| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-30页 |
| ·细胞周期概述 | 第16页 |
| ·细胞周期的调控 | 第16-25页 |
| ·细胞周期蛋白和周期蛋白依赖性激酶 | 第16-19页 |
| ·细胞周期调控因子对周期的调控 | 第19-20页 |
| ·DNA复制起始的调控 | 第20-25页 |
| ·细胞周期因子Geminin的功能 | 第25-29页 |
| ·Geminin蛋白 | 第25页 |
| ·Geminin蛋白的结构域 | 第25-26页 |
| ·Geminin在复制起始中的功能 | 第26-28页 |
| ·Geminin在细胞周期中的作用 | 第28页 |
| ·Geminin在胚胎发育中的功能 | 第28-29页 |
| ·脊椎动物Geminin相似蛋白与细胞周期调控 | 第29-30页 |
| 第二章 引言 | 第30-32页 |
| ·研究背景与目的意义 | 第30-31页 |
| ·主要研究内容 | 第31页 |
| ·技术路线 | 第31-32页 |
| 第三章 BmGem1,BmGem2与BmCdt1之间的相互作用 | 第32-50页 |
| ·材料与方法 | 第32-41页 |
| ·主要材料 | 第32页 |
| ·主要试剂及溶液配制 | 第32-35页 |
| ·主要仪器 | 第35-36页 |
| ·主要实验方法及步骤 | 第36-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-48页 |
| ·BiFC分析BmGem1、BmGem2和BmCdt1之间的相互作用 | 第41-42页 |
| ·免疫共沉淀分析BmGem1和BmGem2之间的相互作用 | 第42-45页 |
| ·免疫共沉淀分析BmGem1,BmGem2与BmCdt1的相互作用 | 第45-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 BmGem基因干涉对家蚕细胞影响 | 第50-64页 |
| ·材料与方法 | 第50-53页 |
| ·家蚕细胞系 | 第50页 |
| ·主要试剂及溶液配制 | 第50-51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·主要实验方法及步骤 | 第51-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-62页 |
| ·干涉质粒载体构建 | 第53-54页 |
| ·基因干涉效果检测 | 第54-56页 |
| ·BmGem基因干涉后家蚕细胞体积大小的变化 | 第56-59页 |
| ·BmGem基因干涉对细胞增殖活性的影响 | 第59-60页 |
| ·BmGem基因干涉对细胞周期和DNA含量的影响 | 第60-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 第五章 BmGem基因过表达对家蚕细胞的影响 | 第64-74页 |
| ·材料与方法 | 第64-67页 |
| ·家蚕细胞系 | 第64页 |
| ·主要试剂及溶液配制 | 第64页 |
| ·实验所需引物 | 第64-65页 |
| ·主要实验方法及步骤 | 第65-67页 |
| ·结果与分析 | 第67-73页 |
| ·BmGem基因过表达载体的构建 | 第67页 |
| ·BmGeml和BmGem2融合蛋白在家蚕细胞中的亚细胞定位 | 第67-68页 |
| ·BmGem过表达在家蚕细胞中相对表达量分析 | 第68-69页 |
| ·过表达BmGem基因对细胞形态的影响 | 第69-70页 |
| ·过表达BmGem基因对细胞增殖活性的影响 | 第70页 |
| ·过表达BmGem基因对细胞周期的影响 | 第70-73页 |
| ·讨论 | 第73-74页 |
| 第六章 BmGem2相互作用蛋白的筛选及鉴定 | 第74-100页 |
| ·材料 | 第74-75页 |
| ·家蚕及家蚕细胞系 | 第74页 |
| ·主要试剂及溶液配制 | 第74-75页 |
| ·主要实验方法及步骤 | 第75-89页 |
| ·RNA提取 | 第75-76页 |
| ·mRNA的分离 | 第76-77页 |
| ·DSN均一化Uncut cDNA初级文库的构建 | 第77-83页 |
| ·pGADT7-DEST酵母双杂交文库的构建 | 第83-84页 |
| ·酵母双杂交筛选BmGem2相互作用蛋白 | 第84-87页 |
| ·酵母双杂交文库筛选 | 第87页 |
| ·新基因克隆及载体构建 | 第87-89页 |
| ·其它实验步骤参照第三,四,五章节 | 第89页 |
| ·结果与分析 | 第89-99页 |
| ·家蚕DSN均一化酵母双杂交cDNA文库(三框型)构建 | 第89-90页 |
| ·pGBKT7-BmGem2诱饵载体的构建 | 第90-91页 |
| ·pGBKT7-BmGem2诱饵载体自激活检测 | 第91页 |
| ·酵母双杂交阳性克隆鉴定 | 第91-92页 |
| ·酵母阳性克隆质粒提取和测序比对 | 第92-93页 |
| ·BmGem2相互作用蛋白的验证 | 第93-97页 |
| ·新基因在5龄第3天家蚕各组织中的相对表达分析 | 第97-99页 |
| ·讨论 | 第99-100页 |
| 第七章 综合与结论 | 第100-102页 |
| 论文创新点 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-118页 |
| 附录 | 第118-120页 |
| 在读期间发表论文及参研课题 | 第120-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
