| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| ·苏云金芽孢杆菌及其杀虫晶体蛋白基因的分类 | 第9-10页 |
| ·Bt杀虫晶体蛋白的结构与功能 | 第10-11页 |
| ·Bt杀虫晶体蛋白的分子结构及特征 | 第10-11页 |
| ·CryIIIA的三级结构与功能 | 第11页 |
| ·Bt杀虫晶体蛋白的杀虫机理 | 第11-12页 |
| ·Bt抗虫基因工程 | 第12-14页 |
| ·Bt转基因植物概况 | 第12-13页 |
| ·Bt杀虫基因的人工修饰与改造 | 第13-14页 |
| ·影响Bt基因在转基因植物中表达的因素 | 第14-15页 |
| ·转基因植物中Bt基因的沉默 | 第14页 |
| ·Bt基因在受体细胞染色体上的插入位点 | 第14页 |
| ·表达单元及辅助因子 | 第14-15页 |
| ·植物发育及外部环境 | 第15页 |
| ·昆虫对Bt毒蛋白的抗性机制 | 第15-16页 |
| ·解决害虫对转Bt基因作物产生抗性的策略 | 第16-18页 |
| ·Bt毒蛋白基因组织特异性或时间特异性表达策略 | 第16页 |
| ·高剂量毒素与庇护所相结合策略 | 第16-17页 |
| ·基因堆积(genestacking)策略 | 第17页 |
| ·联合使用Bt基因和其它类型的抗虫基因策略 | 第17-18页 |
| ·基因表达策略 | 第18页 |
| ·我国马铃薯Bt抗虫基因工程研究进展 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 CryⅢA基因植物表达载体的构建 | 第21-33页 |
| ·前言 | 第21页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·菌株和载体 | 第21-22页 |
| ·酶及生化试剂 | 第22页 |
| ·常用溶液及培养基的配置 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| ·仪器与设备 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-29页 |
| ·碱裂解法抽提质粒DNA | 第23-24页 |
| ·目的片段的PCR | 第24页 |
| ·植物表达载体pBI121线性化处理 | 第24-25页 |
| ·建立In-Fusion连接体系 | 第25-26页 |
| ·目的片段和线性化载体的回收 | 第26-27页 |
| ·感受态细胞的制备及转化 | 第27页 |
| ·重组载体的鉴定 | 第27-28页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的冻融法转化 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-32页 |
| ·组成型表达启动子CaMV35S驱动的CryⅢA基因表达载体构建 | 第29-30页 |
| ·马铃薯茎叶特异表达启动子ST-LS1驱动的CryⅢA基因表达载体构建 | 第30-31页 |
| ·农杆菌的转化及鉴定 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 农杆菌介导的CryⅢA基因转化马铃薯的研究 | 第33-44页 |
| ·前言 | 第33页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·菌株和质粒 | 第33页 |
| ·生化试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器和设备 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-38页 |
| ·农杆菌介导的马铃薯试管薯遗传转化与植株再生 | 第34-35页 |
| ·转基因植株PCR检测 | 第35页 |
| ·转基因植株的实时荧光定量（qRT-PCR）检测与分析 | 第35-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-42页 |
| ·马铃薯试管薯的诱导 | 第38页 |
| ·马铃薯遗传转化与生根选择压的确定 | 第38-39页 |
| ·转基因马铃薯植株的再生 | 第39-40页 |
| ·转基因植株PCR检测 | 第40页 |
| ·转基因植株qRT-PCR检测 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者介绍 | 第52-53页 |
| 导师简介 | 第53-54页 |
