| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-29页 |
| 1. 鱼类基因转移的主要方法 | 第16-20页 |
| ·显微注射法 | 第16-18页 |
| ·基因枪法 | 第18-19页 |
| ·精子携带法 | 第19页 |
| ·逆转录病毒感染法 | 第19-20页 |
| ·其它方法 | 第20页 |
| 2. 转基因鱼的检测方法 | 第20-22页 |
| ·外源基因的整合检测 | 第21页 |
| ·外源基因的转录检测 | 第21-22页 |
| ·外源基因的表达产物检测 | 第22页 |
| 3. 转基因鱼的研究现状和应用前景 | 第22-25页 |
| ·转基因经济鱼类研究现状 | 第23页 |
| ·转基因观赏鱼类研究现状 | 第23-24页 |
| ·转基因小型实验动物鱼类研究现状 | 第24页 |
| ·转基因鱼的应用前景 | 第24-25页 |
| 4. 转基因鱼研究存在的问题 | 第25-29页 |
| ·外源基因的整合、表达和遗传问题 | 第25-26页 |
| ·转基因鱼的安全性问题 | 第26-29页 |
| 第二章 外源基因表达载体的构建 | 第29-39页 |
| 1. 前言 | 第29页 |
| 2. 实验材料与实验方法 | 第29-36页 |
| ·实验材料 | 第29-31页 |
| ·实验动物 | 第29-30页 |
| ·实验试剂 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-36页 |
| ·dmrt1 过表达载体的构建 | 第31-34页 |
| ·青鱂 olcsw1 基因敲除载体构建 | 第34-36页 |
| 3. 实验结果与分析 | 第36-38页 |
| ·过表达载体构建 | 第36-37页 |
| ·青鱂 olcsw1 基因表达情况 | 第37-38页 |
| 4. 讨论 | 第38-39页 |
| 第三章 异源和同源 dmrt1 过表达载体在青鱂体内的整合和表达 | 第39-47页 |
| 1 前言 | 第39页 |
| 2 实验材料和实验方法 | 第39-41页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-41页 |
| ·显微注射仪器安装 | 第40页 |
| ·亲鱼培育及受精卵收集 | 第40页 |
| ·显微注射 | 第40页 |
| ·基因整合及表达检测 | 第40-41页 |
| 3 实验结果与分析 | 第41-45页 |
| ·注射后青鱂胚胎及仔鱼的 GFP 表达情况 | 第41-42页 |
| ·异源性及同源性 dmrt1 过表达载体对青鳉孵化率的影响 | 第42-43页 |
| ·异源性及同源性 dmrt1 过表达载体整合及表达情况比较 | 第43页 |
| ·过表达 dmrt1 基因对芳香化酶基因的影响 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 青鱂 olcsw1 基因的敲除分析 | 第47-54页 |
| 1. 前言 | 第47页 |
| 2. 实验材料和实验方法 | 第47-50页 |
| ·准备工作 | 第47-48页 |
| ·基因敲除分析 | 第48-50页 |
| ·DNA 提取 | 第48页 |
| ·引物设计及 PCR 扩增 | 第48页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第48-49页 |
| ·变性 | 第49页 |
| ·酶切 | 第49页 |
| ·电泳 | 第49页 |
| ·连接转化 | 第49-50页 |
| 3 实验结果与分析 | 第50-52页 |
| ·凝胶电泳分析 | 第50页 |
| ·测序结果分析 | 第50-51页 |
| ·Talen 载体对性别分化相关基因的影响 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 硕士期间学术成果 | 第62页 |
