| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| ·ASPV的分类地位 | 第13页 |
| ·ASPV的生物学特性 | 第13-14页 |
| ·ASPV的分子特性 | 第14-15页 |
| ·ASPV的基因组结构及已报道的基因组序列 | 第14-15页 |
| ·ASPV的CP基因分子变异特点 | 第15页 |
| ·植物病毒TGB蛋白的功能及其互作特点 | 第15-17页 |
| ·TGB蛋白的亚细胞定位 | 第17-18页 |
| ·TGB蛋白与寄主蛋白的互作 | 第18-19页 |
| ·研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 来源于梨的ASPV的CP基因和TGB基因分子特性研究 | 第20-30页 |
| ·研究材料 | 第20页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·引物合成 | 第20页 |
| ·研究方法 | 第20-25页 |
| ·总RNA提取 | 第20-21页 |
| ·反转录（RT）PCR | 第21-22页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
| ·PCR产物纯化和连接 | 第22-23页 |
| ·转化大肠杆菌DH5α 感受态细胞 | 第23页 |
| ·菌液PCR及阳性克隆的筛选 | 第23-24页 |
| ·序列测定与分析 | 第24-25页 |
| ·结果与分析 | 第25-29页 |
| ·ASPV带毒情况检测 | 第25-26页 |
| ·ASPV分离物CP基因序列分析 | 第26-27页 |
| ·ASPV分离物TGB基因序列分析 | 第27-29页 |
| ·小结与讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 ASPV-LYC分离物基因组序列测定 | 第30-43页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·研究方法 | 第30-35页 |
| ·ASPV分离物LYC基因组扩增策略 | 第30-32页 |
| ·目标片段扩增 | 第32页 |
| ·3′端扩增 | 第32页 |
| ·5′RACE | 第32-35页 |
| ·目标基因克隆及序列分析 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-41页 |
| ·ASPV-LYC基因组各片段RT-PCR扩增结果 | 第35-36页 |
| ·ASPV-LYC基因组结构 | 第36-37页 |
| ·ASPV-LYC基因组序列分析 | 第37-40页 |
| ·系统进化分析 | 第40-41页 |
| ·重组分析 | 第41页 |
| ·小结与讨论 | 第41-43页 |
| 第四章ASPV的TGBp与寄主蛋白互作研究 | 第43-49页 |
| ·研究材料 | 第43页 |
| ·研究方法 | 第43-46页 |
| ·酵母双杂交引物设计及载体构建 | 第43-44页 |
| ·酵母感受态制备 | 第44-45页 |
| ·重组质粒转化Y2H gold酵母感受态细胞 | 第45页 |
| ·TGB基因重组质粒自激活和毒性测试 | 第45页 |
| ·TGBp间的互作 | 第45页 |
| ·寄主基因AT4/1 重组质粒自激活和毒性测试 | 第45-46页 |
| ·TGBp与AT4/1 蛋白的互作 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-48页 |
| ·病毒及候选寄主基因Y2H载体的构建 | 第46-47页 |
| ·酵母双杂交 | 第47-48页 |
| ·小结与讨论 | 第48-49页 |
| 第五章 ASPV的TGBp亚细胞定位研究 | 第49-57页 |
| ·研究材料 | 第49页 |
| ·研究方法 | 第49-53页 |
| ·入门载体构建引物设计及PCR扩增 | 第49-50页 |
| ·质粒提取 | 第50页 |
| ·目标基因回收及BP反应 | 第50-51页 |
| ·热击转化及序列测序 | 第51页 |
| ·目的载体构建 | 第51页 |
| ·重组质粒转化农杆菌GV3101 菌株及PCR鉴定 | 第51-52页 |
| ·农杆菌注射烟草及瞬时表达 | 第52页 |
| ·激光共聚焦显微镜检测荧光蛋白的表达 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-56页 |
| ·定位载体的构建 | 第53-54页 |
| ·激光共聚焦电镜下观察荧光信号 | 第54-56页 |
| ·小结与讨论 | 第56-57页 |
| 第六章 全文结论与展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录A | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
