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玉米ZmCIPK12和ZmCIPK21基因的克隆及抗逆分子机理研究

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
目录第6-9页
缩略词第9-10页
第一章 文献综述第10-28页
   ·绪论第10页
   ·植物耐盐、耐旱机制研究现状第10-17页
     ·植物对干旱、盐碱胁迫信号的感知第11-12页
     ·干旱、盐碱胁迫后信号传导机制第12-13页
     ·Ca~(2+)参与的逆境信号传导机制第13-14页
     ·干旱、盐碱条件下基因的转录调控第14-15页
     ·植物对干旱的适应机制第15-16页
     ·植物焦磷酸化酶参与的抗逆分子机制第16页
     ·离子胁迫与平衡机制第16-17页
   ·植物CIPK/CBL研究进展第17-26页
     ·CBL与CIPK蛋白的结构与特征第17-21页
     ·CBL与CIPK互作的特异性第21-22页
     ·Ca~(2+)-CBL-CIPK信号系统激活的分子机制第22-23页
     ·SOS参与的耐盐调控通路第23-24页
     ·CBL-CIPK信号系统参与植物低钾信号转导第24页
     ·CBL-CIPK参与的高pH条件下响应机制第24-25页
     ·CBL-CIPK调控网络与ABA相关的信号途径第25页
     ·CBL-CIPK信号途径参与其他调控通路第25-26页
   ·本研究的目的和意义第26-28页
第二章 玉米ZmCIPK12基因的功能解析第28-58页
   ·实验材料和方法第28-36页
     ·实验材料第28页
     ·玉米幼苗的胁迫处理第28页
     ·总RNA的提取和纯化第28-29页
     ·cDNA的合成第29页
     ·Real-time PCR第29-30页
     ·GATEWAY系统相关载体构建第30-31页
     ·过表达载体的构建与转基因拟南芥的获得第31页
     ·酵母双杂交互作验证实验第31-32页
     ·酵母文库筛选第32页
     ·酵母菌斑的X-Gal染色第32页
     ·PEG法转化玉米原生质体第32-34页
     ·蛋白纯化第34页
     ·Pull-down实验第34-35页
     ·Western blot杂交第35页
     ·Phos-tag法检测蛋白磷酸化作用第35-36页
   ·结果与分析第36-54页
     ·胁迫处理后玉米ZmCIPK12基因表达模式分析第36-37页
     ·过表达ZmCIPK12的转基因拟南芥植株的获得第37-38页
     ·过表达ZmCIPK12能提高拟南芥耐盐性第38-40页
     ·过表达ZmCIPK12能提高拟南芥耐旱性第40-41页
     ·ZmCIPK12的亚细胞定位第41-42页
     ·ZmCIPK12与玉米ZmCBL4及CBL8蛋白互作第42-44页
     ·筛选干旱文库获得CIPK12互作的靶蛋白第44-46页
     ·ZmCIPK12能够与4个GRF蛋白互作第46-48页
     ·ZmCIPK12与ZmPPase4的体外互作第48-50页
     ·ZmCIPK12磷酸化ZmPPase4第50-53页
     ·转化ZmPPa4的大肠杆菌在不同pH值条件下生长曲线第53-54页
   ·讨论第54-58页
     ·ZmCIPK12参与多种逆境胁迫的响应第54页
     ·ZmCIPK12在渗透胁迫和盐胁迫中的交叉调控第54-55页
     ·ZmCIPK12与CBL4共同参与的盐胁迫调控第55页
     ·ZmCIPK12与GRF共同参与的逆境调控第55-56页
     ·ZmPPase4可能参与了H~+浓度梯度驱动的渗透势调节第56-58页
第三章 玉米ZmCIPK21基因功能研究第58-73页
   ·材料和方法第58-60页
     ·实验材料第58页
     ·叶片H_2O_2的DAB染色第58页
     ·拟南芥叶片H_2O_2含量测定第58-59页
     ·亚细胞定位观察第59页
     ·植物组织中Na~+、K~+离子含量测定第59-60页
   ·结果与分析第60-70页
     ·ZmCIPK21基因的克隆及序列分析第60-61页
     ·ZmCIPK21基因在逆境胁迫后表达模式分析第61-62页
     ·35S::ZmCIPK21转基因拟南芥植株获得第62-63页
     ·过表达ZmCIPK21可提高拟南芥耐盐性第63-66页
     ·转35S::ZmCIPK21的拟南芥植株中两个DREB基因表达量上调第66-67页
     ·玉米ZmCIPK21亚细胞定位研究第67-68页
     ·过表达ZmCIPK21能恢复拟南芥cipkl-2盐敏感表型第68-70页
     ·过表达ZmCIPK21植株和互补株系体内Na~+、K~+含量第70页
   ·讨论第70-73页
     ·玉米ZmCIPK21与拟南芥CIPK基因家族进化上的共线性第71页
     ·ZmCIPK21维持了Na~+在植物细胞内的平衡第71-72页
     ·ZmCIPK21可能参与了两个转录因子DREB1转录因子的调控第72-73页
第四章 结论与展望第73-75页
   ·结论第73-74页
     ·ZmCIPK12参与植物耐盐、耐旱的调控通路第73页
     ·盐胁迫后ZmCIPK21可以维持植物体内Na~+、K~+离子平衡第73-74页
   ·展望第74-75页
参考文献第75-85页
致谢第85-86页
个人简介第86页

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