| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 引言 | 第8-14页 |
| 1 树鼩基本概况 | 第8-9页 |
| ·树鼩的生物学概况 | 第8页 |
| ·树鼩的分类地位以及作为新型实验动物的特征 | 第8-9页 |
| 2 树鼩病毒感染动物模型 | 第9-12页 |
| ·病毒性肝炎树鼩动物模型 | 第9-11页 |
| ·手足口病树鼩动物模型 | 第11-12页 |
| 3 细胞膜表面分子CD4以及细胞炎症因子IL-6的分子特征及研究意义 | 第12-14页 |
| ·CD4 | 第12页 |
| ·IL-6 | 第12-13页 |
| ·CD4和IL-6分子基因分型的意义 | 第13-14页 |
| 第一部分 野生型树鼩CD4以及IL-6分子全长编码序列的克隆及分析 | 第14-39页 |
| 1. 研究目的及意义 | 第14页 |
| 2. 材料和方法 | 第14-16页 |
| ·实验动物 | 第14页 |
| ·菌种与质粒 | 第14页 |
| ·主要试剂及材料 | 第14-15页 |
| ·主要仪器设备 | 第15页 |
| ·引物设计 | 第15-16页 |
| 3. 实验方法 | 第16-24页 |
| ·树鼩外周血淋巴细胞的分离与刺激培养 | 第16-17页 |
| ·树鼩外周血淋巴细胞总RNA的提取 | 第17页 |
| ·总RNA逆转录为cDNA | 第17-18页 |
| ·PCR扩增目的基因全长编码序列 | 第18-19页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第19-20页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第20页 |
| ·受体菌DH5a的感受态制备 | 第20-21页 |
| ·纯化产物连接于pMD19-T载体 | 第21-22页 |
| ·转化感受态细胞DH5a | 第22页 |
| ·阳性重组质粒的提取 | 第22-23页 |
| ·酶切鉴定目的片段 | 第23页 |
| ·数据分析 | 第23-24页 |
| 4. 实验结果 | 第24-36页 |
| ·PCR条件优化结果 | 第24-25页 |
| ·CD4及IL-6全长编码序列的PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·PCR产物胶回收 | 第26-27页 |
| ·重组质粒pMD19-T的构建与双酶切鉴定及测序 | 第27-28页 |
| ·树鼩CD4分子基因序列及氨基酸序列进化树的构建 | 第28-31页 |
| ·树鼩CD4分子基因序列与氨基酸序列突变对比 | 第31-32页 |
| ·树鼩IL-6分子基因序列及氨基酸序列进化树的构建 | 第32-34页 |
| ·树鼩IL-6分子基因序列与氨基酸序列突变对比 | 第34-36页 |
| 5 分析与讨论 | 第36-37页 |
| 6 小结与展望 | 第37-39页 |
| 第二部分 人工繁育树鼩CD4以及IL-6全长编码基因克隆与分析 | 第39-51页 |
| 1 研究目的及意义 | 第39页 |
| 2 实验材料和方法 | 第39-40页 |
| 3 实验结果 | 第40-47页 |
| ·CD4及IL-6全长编码序列的PCR扩增 | 第40-42页 |
| ·PCR产物胶回收 | 第42页 |
| ·重组质粒pMD19-T的构建与双酶切鉴定及测序 | 第42-43页 |
| ·F1代及F2代中缅树鼩CD4分子基因序列及氨基酸序列突变对比 | 第43-45页 |
| ·F1代及F2代中缅树鼩IL-6分子基因序列及氨基酸序列突变对比 | 第45-47页 |
| 4 分析与讨论 | 第47-49页 |
| 5 小结及展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 附录一 CD4以及IL-6阳性样品测序序列 | 第55-84页 |
| 附录二 主要缩略词表 | 第84-85页 |
| 附录三 主要溶液配制方法 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 研究生简历及已经录用的文章 | 第87-88页 |
