| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-21页 |
| ·淀粉酶的分类 | 第12页 |
| ·碱性淀粉酶的特性 | 第12-15页 |
| ·碱性淀粉酶的三级（3-D）结构 | 第12-13页 |
| ·酶对底物的作用特性 | 第13页 |
| ·耐碱性与耐热性 | 第13-14页 |
| ·金属离子稳定性 | 第14-15页 |
| ·理化特性 | 第15页 |
| ·碱性淀粉酶的生产 | 第15-16页 |
| ·产酶微生物筛选 | 第15页 |
| ·高产菌株选育 | 第15页 |
| ·产酶重组菌的构建 | 第15-16页 |
| ·碱性淀粉酶生产的发酵过程优化 | 第16页 |
| ·碱性淀粉酶的分离纯化 | 第16页 |
| ·碱性淀粉酶的应用 | 第16-18页 |
| ·碱性淀粉酶在纺织领域中的应用 | 第16-17页 |
| ·碱性淀粉酶在洗涤剂工业中的应用 | 第17-18页 |
| ·碱性淀粉酶在其他工业中的应用 | 第18页 |
| ·碱性淀粉酶分子改造 | 第18页 |
| ·本论文的主要研究内容 | 第18-21页 |
| ·立题依据及研究意义 | 第18-19页 |
| ·主要研究内容 | 第19-21页 |
| 第二章 碱性淀粉酶的异源表达及性质分析 | 第21-33页 |
| ·引言 | 第21页 |
| ·材料与方法 | 第21-26页 |
| ·菌株与质粒 | 第21页 |
| ·试剂与仪器 | 第21-22页 |
| ·重组菌构建方法 | 第22-23页 |
| ·培养基和培养条件 | 第23-24页 |
| ·碱性淀粉酶纯化条件与方法 | 第24页 |
| ·分析方法 | 第24-26页 |
| ·结果 | 第26-30页 |
| ·碱性淀粉酶的异源表达及分离纯化 | 第26-28页 |
| ·碱性淀粉酶动力学参数分析 | 第28页 |
| ·碱性淀粉酶耐氧化性分析 | 第28页 |
| ·碱性淀粉酶的最适pH及pH稳定性分析 | 第28-29页 |
| ·碱性淀粉酶的最适反应温度及温度稳定性分析 | 第29页 |
| ·金属离子对碱性淀粉酶稳定性的影响 | 第29-30页 |
| ·表面活性剂与洗涤剂对碱性淀粉酶稳定性的影响 | 第30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-33页 |
| 第三章 基于同源结构模拟的定点突变技术提高碱性淀粉酶的耐氧化性 | 第33-46页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·材料与方法 | 第33-35页 |
| ·菌株与质粒 | 第33页 |
| ·试剂与仪器 | 第33页 |
| ·重组菌构建方法 | 第33-34页 |
| ·碱性淀粉酶 3-D结构同源模拟 | 第34页 |
| ·培养基和培养条件 | 第34页 |
| ·碱性淀粉酶纯化条件与方法 | 第34页 |
| ·分析方法 | 第34-35页 |
| ·结果 | 第35-42页 |
| ·碱性淀粉酶 3-D结构同源模拟 | 第35-36页 |
| ·碱性淀粉酶耐氧化性分子改造位点分析 | 第36-37页 |
| ·突变体表达与纯化 | 第37页 |
| ·定点突变对碱性淀粉酶耐氧化性的影响 | 第37页 |
| ·耐氧化分子改造对酶动力学参数的影响 | 第37-38页 |
| ·耐氧化分子改造对酶pH稳定性的影响 | 第38-39页 |
| ·耐氧化分子改造对酶温度稳定性的影响 | 第39页 |
| ·耐氧化定点突变对酶的表面活性剂和洗涤剂耐受性影响 | 第39-40页 |
| ·复合突变对碱性淀粉酶耐氧化性的影响 | 第40-41页 |
| ·复合突变对碱性淀粉酶动力学参数的影响 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·小结 | 第44-46页 |
| 第四章 基于同源结构模拟的复合定点突变提高碱性淀粉酶的耐氧化性 | 第46-60页 |
| ·前言 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-48页 |
| ·菌株与质粒 | 第46页 |
| ·试剂与仪器 | 第46页 |
| ·重组菌构建方法 | 第46-47页 |
| ·碱性淀粉酶 3-D结构同源模拟 | 第47页 |
| ·培养基和培养条件 | 第47-48页 |
| ·碱性淀粉酶纯化条件与方法 | 第48页 |
| ·分析方法 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-54页 |
| ·单点突变对碱性淀粉酶耐氧化性的影响 | 第48-49页 |
| ·单点突变对碱性淀粉酶动力学参数的影响 | 第49-50页 |
| ·复合突变提高碱性淀粉酶耐氧化性的理性设计 | 第50-51页 |
| ·复合突变对碱性淀粉酶耐氧化性的影响 | 第51页 |
| ·复合突变对碱性淀粉酶动力学参数的影响 | 第51-52页 |
| ·复合突变对碱性淀粉酶pH稳定性的影响 | 第52-53页 |
| ·复合突变对碱性淀粉酶温度稳定性的影响 | 第53页 |
| ·复合突变对酶的表面活性剂和洗涤剂耐受性影响 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-58页 |
| ·小结 | 第58-60页 |
| 第五章 N-端融合寡肽提高碱性淀粉酶的催化效率 | 第60-72页 |
| ·前言 | 第60页 |
| ·材料与方法 | 第60-63页 |
| ·菌株与质粒 | 第60页 |
| ·试剂与仪器 | 第60页 |
| ·重组菌构建方法 | 第60-61页 |
| ·寡肽 | 第61-62页 |
| ·碱性淀粉酶 3-D结构同源模拟 | 第62页 |
| ·培养基和培养条件 | 第62页 |
| ·碱性淀粉酶纯化条件与方法 | 第62页 |
| ·分析方法 | 第62-63页 |
| ·结果 | 第63-67页 |
| ·活性蛋白在E. coli BL21（DE3）融合与表达 | 第63-64页 |
| ·融合蛋白的分离纯化 | 第64页 |
| ·寡肽融合对碱性淀粉酶动力学参数的影响 | 第64页 |
| ·寡肽融合对碱性淀粉酶pH稳定性的影响 | 第64-65页 |
| ·寡肽融合对碱性淀粉酶温度稳定性的影响 | 第65-66页 |
| ·寡肽融合对碱性淀粉酶耐氧化特性的影响 | 第66页 |
| ·寡肽融合对酶的洗涤剂耐受性影响 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第六章 基于随机截断与寡肽融合提高碱性淀粉酶的催化效率 | 第72-86页 |
| ·前言 | 第72页 |
| ·材料与方法 | 第72-75页 |
| ·菌株与质粒 | 第72页 |
| ·试剂与仪器 | 第72页 |
| ·重组菌构建方法 | 第72-74页 |
| ·碱性淀粉酶 3-D结构同源模拟 | 第74页 |
| ·培养基和培养条件 | 第74页 |
| ·碱性淀粉酶纯化条件与方法 | 第74页 |
| ·分析方法 | 第74-75页 |
| ·结果 | 第75-81页 |
| ·截断碱性淀粉酶的结构解析和寡肽融合 | 第75-76页 |
| ·随机截断对碱性淀粉酶动力学参数的影响 | 第76-77页 |
| ·随机截断后融合表达对碱性淀粉酶动力学参数的影响 | 第77-78页 |
| ·随机截断与融合表达对碱性淀粉酶降解玉米淀粉特异性的影响 | 第78-79页 |
| ·随机截断与融合表达对碱性淀粉酶pH稳定性和温度稳定性的影响 | 第79页 |
| ·随机截断与融合表达对碱性淀粉酶耐氧化性的影响 | 第79页 |
| ·随机截断与截断后寡肽融合对酶的表面活性剂耐受性影响 | 第79-80页 |
| ·随机截断与截断后寡肽融合对酶的洗涤剂耐受性影响 | 第80-81页 |
| ·讨论 | 第81-85页 |
| ·小结 | 第85-86页 |
| 主要结论与展望 | 第86-88页 |
| 主要结论 | 第86-87页 |
| 展望 | 第87-88页 |
| 论文创新点 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-96页 |
| 附录 | 第96页 |
