| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 縮略词英文对照表 | 第9-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-24页 |
| 1 脑心肌炎病毒(EMCV)概述 | 第14-19页 |
| ·EMCV的起源和引起的疾病 | 第14页 |
| ·EMCV的生物学特性 | 第14-15页 |
| ·病毒颗粒结构及功能 | 第15-17页 |
| ·基因组结构 | 第17-18页 |
| ·EMCV流行病学调查 | 第18-19页 |
| 2 IgM与疫病诊断 | 第19-22页 |
| ·人IgM的基因及表达 | 第19-20页 |
| ·IgM的结构及功能 | 第20-21页 |
| ·IgM与疾病的诊断 | 第21-22页 |
| 3 抗人IgM捕获ELISA概述 | 第22-24页 |
| ·抗人IgM捕获ELISA法的原理 | 第22页 |
| ·抗人IgM捕获ELISA方法的研究进展 | 第22-23页 |
| ·本研究的主要内容与技术路线图 | 第23-24页 |
| 第二部分 实验研究 | 第24-66页 |
| 第一章 酶标抗原制备(EMCV-HRP) | 第24-41页 |
| 1 材料 | 第24-26页 |
| ·主要材料 | 第24页 |
| ·仪器设备 | 第24-25页 |
| ·实验试剂 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-32页 |
| ·EMCV扩增 | 第26-29页 |
| ·EMCV纯化 | 第29-31页 |
| ·EMCV浓缩 | 第29-30页 |
| ·EMCV的密度梯度离心 | 第30页 |
| ·EMCV毒价测定 | 第30-31页 |
| ·EMCV灭活 | 第31页 |
| ·EMCV酶标记 | 第31-32页 |
| ·辣根过氧化物酶(HRP)预处理 | 第31页 |
| ·EMCV与HRP结合 | 第31页 |
| ·EMCV-HRP的检测与评价 | 第31-32页 |
| ·EMCV-HRP效价的测定 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-39页 |
| ·EMCV扩增结果 | 第32-34页 |
| ·病毒的纯化结果 | 第34-35页 |
| ·EMCV灭活结果 | 第35-37页 |
| ·EMCV-HRP的测定与评价结果 | 第37-38页 |
| ·EMCV-HRP效价的测定结果 | 第38-39页 |
| 4 小结与讨论 | 第39-41页 |
| 第二章 方法的初步建立及条件优化 | 第41-55页 |
| 1 材料 | 第41-42页 |
| ·主要材料 | 第41页 |
| ·仪器设备 | 第41页 |
| ·实验试剂 | 第41-42页 |
| 2 方法 | 第42-46页 |
| ·人EMCV IgM捕获ELISA方法的初步建立 | 第42-43页 |
| ·阴阳性参考品制备 | 第43-44页 |
| ·初筛抗体阴阳性血清 | 第43页 |
| ·定血清—稀释病毒法(病毒中和试验) | 第43-44页 |
| ·阴阳性参考品验证及保存 | 第44页 |
| ·条件优化 | 第44-46页 |
| ·最佳包被浓度的确定 | 第44页 |
| ·最佳EMCV-HRP浓度的确定 | 第44-45页 |
| ·最佳酶标抗原反应时间的确定 | 第45页 |
| ·最佳显色时间的确定 | 第45页 |
| ·最佳封闭液的选择 | 第45页 |
| ·样本最佳稀释度的确定 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-53页 |
| ·建立人EMCV IgM捕获ELISA法结果 | 第46-48页 |
| ·人EMCV IgM捕获ELISA法初步检测结果 | 第46-47页 |
| ·双抗原夹心ELISA法验检结果 | 第47-48页 |
| ·定血消—稀释病毒法(病毒中和试验)结果 | 第48-49页 |
| ·中和后EMCV病变结果 | 第48-49页 |
| ·TCID_(50)和中和指数计算结果 | 第49页 |
| ·阴阳性对照验证结果 | 第49-50页 |
| ·条件优化结果 | 第50-53页 |
| ·最佳包被浓度的确定 | 第50页 |
| ·最佳EMCV-HRP工作浓度的确定 | 第50-51页 |
| ·最佳EMCV-HRP反应时间的确定 | 第51页 |
| ·最佳显色时间的确定 | 第51-52页 |
| ·最佳封闭液的确定 | 第52-53页 |
| ·样本最适稀释度的确定 | 第53页 |
| 4 小结与讨论 | 第53-55页 |
| 第三章 质量评价及初步应用 | 第55-66页 |
| 1 材料 | 第55-56页 |
| ·主要材料 | 第55页 |
| ·仪器设备 | 第55页 |
| ·实验试剂 | 第55-56页 |
| 2 质量评价 | 第56-58页 |
| ·灵敏度验证 | 第56页 |
| ·重复性验证 | 第56页 |
| ·特异性验证 | 第56-57页 |
| ·种间特异性验证 | 第56-57页 |
| ·种内不同来源特异性验证 | 第57页 |
| ·稳定性验证 | 第57页 |
| ·长期稳定性验证 | 第57页 |
| ·热加速稳定性验证 | 第57页 |
| ·运输稳定性 | 第57页 |
| ·与间接ELISA法比较 | 第57-58页 |
| 3 应用 | 第58-59页 |
| ·样本处理 | 第58页 |
| ·人EMCV IgM捕获ELISA检测样本 | 第58页 |
| ·双抗原夹心法检测样本 | 第58-59页 |
| 4 结果 | 第59-64页 |
| ·人EMCV IgM捕获ELISA方法的验证结果 | 第59-62页 |
| ·灵敏度验证 | 第59页 |
| ·重复性验证 | 第59页 |
| ·特异性验证 | 第59-61页 |
| ·稳定性验证结果 | 第61-62页 |
| ·与间接ELSA比较结果 | 第62页 |
| ·样本检测结果 | 第62-64页 |
| ·人EMCV IgM捕获ELISA法和双抗原夹心ELISA法检测结果 | 第62页 |
| ·样本中IgM和总抗的分布 | 第62-63页 |
| ·抗体强度 | 第63-64页 |
| 5 小结与讨论 | 第64-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简介 | 第73页 |
| 硕士期间已发表论文 | 第73页 |
| 硕士期间参与的课题研究 | 第73页 |