| 符号说明 | 第1-12页 |
| 中文摘要 | 第12-14页 |
| 英文摘要 | 第14-17页 |
| 1 前言 | 第17-40页 |
| ·植物MAPK级联途径的组成 | 第17-19页 |
| ·MAPKKKs | 第17-18页 |
| ·MAPKKs | 第18-19页 |
| ·MAPKs | 第19页 |
| ·MAPK级联途径在植物生长发育过程中的作用 | 第19-34页 |
| ·MAPK级联途径调控植物的免疫响应 | 第19-23页 |
| ·MAPK级联途径参与PTI | 第20-22页 |
| ·MAPK级联途径参与ETI | 第22-23页 |
| ·MAPK级联途径调控植物非生物胁迫 | 第23-25页 |
| ·MAPK级联途径调控盐胁迫响应 | 第23-24页 |
| ·MAPK级联途径调控干旱胁迫响应 | 第24页 |
| ·MAPK级联途径调控温度胁迫响应 | 第24-25页 |
| ·MAPK级联途径参与损伤信号转导 | 第25页 |
| ·MAPK级联途径与植物激素信号转导 | 第25-30页 |
| ·MAPK级联途径参与乙烯信号转导及生物合成 | 第25-26页 |
| ·MAPK级联途径参与SA和JA信号转导 | 第26-27页 |
| ·MAPK级联途径参与ABA信号转导 | 第27-29页 |
| ·MAPK级联途径参与生长素信号转导 | 第29-30页 |
| ·MAPK级联途径调控植物生长发育 | 第30-34页 |
| ·MAPK级联途径调控植物气孔发育与运动 | 第30-31页 |
| ·MAPK级联途径调控胞质分裂 | 第31-33页 |
| ·MAPK级联途径调控植物衰老过程 | 第33-34页 |
| ·MAPK级联途径的负调控因子：MAPK磷酸酶 | 第34-38页 |
| ·植物中双重特异的MAPK磷酸酶 | 第34-37页 |
| ·其他负调MAPK的蛋白磷酸酶 | 第37-38页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第38-40页 |
| 2 材料和方法 | 第40-72页 |
| ·实验材料 | 第40-43页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·植物材料培养与处理 | 第40页 |
| ·菌株与质粒 | 第40页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第40-41页 |
| ·PCR引物 | 第41-43页 |
| ·实验方法 | 第43-72页 |
| ·植物材料总RNA的提取 | 第43-44页 |
| ·反转录cDNA第一链的合成 | 第44页 |
| ·PCR扩增 | 第44-45页 |
| ·DNA纯化回收 | 第45-46页 |
| ·连接反应 | 第46页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第46页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第46-47页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第47-48页 |
| ·DNA序列测定 | 第48页 |
| ·Northern blot杂交分析 | 第48-51页 |
| ·总RNA的提取 | 第48页 |
| ·RNA甲醛变性胶电泳 | 第48-49页 |
| ·转膜 | 第49-50页 |
| ·预杂交 | 第50页 |
| ·探针的制备 | 第50-51页 |
| ·杂交 | 第51页 |
| ·洗膜 | 第51页 |
| ·放射自显影 | 第51页 |
| ·ZmMPK17 的原核表达及抗体制备 | 第51-55页 |
| ·ZmMPK17 原核表达载体的构建 | 第51页 |
| ·ZmMPK17 蛋白的诱导 | 第51-52页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第52-53页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第53-54页 |
| ·原核表达ZmMPK17 重组蛋白抗体的制备及效价的测定 | 第54-55页 |
| ·原核表达ZmMPK17 重组蛋白抗体的制备 | 第54-55页 |
| ·酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清抗体效价 | 第55页 |
| ·Western blot检测蛋白表达 | 第55-57页 |
| ·植物总蛋白提取 | 第55-56页 |
| ·SDS-PAGE | 第56页 |
| ·半干法转膜 | 第56-57页 |
| ·免疫检测 | 第57页 |
| ·根癌农杆菌介导的转化烟草 | 第57-60页 |
| ·表达载体的构建 | 第57-59页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第59-60页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第60页 |
| ·农杆菌介导烟草转化 | 第60页 |
| ·转基因烟草的鉴定 | 第60-62页 |
| ·基因组的提取 | 第60-61页 |
| ·转基因烟草基因组PCR鉴定 | 第61-62页 |
| ·转基因烟草Northern blot杂交分析 | 第62页 |
| ·转基因烟草Western blot检测 | 第62页 |
| ·转基因烟草生理指标的测定 | 第62-64页 |
| ·抗氧化酶活的测定 | 第62-63页 |
| ·过氧化氢含量的测定 | 第63页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第63页 |
| ·细胞膜透性的测定（电导法） | 第63页 |
| ·游离脯氨酸的测定 | 第63页 |
| ·可溶性糖含量测定（蒽酮法） | 第63-64页 |
| ·DAB和NBT染色 | 第64页 |
| ·ZmMPK17 基因启动子的功能分析 | 第64-65页 |
| ·ZmMPK17 基因启动子的分离 | 第64页 |
| ·ZmMPK17 基因启动子顺式作用元件预测 | 第64页 |
| ·ZmMPK17 基因启子表达载体的构建 | 第64页 |
| ·GUS活性染色分析 | 第64-65页 |
| ·亚细胞定位分析 | 第65-66页 |
| ·pBI121-ZmMPK17-GFP载体的构建 | 第65页 |
| ·重组蛋白亚细胞定位 | 第65-66页 |
| ·酵母双杂交实验筛选与ZmMPK17 互作的蛋白 | 第66-72页 |
| ·BD和AD载体的构建 | 第66页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第66页 |
| ·转化酵母感受态细胞 | 第66-67页 |
| ·诱饵蛋白的自激活及毒性验证 | 第67页 |
| ·酵母双杂交验证可能互作的蛋白对 | 第67-68页 |
| ·从文库中筛选ZmMPK17 互作的蛋白对 | 第68-72页 |
| ·合成单链cDNA | 第68-69页 |
| ·利用长距离PCR（LD-PCR）方法合成双链cDNA | 第69页 |
| ·用CHROMA SPIN~(TM)+TE-400 柱子纯化双链cDNA | 第69-70页 |
| ·建立酵母双杂cDNA文库 | 第70页 |
| ·从文库中筛选与诱饵蛋白互作的蛋白 | 第70-72页 |
| 3 结果与分析 | 第72-95页 |
| ·玉米促分裂原活化蛋白激酶ZmMPK17 基因的分离 | 第72页 |
| ·ZmMPK17 基因序列分析 | 第72-74页 |
| ·利用overlab实验方法将ZmMPK17 定点突变成ZmMPK17-AF | 第74-75页 |
| ·原核表达ZmMPK17 及抗体制备 | 第75-76页 |
| ·ZmMPK17 的亚细胞定位 | 第76-77页 |
| ·ZmMPK17 基因在玉米中的表达分析 | 第77-81页 |
| ·ZmMPK17 对不同胁迫及信号分子的响应模式 | 第77-78页 |
| ·H_2O_2和Ca~(2+)介导渗透胁迫和低温诱导的ZmMPK17 的表达 | 第78-79页 |
| ·qRT-PCR分析ZmMPK17 在盐和高温胁迫下表达模式 | 第79-80页 |
| ·Western blot检测在不同处理下ZmMPK17 蛋白水平的变化 | 第80-81页 |
| ·ZmMPK17 基因启动子的克隆与功能分析 | 第81-83页 |
| ·ZmMPK17 基因启动子的克隆与分析 | 第81-82页 |
| ·ZmMPK17 基因启动子的功能验证 | 第82-83页 |
| ·过表达ZmMPK17 和ZmMPK17-AF转基因烟草的鉴定 | 第83-84页 |
| ·过表达ZmMPK17 通过提高抗氧化防御系统增强了转基因烟草的渗透胁迫耐性 | 第84-87页 |
| ·过表达ZmMPK17 和ZmMPK17-AF增强了转基因烟草的低温抗性 | 第87-89页 |
| ·过表达ZmMPK17 增强了转基因烟草对病原菌的抗性 | 第89-90页 |
| ·利用酵母双杂交筛选ZmMPK17 互作蛋白 | 第90-95页 |
| ·ZmMPK17 互作蛋白分析 | 第90-92页 |
| ·基因克隆与AD和BD载体的构建 | 第92-93页 |
| ·酵母双杂交验证蛋白互作 | 第93-95页 |
| 4 讨论 | 第95-100页 |
| 5 结论 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第124页 |
