| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 专业词汇中英文对照 | 第11-12页 |
| 目录 | 第12-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-25页 |
| ·选题的背景及意义 | 第15-21页 |
| ·MLL基因与MLL白血病 | 第15-16页 |
| ·野生型MLL蛋白与MLL融合蛋白 | 第16-17页 |
| ·RUNX1/CBFβ蛋白复合体 | 第17-18页 |
| ·MLL融合蛋白通过表观遗传改变诱发白血病 | 第18-19页 |
| ·MLL白血病的发生需要“二次打击” | 第19页 |
| ·MLL白血病的协同突变 | 第19-21页 |
| ·国内外本学科领域的发展现状与趋势 | 第21-22页 |
| ·课题主要研究内容、预期目标 | 第22-23页 |
| ·拟采用的研究方法、技术路线、实验方案 | 第23-25页 |
| ·MLL融合蛋白研究 | 第23页 |
| ·MLL协同突变研究 | 第23-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-47页 |
| ·病人病历 | 第25-26页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·菌株与质粒 | 第26-27页 |
| ·细胞样品 | 第27页 |
| ·病人样本 | 第27页 |
| ·基因敲入小鼠 | 第27页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第27-34页 |
| ·实验试剂和耗材 | 第27-28页 |
| ·试剂盒 | 第28-29页 |
| ·常用溶液和培养基 | 第29-33页 |
| ·引物合成和测序 | 第33页 |
| ·实验仪器 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-47页 |
| ·细胞培养和冻存 | 第34-35页 |
| ·血液基因组DNA提取 | 第35-36页 |
| ·测定基因表达水平 | 第36-37页 |
| ·蛋白印迹(western blot) | 第37-40页 |
| ·血细胞、骨髓细胞涂片及染色 | 第40页 |
| ·小鼠原代骨髓细胞转染与病毒感染 | 第40-42页 |
| ·荧光原位杂交 | 第42-44页 |
| ·流式分选 | 第44页 |
| ·STR-PCR | 第44-45页 |
| ·双胞胎姐妹DNA与RNA样品的制备与建库 | 第45页 |
| ·基因组和转录组建库 | 第45-47页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第47-99页 |
| ·MLL融合蛋白与RUNX1/CBfβ蛋白复合体相互作用关系的研究 | 第47-67页 |
| ·MLL-BP与MLL融合蛋白可以下调RUNX1和CBFβ的蛋白水平 | 第47-54页 |
| ·泛素-蛋白酶体通路不能完全消除MLL-BP和MLL融合蛋白对RUNX1和CBFβ的抑制作用 | 第54-58页 |
| ·RUNX1和CBFβ的蛋白水平的下调由MLL蛋白的CXXC结构域及其侧翼结构介导 | 第58-60页 |
| ·RUNX1和CBFβ的蛋白水平在Mll-Af9敲入小鼠中下调 | 第60-61页 |
| ·RUNX1/CFβ蛋白水平低的骨髓细胞的集落生成能力提高 | 第61页 |
| ·Runx1/Cfβ亚效等位基因表型导致造血干祖细胞(HSPC)的扩增 | 第61-63页 |
| ·恢复RUNX1的蛋白水平可以抑制MLL并诱导细胞分化 | 第63-67页 |
| ·全基因组测序研究MLL白血病的协同突变 | 第67-93页 |
| ·MICM分型确认病人为AML-M5白血病,符合MLL白血病表型 | 第67-70页 |
| ·STR-PCR鉴定双胞胎姐妹为同卵双胞胎 | 第70-71页 |
| ·双胞胎病人MLL融合基因鉴定为MLL-NRIP3 | 第71-74页 |
| ·骨髓移植小鼠中,转染MLL-NRIP3可以诱导急性髓系白血病的发生 | 第74-75页 |
| ·基因组与转录组测序数据的分析及验证 | 第75-81页 |
| ·SETD2基因突变是病人重要的协同突变之一 | 第81-82页 |
| ·SETD2突变在急性白血病中具有重现性且与常见主要染色体异常相关 | 第82-83页 |
| ·SETD2突变和低表达是SETD2在急性白血病中失活的主要机制 | 第83-84页 |
| ·SETD2突变造成功能失活和H3K36me3的整体水平降低 | 第84-85页 |
| ·Setd2表达水平的降低对正常细胞的影响很小 | 第85-86页 |
| ·Setd2表达水平的降低可以增强Mll-Af9细胞的自我更新能力 | 第86-87页 |
| ·Setd2表达水平的降低可以增强白血病细胞的自我更新能力 | 第87-89页 |
| ·小鼠骨髓移植模型中,Setd2表达降低将会加速Mll-Af9白血病的发生 | 第89页 |
| ·小鼠骨髓移植模型中,Setd2表达降低将会加速MLL-NRIP #3白血病的发生 | 第89-90页 |
| ·Setd2表达水平降低提高了白血病起始细胞频率 | 第90-91页 |
| ·SETD2表达水平降低后激活mTOR通路促进白血病发生 | 第91-92页 |
| ·SETD2表达水平降低通过增强白血病干细胞的干性促进白血病维持和进展 | 第92-93页 |
| ·讨论 | 第93-99页 |
| ·MLL融合蛋白研究 | 第93-95页 |
| ·MLL协同突变研究 | 第95-99页 |
| 第四章 结论 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-113页 |
| 附录 | 第113-121页 |
| 作者简历及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第121-122页 |
