摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩略词 | 第8-11页 |
1 前言 | 第11-20页 |
·斜带石斑鱼 | 第11-12页 |
·哈维氏弧菌研究进展 | 第12-14页 |
·哈维氏弧菌生物学特性 | 第12页 |
·哈维氏弧菌的致病性与致病机理 | 第12-14页 |
·哈维氏弧菌病的防治 | 第14页 |
·抗氧化系统与活性氧(ROS) | 第14-16页 |
·谷胱甘肽系统 | 第16-18页 |
·谷胱甘肽及其生理功能 | 第16页 |
·谷胱甘肽硫转移酶(GST) | 第16-17页 |
·谷胱甘肽过氧化物酶(GPx) | 第17-18页 |
·研究目的及意义 | 第18-20页 |
2 GST、GPX 基因的克隆、表达及条件优化 | 第20-42页 |
·材料 | 第20-24页 |
·菌株和质粒 | 第20-22页 |
·培养基和主要溶液 | 第22-23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
·主要试剂、试剂盒 | 第24页 |
·方法 | 第24-31页 |
·GST 基因克隆 | 第24-27页 |
·GPx 基因克隆 | 第27-28页 |
·GST 基因的原核表达 | 第28-31页 |
·GPx 基因的原核表达 | 第31页 |
·结果 | 第31-41页 |
·GST 基因 ORF 扩增 | 第31-33页 |
·GST 基因原核表达结果 | 第33-36页 |
·GPx 基因 ORF 扩增 | 第36-38页 |
·GPx 基因原核表达结果 | 第38-41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
3 GST、GPX 基因亚单位疫苗对斜带石斑鱼的免疫保护性研究 | 第42-46页 |
·材料 | 第42页 |
·菌株 | 第42页 |
·实验用鱼 | 第42页 |
·实验仪器及试剂 | 第42页 |
·方法 | 第42-43页 |
·抗原和攻毒菌株 | 第42页 |
·重组蛋白对斜带石斑鱼的毒性实验 | 第42页 |
·亚单位疫苗对斜带石斑鱼的免疫及攻毒 | 第42-43页 |
·ELISA 检测抗体效价 | 第43页 |
·结果 | 第43-44页 |
·重组蛋白对斜带石斑鱼的毒性实验 | 第43页 |
·抗体效价 | 第43页 |
·免疫保护率 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
4 GST、GPX 核酸疫苗对斜带石斑鱼的免疫保护性研究 | 第46-57页 |
·实验材料 | 第46页 |
·菌株 | 第46页 |
·实验用鱼 | 第46页 |
·实验仪器及试剂 | 第46页 |
·实验方法 | 第46-50页 |
·核酸疫苗的制备 | 第46-47页 |
·攻毒菌株 | 第47页 |
·重组质粒对斜带石斑鱼的毒性实验 | 第47页 |
·核酸疫苗对斜带石斑鱼的免疫及攻毒 | 第47页 |
·DNA 水平检测真核质粒转染 | 第47-48页 |
·mRNA 水平检测真核质粒转染 | 第48-50页 |
·ELISA 检测抗体效价 | 第50页 |
·Western-blot 检测基因在斜带石斑鱼体内表达 | 第50页 |
·实验结果 | 第50-54页 |
·GST 基因真核表达质粒的构建及鉴定 | 第50页 |
·GPx 基因真核表达质粒的构建和鉴定 | 第50-51页 |
·重组真核质粒对斜带石斑鱼的毒性实验 | 第51页 |
·抗体效价检测 | 第51页 |
·免疫保护率 | 第51-52页 |
·DNA 水平检测真核质粒转染 | 第52-53页 |
·mRNA 水平检测真核质粒转染 | 第53页 |
·Western-blot 检测 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-57页 |
5 总结 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简介 | 第67-68页 |
导师简介 | 第68页 |