摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-23页 |
·T细胞及TCR研究概况 | 第13-14页 |
·猪αβTCR的研究进展 | 第14-21页 |
·猪TCRα链的研究进展 | 第14-16页 |
·猪TCRβ链的研究 | 第16-21页 |
·基因谱型分析技术及其在本研究中的意义 | 第21-23页 |
第二章 临床健康猪TCRα、β链CDR3的多样性 | 第23-34页 |
·材料 | 第23-24页 |
·实验动物 | 第23页 |
·酶和试剂 | 第23页 |
·仪器和设备 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-26页 |
·引物的设计与合成 | 第24-25页 |
·猪外周血淋巴细胞的分离 | 第25页 |
·总RNA提取及反转录 | 第25-26页 |
·RT-PCR扩增TCR Vα、Vβ链家族 | 第26页 |
·猪TCRβ链CDR3基因扫描分析 | 第26页 |
·结果与分析 | 第26-32页 |
·猪PBMC中TRAV、TRBV家族RT-PCR扩增结果 | 第26-27页 |
·TCR Vα、Vβ链CDR3基因扫描图谱分析 | 第27-29页 |
·TCR Vα、Vβ链各家族CDR3序列长度基因扫描分析结果 | 第29-32页 |
·TCR Vα、Vβ链各家族CDR3成员间出现频次分析 | 第32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
第三章 猪瘟病毒C株感染后猪αβTCR的变化规律 | 第34-45页 |
·材料 | 第34-35页 |
·毒株和细胞系 | 第34页 |
·实验动物 | 第34页 |
·酶和试剂 | 第34-35页 |
·主要仪器和设备 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-36页 |
·猪瘟病毒C株的增殖培养 | 第35页 |
·引物设计与合成 | 第35页 |
·感染实验动物 | 第35页 |
·采血 | 第35页 |
·猪瘟抗体检测 | 第35页 |
·淋巴细胞的分离 | 第35-36页 |
·总RNA的提取 | 第36页 |
·RT-PCR扩增TRAV和TRBV家族 | 第36页 |
·猪TCRα链、TCRβ链CDR3基因扫描分析 | 第36页 |
·实验结果 | 第36-43页 |
·猪外周血猪瘟抗体检测结果 | 第36-37页 |
·猪PBMC中TRAV和TRBV家族RT-PCR扩增结果 | 第37页 |
·感染前后TRAV和TRBV家族的基因扫描分析 | 第37-43页 |
·感染前后基因谱型变化 | 第37-38页 |
·感染前后谱型发生明显变化的家族 | 第38-40页 |
·感染前后基因谱型荧光强度变化 | 第40-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
第四章 克隆化猪αβTCR家族基因的克隆与结构分析 | 第45-52页 |
·实验材料 | 第45页 |
·菌种和载体 | 第45页 |
·酶和试剂 | 第45页 |
·培养基 | 第45页 |
·仪器与设备 | 第45页 |
·实验方法 | 第45-47页 |
·引物设计与合成 | 第45-46页 |
·PCR扩增所用模板 | 第46页 |
·目的基因的克隆 | 第46页 |
·克隆载体的构建与鉴定 | 第46页 |
·序列的生物信息学分析 | 第46-47页 |
·结果与分析 | 第47-50页 |
·RT-PCR扩增产物鉴定 | 第47页 |
·克隆化TCR基因CDR3区及全长基因核苷酸序列分析 | 第47-49页 |
·克隆化基因CDR3区及其全长基因分子结构分析 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-52页 |
第五章 全文结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简历 | 第59页 |