摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第1章 文献综述 | 第11-28页 |
·活性氧和氧化应激 | 第11-13页 |
·活性氧和家蝇免疫机制 | 第13-15页 |
·生物体清除活性氧 | 第15-16页 |
·抗逆基因 | 第16-25页 |
·热休克蛋白 | 第16-19页 |
·金属硫蛋白 | 第19-21页 |
·超氧化物歧化酶 | 第21-23页 |
·硫氢酸生成酶蛋白 | 第23-25页 |
·本研究背景、目的和意义 | 第25-28页 |
第2章 实验材料与方法 | 第28-35页 |
·实验材料 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-35页 |
·转录组RNA纯化和反转录 | 第28页 |
·454测序数据分析 | 第28页 |
·家蝇幼虫热休克处理 | 第28-29页 |
·家蝇幼虫重金属刺激 | 第29页 |
·家蝇幼虫菌刺激感染 | 第29页 |
·总RNA提取和反转录 | 第29页 |
·家蝇抗逆基因的克隆 | 第29-30页 |
·抗逆基因序列分析 | 第30页 |
·qPCR检测家蝇抗逆基因的表达模式 | 第30页 |
·构建双链RNA干扰载体及干扰敲低实验 | 第30-31页 |
·数据统计与分析 | 第31页 |
·构建原核表达载体、蛋白纯化及活性检测 | 第31-32页 |
·构建荧光载体和Bac-to-Bac杆状病毒表达载体 | 第32页 |
·细胞培养,瞬时转染及荧光观察 | 第32-33页 |
·Bac-to-Bac杆状病毒表达系统的Western检测 | 第33-35页 |
第3章 结果与讨论 | 第35-87页 |
·家蝇转录组测定及分析 | 第35-50页 |
·454测序及拼接 | 第35-38页 |
·unique sequence的注释 | 第38-39页 |
·GO分析 | 第39-41页 |
·基于KEGG分析的功能分类 | 第41-42页 |
·家蝇转录组抗逆基因系统发育树分析 | 第42-50页 |
·家蝇MdHSP70-1基因的序列与表达分析 | 第50-56页 |
·家蝇MdHSP70-1基因cDNA序列分析 | 第50-53页 |
·家蝇MdHSP70-1基因定量表达分析 | 第53-56页 |
·家蝇MdMT1,MdMT2基因的序列与表达分析 | 第56-64页 |
·家蝇MdMT1,MdMT2基因cDNA序列分析 | 第56-59页 |
·家蝇MdMT1,MdMT2基因定量表达分析 | 第59-64页 |
·家蝇MdSOD1,MdSOD2,MdSOD3基因的序列与表达分析 | 第64-75页 |
·家蝇MdSOD1,MdSOD2,MdSOD3基因cDNA序列分析 | 第64-68页 |
·家蝇MdSOD1,MdSOD2和MdSOD3基因定量表达分析 | 第68-72页 |
·MdSODl,MdSOD2和rMdSOD3原核表达和酶活鉴定 | 第72-75页 |
·家蝇MdRhodlike1基因的序列与表达分析 | 第75-80页 |
·家蝇MdRhodlike1基因cDNA序列分析 | 第75-77页 |
·家蝇MdRhodlike1基因定量表达分析 | 第77-80页 |
·dsRNA干扰家蝇抗逆基因的存活率影响 | 第80-83页 |
·家蝇2种抗逆基因在昆虫SF9细胞中的表达 | 第83-85页 |
·Bac-to-Bac杆状病毒表达系统的Western检测 | 第85-87页 |
第4章 创新点与结论 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
攻读博士学位期间已发表文章 | 第101页 |