| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语（Abbreviation) | 第11-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-23页 |
| 1 支原体的概述 | 第13-17页 |
| ·支原体的发展历史 | 第13页 |
| ·支原体的形态与结构 | 第13-14页 |
| ·支原体的微生态学 | 第14-15页 |
| ·支原体在自然界的分布 | 第14页 |
| ·支原体的寄生 | 第14-15页 |
| ·支原体的传播与感染 | 第15页 |
| ·动物支原体病 | 第15-16页 |
| ·支原体的培养 | 第16页 |
| ·支原体对细胞培养的污染 | 第16-17页 |
| ·支原体对兽用活疫苗的污染 | 第17页 |
| 2 支原体污染的检测及鉴定方法 | 第17-21页 |
| ·分离培养法 | 第18页 |
| ·DNA荧光染色法 | 第18页 |
| ·核酸杂交技术 | 第18-19页 |
| ·PCR技术 | 第19-20页 |
| ·间接免疫荧光试验(IFA) | 第20页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第20页 |
| ·表面免疫荧光技术 | 第20-21页 |
| ·生长抑制试验(GIT) | 第21页 |
| ·代谢抑制试验(MIT) | 第21页 |
| 3 预防及清除污染细胞的支原体 | 第21-22页 |
| ·细胞污染支原体的预防 | 第21-22页 |
| ·细胞污染支原体的清除 | 第22页 |
| 4 研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 生物制品中支原体污染的PCR检测方法的建立 | 第23-35页 |
| 1 材料 | 第23-24页 |
| ·菌株及病毒株 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·培养基及其配置 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| 2 方法 | 第24-28页 |
| ·引物设计 | 第24-26页 |
| ·支原体培养 | 第26页 |
| ·支原体的复苏 | 第26页 |
| ·支原体的传代 | 第26页 |
| ·支原体菌液浓度测定试验 | 第26-27页 |
| ·支原体核酸的抽提及其浓度的测定 | 第27页 |
| ·病毒核酸的抽提 | 第27页 |
| ·PCR扩增反应 | 第27-28页 |
| ·PCR扩增反应的特异性试验 | 第28页 |
| ·PCR扩增反应的敏感性试验 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-32页 |
| ·支原体培养物及其核酸的浓度测定结果 | 第28-29页 |
| ·PCR扩增反应的结果 | 第29页 |
| ·PCR扩增反应的特异性试验结果 | 第29-30页 |
| ·PCR扩增反应的敏感性试验结果 | 第30-32页 |
| 4 讨论 | 第32-33页 |
| 5 小结 | 第33-35页 |
| 第三章 生物制品中支原体污染的PCR检测方法的应用 | 第35-50页 |
| 1 材料 | 第35-37页 |
| ·菌株 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·培养基及其配置 | 第35-36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·细胞及疫苗样品 | 第36-37页 |
| 2 方法 | 第37-41页 |
| ·细胞样品的准备 | 第37-38页 |
| ·细胞的复苏 | 第37-38页 |
| ·细胞的传代 | 第38页 |
| ·疫苗样品的准备 | 第38页 |
| ·PCR模板的准备 | 第38页 |
| ·PCR方法检测细胞及疫苗样品 | 第38-40页 |
| ·培养法检测细胞及疫苗样品 | 第40页 |
| ·DNA荧光染色法检测细胞样品 | 第40页 |
| ·DNA荧光染色法检测疫苗样品 | 第40-41页 |
| 3 结果 | 第41-47页 |
| ·PCR方法检测细胞及疫苗样品的结果 | 第41-42页 |
| ·商品化支原体检测试剂盒检测细胞及疫苗样品的结果 | 第42-43页 |
| ·分离培养法检测细胞及疫苗样品的结果 | 第43-44页 |
| ·DNA荧光染色法检测细胞及疫苗样品的结果 | 第44-45页 |
| ·四种方法的检测结果对比 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-48页 |
| 5 小结 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 致谢 | 第54页 |