正向平行调控WAP-8294A2的生物合成 | 第56-58页 |
·RpfF_(OH11)/DSF参与调控细菌的菌落形态 | 第58-59页 |
·LenB2/DF与RpfF_(OH11)/DSF不参与调控胞外酶的生物合成 | 第59-60页 |
·LenB2/DF和RpfF_(OH11)/DSF是全局性调控因子 | 第60-61页 |
4. 讨论 | 第61-63页 |
5. 研究总结 | 第63页 |
6. 创新点 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
附录一 产酶溶杆菌受DF调控基因的鉴定及功能分类 | 第73-80页 |
附录二 产酶溶杆菌受DSF调控基因的鉴定及功能分类 | 第80-94页 |
附录三 产酶溶杆菌受DF/DSF共同调控基因的鉴定及功能分类 | 第94-97页 |
附录四 qRT-PC民与基因芯片相关基因表达量的结果比较 | 第97-99页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第99-101页 |
致谢 | 第101-103页 |
本论文研究受资助项目 | 第103页 |