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副猪嗜血杆菌—猪霍乱沙门氏菌二联基因工程疫苗研究

目录第1-7页
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
縮略语表第11-13页
1 文献综述第13-28页
   ·副猪嗜血杆菌研究进展第13-19页
     ·病原学与发病机理第13-14页
     ·流行病学第14-15页
     ·临床症状和病理变化第15-16页
     ·诊断第16-17页
     ·防制第17-19页
   ·减毒沙门氏菌活疫苗载体系统研究进展第19-28页
     ·减毒策略第19-22页
     ·免疫机理第22-24页
     ·减毒沙门氏菌活疫苗载体系统的优势与局限第24-25页
     ·减毒沙门氏菌活疫苗载体系统的临床应用第25-27页
     ·沙门氏菌载体活疫苗与肠道粘膜免疫第27-28页
2 前言第28-29页
3 材料与方法第29-44页
   ·细菌、质粒及试验动物第29-31页
   ·主要试剂、培养基及缓冲液第31-34页
     ·试验试剂第31页
     ·常用培养基的配制第31-32页
     ·常用溶液的配制第32-34页
     ·主要试验器材第34页
   ·试验方法第34-44页
     ·副猪嗜血杆菌-猪霍乱沙门氏菌二联基因工程疫苗菌株构建第34-38页
     ·二联基因工程疫苗菌株生物学特性鉴定第38-40页
     ·疫苗菌株C501(06257)、C501(HbpB)、C500(PalA)安全性评价第40页
     ·副猪嗜血杆菌-猪霍乱沙门氏菌二联基因工程疫苗制备第40页
     ·二联重组基因工程疫苗小鼠免疫试验第40-43页
     ·免疫小鼠体内疫苗菌株的定植检测第43-44页
     ·二联重组基因工程疫苗对免疫小鼠的攻毒保护性试验第44页
4 结果与分析第44-62页
   ·二联基因工程疫苗重组菌株构建第44-47页
     ·目的基因分析与克隆第44-46页
     ·表达质粒pYA-06257、pYA-HbpB和pYA-PalA酶切鉴定第46页
     ·重组菌株C501(06257)、C501(HbpB)及C500(PalA)鉴定第46-47页
   ·重组菌株生物学特性鉴定研究第47-52页
     ·重组菌株C501(06257)、C501(HbpB)及C500(PalA)表达特性第47-49页
     ·重组疫苗菌株遗传稳定性研究第49-50页
     ·重组菌C501(06257)、C501(HbpB)及C500(PalA)生长特性研究第50-51页
     ·重组菌株生化特性鉴定第51-52页
     ·重组菌株对小鼠的LD_(50)测定第52页
   ·重组菌株对易感仔猪的安全性评估第52-53页
   ·重组蛋白HPS06257、HbpB及PalA的SDS-PAGE分析第53-54页
   ·免疫小鼠特异性抗体检测第54-59页
     ·HPS06257特异性抗体水平检测及其亚类分析第54-55页
     ·HbpB特异性抗体水平检测及其亚类分析第55-56页
     ·PalA特异性抗体水平检测及其亚类分析第56-57页
     ·沙门氏菌抗原特异性IgG水平检测第57-58页
     ·免疫小鼠体内IgA水平检测第58-59页
   ·免疫小鼠组织载菌分布检测第59-60页
   ·免疫小鼠攻毒试验第60-62页
     ·免疫小鼠对副猪嗜血杆菌SH0165菌株的攻毒保护试验第60-61页
     ·免疫小鼠对猪霍乱沙门氏菌C78-1菌株的攻毒保护试验第61-62页
5 讨论第62-66页
   ·猪霍乱沙门氏菌及其作为疫苗载体的应用前景第62-63页
   ·关于副猪嗜血杆菌病防控的一些探讨第63-64页
   ·副猪嗜血杆菌-猪霍乱沙门氏菌疫苗研究的结果与反思第64-66页
6 小结第66-67页
   ·主要结论第66页
   ·值得进一步探讨的问题第66-67页
附录第67-68页
参考文献第68-73页
致谢第73页

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