附表 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-13页 |
英文縮略表 | 第13-15页 |
第一章 引言 | 第15-21页 |
·PRV病原学 | 第15-17页 |
·概述 | 第15页 |
·病毒结构 | 第15-16页 |
·主要基因及编码的蛋白 | 第16-17页 |
·流行病学 | 第17-19页 |
·流行特点 | 第17-18页 |
·临床症状 | 第18页 |
·病理变化 | 第18页 |
·诊断方法 | 第18-19页 |
·疫苗及研究进展 | 第19页 |
·纳米PCR技术 | 第19页 |
·研究的目的和意义 | 第19-21页 |
第二章 鉴别PRV强弱毒的新型纳米PCR的建立 | 第21-32页 |
·材料 | 第21-22页 |
·毒株、细胞和主要试剂 | 第21页 |
·检测病料背景及来源 | 第21页 |
·主要仪器 | 第21-22页 |
·方法 | 第22-26页 |
·引物设计 | 第22页 |
·病毒DNA的提取 | 第22页 |
·病毒RNA的提取及反转录为cDNA | 第22-23页 |
·gB阳性模板质粒的构建 | 第23-25页 |
·gB、gE、gG三重纳米PCR检测方法的建立 | 第25页 |
·扩增条件和体系的优化 | 第25页 |
·灵敏性试验 | 第25页 |
·特异性试验 | 第25-26页 |
·重复性试验 | 第26页 |
·临床样品的检测 | 第26页 |
·序列测定与分析 | 第26页 |
·结果 | 第26-30页 |
·目的片段的扩增 | 第26-27页 |
·扩增条件和体系优化结果 | 第27-28页 |
·灵敏性试验结果 | 第28-29页 |
·特异性试验结果 | 第29页 |
·重复性试验结果 | 第29页 |
·临床样品检测结果 | 第29-30页 |
·序列测定结果 | 第30页 |
·讨论 | 第30-32页 |
第三章 鉴别PRV强弱毒荧光定量PCR的建立 | 第32-40页 |
·材料 | 第32页 |
·毒株、细胞和主要试剂 | 第32页 |
·仪器设备 | 第32页 |
·检测病料背景及来源 | 第32页 |
·方法 | 第32-34页 |
·引物设计 | 第32-33页 |
·PRV及病料组织基因组的提取 | 第33页 |
·标准阳性质粒的制备 | 第33页 |
·gB、gE荧光定量PCR的建立 | 第33页 |
·特异性分析 | 第33-34页 |
·灵敏性分析 | 第34页 |
·重复性分析 | 第34页 |
·样品检测 | 第34页 |
·结果 | 第34-38页 |
·引物验证 | 第34页 |
·标准曲线的绘制 | 第34-36页 |
·特异性分析结果 | 第36页 |
·灵敏性分析结果 | 第36-37页 |
·重复性分析结果 | 第37页 |
·样品检测结果 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
第四章 PRV-JL株的分离鉴定 | 第40-47页 |
·材料 | 第40页 |
·毒株、细胞和主要试剂 | 第40页 |
·主要仪器 | 第40页 |
·病料背景及来源 | 第40页 |
·方法 | 第40-42页 |
·发病猪的病理剖检 | 第40-41页 |
·病毒的分离培养 | 第41页 |
·病毒学观察 | 第41页 |
·分子病毒学鉴定 | 第41-42页 |
·结果 | 第42-45页 |
·病理剖检结果 | 第42页 |
·病毒分离结果 | 第42页 |
·病毒毒价测定结果 | 第42-43页 |
·病毒形态学观察结果 | 第43-44页 |
·PCR鉴定及序列分析结果 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
·PRV当前流行状况 | 第45-46页 |
·PRV-JL分离株的意义 | 第46-47页 |
第五章 PRV纳米和荧光定量PCR在感染小鼠上检测的应用 | 第47-56页 |
·材料 | 第47页 |
·病毒、细胞和主要试剂 | 第47页 |
·主要仪器 | 第47页 |
·实验动物 | 第47页 |
·方法 | 第47-48页 |
·半数致死量的测定 | 第47-48页 |
·小鼠攻毒 | 第48页 |
·组织剖检及主要脏器的病理学观察 | 第48页 |
·纳米PCR方法检测各器官PRV | 第48页 |
·荧光定量PCR检测各器官病毒载量 | 第48页 |
·结果 | 第48-54页 |
·半数致死量的测定结果 | 第48-49页 |
·各脏器病理学观察结果 | 第49-50页 |
·纳米PCR检测结果 | 第50-51页 |
·荧光定量PCR检测结果 | 第51-54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
第六章 全文结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简介 | 第64页 |