中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一部分 前言 | 第11-25页 |
·油菜素内酯 | 第11-12页 |
·油菜素内酯的生物合成途径 | 第12-13页 |
·油菜素内酯的信号转导 | 第13页 |
·油菜素内酯的生物代谢途径 | 第13-15页 |
·BAS1 | 第14页 |
·SOB7 | 第14-15页 |
·UGT73C5和UGT73C6,C-23糖基转移酶 | 第15页 |
·油菜素内酯与其他激素的联系 | 第15-16页 |
·转录调控 | 第16-18页 |
·HD-Zip | 第16-17页 |
·HAT1,HAT3 | 第17-18页 |
·SERKs | 第18-22页 |
·BAK1(SERK3),BKK1(SERK4) | 第21-22页 |
·可变剪切 | 第22-25页 |
第二部分 实验方法 | 第25-36页 |
·构建pBAS1::GUS拟南芥转基因植株 | 第25-30页 |
·提取拟南芥植株的基因组DNA | 第25页 |
·克隆目的片段 | 第25页 |
·琼脂糖凝胶电泳及胶回收 | 第25-26页 |
·BP反应 | 第26页 |
·大肠杆菌感受态制备 | 第26-27页 |
·大肠杆菌的转化 | 第27页 |
·菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第27页 |
·菌种保存及质粒提取 | 第27页 |
·LR反应 | 第27-28页 |
·LR反应产物转化大肠杆菌 | 第28页 |
·菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第28页 |
·菌种保存及质粒提取 | 第28页 |
·农杆菌GV3101热激感受态制备 | 第28页 |
·农杆菌感受态转化 | 第28页 |
·农杆菌菌落PCR鉴定阳性克隆及菌种保存 | 第28-29页 |
·农杆菌介导浸花法转化拟南芥 | 第29页 |
·转基因植株筛选 | 第29-30页 |
·GUS染色 | 第30页 |
·材料培养 | 第30页 |
·染色 | 第30页 |
·转录因子的克隆与转基因植株构建 | 第30-31页 |
·拟南芥RNA提取,反转录为cDNA | 第30页 |
·转基因植株筛选 | 第30页 |
·拟南芥基因组DNA快速提取 | 第30-31页 |
·PCR鉴定转基因植株 | 第31页 |
·RT-PCR检测BAS1表达量变化 | 第31页 |
·拟南芥RNA提取,反转录为cDNA | 第31页 |
·RT-PCR | 第31页 |
·在pBAS1::GUS背景植株中超表达转录因子 | 第31-32页 |
·PCR鉴定SERK4的四种剪切方式 | 第32页 |
·将四种剪切方式分别超表达到Col-0,bri1-5,serk3 serk4背景 | 第32页 |
·四种剪切方式的克隆 | 第32页 |
·转基因植株筛选 | 第32-33页 |
·根长及下胚轴测量 | 第33页 |
·根长测量 | 第33页 |
·下胚轴测量 | 第33页 |
·检测不同条件处理后各种剪切方式的表达量变化 | 第33-34页 |
·不同激素急性处理 | 第33页 |
·不同激素长时间处理 | 第33页 |
·不同温度处理 | 第33页 |
·不同胁迫处理 | 第33页 |
·RT-PCR检测不同剪切方式的表达量 | 第33-34页 |
·不同组织中四种剪切方式表达量差异比较 | 第34-35页 |
·拟南芥不同组织的RNA提取,反转录为cDNA | 第34-35页 |
·RT-PCR检测不同剪切方式的表达量 | 第35页 |
·serk3 serk4背景下转基因材料的子叶台盼蓝染色 | 第35-36页 |
第三部分 实验结果与分析 | 第36-51页 |
·转录因子的筛选 | 第36-38页 |
·转录因子预测 | 第36-37页 |
·HAT1OX,HAT3OX植株表型 | 第37-38页 |
·pBAS1::GUS背景植株筛选 | 第38页 |
·GUS染色检测HAT1,HAT3超表达对BAS1表达量的影响 | 第38-40页 |
·SERK4四种不同剪切方式的鉴定 | 第40-42页 |
·不同组织中四种剪切方式表达量比较 | 第42-43页 |
·不同处理后四种剪切方式表达量变化 | 第43-45页 |
·不同激素处理 | 第43-44页 |
·不同温度处理 | 第44-45页 |
·不同胁迫处理 | 第45页 |
·四种剪切方式超表达到Col-0,bri1-5,serk3 serk4中的表型 | 第45-48页 |
·四种剪切方式超表达到bri1-5 背景后的根长和下胚轴比较 | 第48-51页 |
第四部分 讨论 | 第51-54页 |
·BAS1转录因子筛选 | 第51-52页 |
·HAT1,HAT3超表达下调了BAS1的表达量 | 第51-52页 |
·SERK4四种剪切方式功能的研究 | 第52-54页 |
·Col-0 背景下四种剪切方式的功能研究 | 第52-53页 |
·bri1-5 背景下四种剪切方式的功能研究 | 第53页 |
·serk3 serk4背景下四种剪切方式的功能研究 | 第53-54页 |
附录 | 第54-61页 |
LB培养基配方 | 第54页 |
1/2MS培养基配方 | 第54页 |
GUS染色液配方 | 第54页 |
台盼蓝染色液 | 第54-55页 |
抗生素母液浓度 | 第55页 |
感受态制备中用到的溶液配方 | 第55-56页 |
引物序列 | 第56-59页 |
PCR体系及程序 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67页 |