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鉴别猪伪狂犬病毒gE/gB/gG的纳米PCR及荧光定量PCR方法的建立及评价

附表第1-7页
摘要第7-8页
Abstract第8-13页
英文縮略表第13-15页
第一章 引言第15-21页
   ·PRV病原学第15-17页
     ·概述第15页
     ·病毒结构第15-16页
     ·主要基因及编码的蛋白第16-17页
   ·流行病学第17-19页
     ·流行特点第17-18页
     ·临床症状第18页
     ·病理变化第18页
     ·诊断方法第18-19页
   ·疫苗及研究进展第19页
   ·纳米PCR技术第19页
   ·研究的目的和意义第19-21页
第二章 鉴别PRV强弱毒的新型纳米PCR的建立第21-32页
   ·材料第21-22页
     ·毒株、细胞和主要试剂第21页
     ·检测病料背景及来源第21页
     ·主要仪器第21-22页
   ·方法第22-26页
     ·引物设计第22页
     ·病毒DNA的提取第22页
     ·病毒RNA的提取及反转录为cDNA第22-23页
     ·gB阳性模板质粒的构建第23-25页
     ·gB、gE、gG三重纳米PCR检测方法的建立第25页
     ·扩增条件和体系的优化第25页
     ·灵敏性试验第25页
     ·特异性试验第25-26页
     ·重复性试验第26页
     ·临床样品的检测第26页
     ·序列测定与分析第26页
   ·结果第26-30页
     ·目的片段的扩增第26-27页
     ·扩增条件和体系优化结果第27-28页
     ·灵敏性试验结果第28-29页
     ·特异性试验结果第29页
     ·重复性试验结果第29页
     ·临床样品检测结果第29-30页
     ·序列测定结果第30页
   ·讨论第30-32页
第三章 鉴别PRV强弱毒荧光定量PCR的建立第32-40页
   ·材料第32页
     ·毒株、细胞和主要试剂第32页
     ·仪器设备第32页
     ·检测病料背景及来源第32页
   ·方法第32-34页
     ·引物设计第32-33页
     ·PRV及病料组织基因组的提取第33页
     ·标准阳性质粒的制备第33页
     ·gB、gE荧光定量PCR的建立第33页
     ·特异性分析第33-34页
     ·灵敏性分析第34页
     ·重复性分析第34页
     ·样品检测第34页
   ·结果第34-38页
     ·引物验证第34页
     ·标准曲线的绘制第34-36页
     ·特异性分析结果第36页
     ·灵敏性分析结果第36-37页
     ·重复性分析结果第37页
     ·样品检测结果第37-38页
   ·讨论第38-40页
第四章 PRV-JL株的分离鉴定第40-47页
   ·材料第40页
     ·毒株、细胞和主要试剂第40页
     ·主要仪器第40页
     ·病料背景及来源第40页
   ·方法第40-42页
     ·发病猪的病理剖检第40-41页
     ·病毒的分离培养第41页
     ·病毒学观察第41页
     ·分子病毒学鉴定第41-42页
   ·结果第42-45页
     ·病理剖检结果第42页
     ·病毒分离结果第42页
     ·病毒毒价测定结果第42-43页
     ·病毒形态学观察结果第43-44页
     ·PCR鉴定及序列分析结果第44-45页
   ·讨论第45-47页
     ·PRV当前流行状况第45-46页
     ·PRV-JL分离株的意义第46-47页
第五章 PRV纳米和荧光定量PCR在感染小鼠上检测的应用第47-56页
   ·材料第47页
     ·病毒、细胞和主要试剂第47页
     ·主要仪器第47页
     ·实验动物第47页
   ·方法第47-48页
     ·半数致死量的测定第47-48页
     ·小鼠攻毒第48页
     ·组织剖检及主要脏器的病理学观察第48页
     ·纳米PCR方法检测各器官PRV第48页
     ·荧光定量PCR检测各器官病毒载量第48页
   ·结果第48-54页
     ·半数致死量的测定结果第48-49页
     ·各脏器病理学观察结果第49-50页
     ·纳米PCR检测结果第50-51页
     ·荧光定量PCR检测结果第51-54页
   ·讨论第54-56页
第六章 全文结论第56-57页
参考文献第57-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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