| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 绪论 | 第14-15页 |
| 第一部分 核糖糖基化导致细胞损伤的机制研究 | 第15-67页 |
| 第一章 研究背景 | 第15-28页 |
| ·非酶促糖基化反应 | 第15-24页 |
| ·概述 | 第15页 |
| ·晚期糖基化终末产物 | 第15-18页 |
| ·AGEs与相关疾病 | 第18-23页 |
| ·晚期糖基化终末产物的抑制或清除 | 第23-24页 |
| ·核糖与非酶促糖基化反应 | 第24-26页 |
| ·核糖概述 | 第24-25页 |
| ·核糖的糖基化能力 | 第25页 |
| ·核糖糖基化诱导蛋白质聚集 | 第25页 |
| ·核糖糖基化产物的细胞毒性作用 | 第25-26页 |
| ·结论与问题提出 | 第26-28页 |
| 第二章 实验方法 | 第28-36页 |
| ·实验材料及仪器 | 第28-29页 |
| ·主要试剂和材料 | 第28页 |
| ·仪器 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-36页 |
| ·细胞培养 | 第29-32页 |
| ·蛋白免疫印迹实验 | 第32-33页 |
| ·免疫沉淀反应 | 第33页 |
| ·考马思亮蓝染色胶内酶解和质谱分析 | 第33-34页 |
| ·免疫细胞化学实验 | 第34页 |
| ·GRP78的基因沉默和功能抑制 | 第34-35页 |
| ·数据分析 | 第35-36页 |
| 第三章 实验结果 | 第36-49页 |
| ·核糖引起多种细胞活力下降 | 第36-38页 |
| ·核糖处理的SH-SY5Y、HEK293T、U251和U87MG细胞的活力降低 | 第36-37页 |
| ·较高浓度核糖处理的CHO细胞的活力显著下降 | 第37-38页 |
| ·核糖引起CHO细胞内晚期糖基化终末产物水平增高 | 第38-40页 |
| ·核糖浓度与CHO细胞内晚期糖基化终末产物水平增高的关系 | 第38页 |
| ·核糖作用时间与CHO细胞内晚期糖基化终末产物水平增高的关系 | 第38-39页 |
| ·CHO细胞内晚期糖基化终末产物的分布 | 第39-40页 |
| ·CHO细胞内糖基化修饰的蛋白质鉴定 | 第40-44页 |
| ·免疫沉淀核糖处理的CHO细胞裂解液得到糖基化修饰的细胞蛋白 | 第40-41页 |
| ·质谱鉴定CHO细胞糖基化修饰的主要蛋白 | 第41-42页 |
| ·GRP78和GRP75均为糖基化修饰的细胞蛋白 | 第42-43页 |
| ·晚期糖基化终末产物与GRP78在细胞中的分布 | 第43-44页 |
| ·GRP78表达和功能与细胞毒性之间的关系 | 第44-49页 |
| ·细胞内GRP78蛋白表达水平与核糖作用时间的关系 | 第44-45页 |
| ·细胞内GRP78蛋白表达水平与核糖作用浓度的关系 | 第45-46页 |
| ·GRP78基因沉默后核糖处理细胞的晚期糖基化终末产物水平的变化 | 第46-47页 |
| ·GRP78功能抑制后核糖处理细胞内晚期糖基化终末产物水平的变化 | 第47-49页 |
| 第四章 讨论和总结 | 第49-57页 |
| ·核糖能快速提高细胞内晚期糖基化终末产物的水平 | 第49-52页 |
| ·核糖比葡萄糖具有更活跃的糖基化能力 | 第49页 |
| ·核糖诱导细胞产生晚期糖基化终末产物的细胞模型的建立 | 第49-52页 |
| ·核糖有倾向性地诱导细胞内某些蛋白质发生糖基化 | 第52-55页 |
| ·GRP78是被核糖糖基化修饰的一种主要蛋白 | 第52-53页 |
| ·GRP75是被核糖糖基化修饰的另一种蛋白 | 第53页 |
| ·核糖糖基化蛋白与葡萄糖糖基化蛋白的比较 | 第53-55页 |
| ·核糖诱发细胞产生毒性损伤与GRP78蛋白的关系 | 第55-57页 |
| ·细胞内晚期糖基化终末产物的生成与GRP78表达水平的波动 | 第55页 |
| ·GRP78在细胞对抗核糖应激中的作用 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-67页 |
| 第二部分 核糖糖基化导致认知功能障碍的机制研究 | 第67-110页 |
| 第一章 研究背景 | 第67-73页 |
| ·核糖诱导生成的晚期糖基化终末产物的作用机制 | 第67-71页 |
| ·概述 | 第67页 |
| ·RAGE的结构和功能 | 第67-71页 |
| ·结论与问题提出 | 第71-73页 |
| 第二章 实验方法 | 第73-78页 |
| ·实验材料及仪器 | 第73-74页 |
| ·主要试剂和材料 | 第73页 |
| ·仪器 | 第73-74页 |
| ·实验方法 | 第74-78页 |
| ·细胞实验方法 | 第74页 |
| ·动物实验方法 | 第74-76页 |
| ·糖化血清蛋白含量测定 | 第76页 |
| ·小鼠组织免疫印迹实验 | 第76-77页 |
| ·小鼠免疫组织化学实验 | 第77页 |
| ·数据分析 | 第77-78页 |
| 第三章 实验结果 | 第78-96页 |
| ·腹腔注射核糖的小鼠体内糖基化水平升高 | 第78-80页 |
| ·腹腔注射核糖的小鼠血清中糖化血清蛋白含量升高 | 第78页 |
| ·腹腔注射核糖的小鼠血清中晚期糖基化终末产物含量升高 | 第78-79页 |
| ·腹腔注射核糖的小鼠脑内晚期糖基化终末产物含量升高 | 第79-80页 |
| ·腹腔注射核糖的小鼠检测到认知行为学障碍 | 第80-81页 |
| ·腹腔注射核糖的小鼠脑内星状胶质细胞被激活 | 第81-84页 |
| ·腹腔注射核糖的小鼠脑内GFAP表达水平升高 | 第81-82页 |
| ·腹腔注射核糖的小鼠海马区星状胶质细胞的免疫组化检测 | 第82-84页 |
| ·腹腔注射核糖的小鼠脑内炎症通路相关蛋白表达水平升高 | 第84-85页 |
| ·腹腔注射核糖的小鼠RAGE表达水平升高 | 第84页 |
| ·腹腔注射核糖的小鼠脑内NF-κB、TNF-α表达水平升高 | 第84-85页 |
| ·核糖处理的胶质瘤细胞系中AGEs和RAGE表达水平升高 | 第85-87页 |
| ·核糖处理的U251细胞系中晚期糖基化终末产物和RAGE表达水平升高 | 第85-86页 |
| ·核糖处理的U87MG细胞系中晚期糖基化终末产物和RAGE表达水平升高 | 第86-87页 |
| ·核糖处理的胶质瘤细胞炎症通路蛋白水平升高 | 第87-90页 |
| ·核糖处理的U251细胞GFAP、NF-κB和TNF-α含量升高 | 第87页 |
| ·核糖处理的U87MG细胞GFAP、NF-κB和TNF-α含量升高 | 第87-89页 |
| ·核糖处理的U251、U87MG细胞GFAP的免疫荧光检测 | 第89-90页 |
| ·核糖处理的胶质瘤细胞系中NO与iNOS表达的检测 | 第90-91页 |
| ·核糖处理的U251、U87MG细胞释放总NO含量的检测 | 第90页 |
| ·核糖处理的U251、U87MG细胞iNOS表达的检测 | 第90-91页 |
| ·RAGE基因沉默或功能阻断后细胞炎症通路蛋白的水平变化 | 第91-96页 |
| ·RAGE在U251和U87MG细胞系中的基因沉默 | 第91-92页 |
| ·基因沉默后核糖处理U251中GFAP、NF-κB和TNF-α水平检测 | 第92页 |
| ·基因沉默后核糖处理U87MG中GFAP、NF-κB和TNF-α水平检测 | 第92-94页 |
| ·RAGE阻断后核糖处理U251细胞中的GFAP、NF-κB和TNF-α水平检测 | 第94页 |
| ·RAGE阻断后核糖处理U87MG细胞中的GFAP、NF-κB和TNF-α水平检测 | 第94-96页 |
| 第四章 讨论和总结 | 第96-103页 |
| ·核糖诱导体内产生晚期糖基化终末产物的动物模型的建立 | 第96-97页 |
| ·核糖糖基化的人神经胶质瘤细胞系的细胞层次模型 | 第96页 |
| ·核糖在体糖基化的小鼠模型 | 第96-97页 |
| ·炎症反应、星状胶质细胞与学习记忆能力损伤 | 第97-100页 |
| ·炎症反应的激活与学习记忆能力损伤 | 第97-98页 |
| ·星状胶质细胞的激活 | 第98-100页 |
| ·核糖糖基化作用与空间认知能力障碍 | 第100-102页 |
| ·全文总结 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-110页 |
| 英文缩写 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111-113页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第113页 |
