气肿疽梭菌单克隆抗体的制备及胶体金诊断试纸条的研制
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 前言 | 第10-16页 |
| 1. 气肿疽的研究概述 | 第10-12页 |
| ·病原体特性 | 第10页 |
| ·流行病学 | 第10-11页 |
| ·临床症状及病理变化 | 第11页 |
| ·气肿疽的诊断 | 第11-12页 |
| ·气肿疽的防控 | 第12页 |
| 2. 单克隆抗体的研究进展及应用 | 第12-13页 |
| 3. 胶体金试纸条的研究进展及应用 | 第13-14页 |
| 4. 本课题研究的目的和意义 | 第14-16页 |
| 材料与方法 | 第16-31页 |
| 1. 材料 | 第16-21页 |
| ·菌株 | 第16页 |
| ·实验动物及细胞 | 第16页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第16-17页 |
| ·所需主要溶液及培养基的配制 | 第17-20页 |
| ·主要试验仪器 | 第20-21页 |
| 2. 方法 | 第21-31页 |
| ·动物免疫 | 第21-23页 |
| ·杂交瘤细胞制备 | 第23-24页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第24-25页 |
| ·单克隆抗体亚类的鉴定 | 第25页 |
| ·单克隆抗体特异性的鉴定 | 第25页 |
| ·单克隆抗体的大量制备、纯化及效价测定 | 第25-26页 |
| ·兔抗气肿疽梭菌多抗的纯化及效价测定 | 第26-27页 |
| ·制备胶体金器皿的准备 | 第27页 |
| ·胶体金的制备 | 第27页 |
| ·金标的制备 | 第27-28页 |
| ·试纸条的制备 | 第28-29页 |
| ·试纸条的检测方法和结果判定 | 第29-30页 |
| ·敏感性试验 | 第30页 |
| ·特异性试验 | 第30页 |
| ·重复性试验 | 第30页 |
| ·稳定性试验 | 第30页 |
| ·试纸条的初步检测 | 第30-31页 |
| 结果 | 第31-42页 |
| 1. 单克隆抗体的制备结果 | 第31-34页 |
| ·BALB/c 小鼠免疫 | 第31页 |
| ·间接ELISA方法反应条件的筛选结果 | 第31-32页 |
| ·骨髓瘤细胞的制备结果 | 第32-33页 |
| ·细胞融合与克隆结果 | 第33页 |
| ·MAb亚型鉴定结果 | 第33-34页 |
| ·腹水的效价检测结果 | 第34页 |
| ·单克隆抗体的Western-blot分析 | 第34页 |
| 2. 胶体金试纸条制备结果 | 第34-42页 |
| ·纯化后的兔抗气肿疽梭菌抗体的效价测定结果 | 第34-35页 |
| ·单克隆抗体纯化后效价测定及含量测定结果 | 第35页 |
| ·胶体金颗粒的制备结果 | 第35页 |
| ·单克隆抗体与胶体金结合的最佳pH确定 | 第35-36页 |
| ·胶体金标记单克隆抗体最适用量的确定 | 第36页 |
| ·金标垫的制备 | 第36页 |
| ·不同型号NC膜的选择结果 | 第36-37页 |
| ·T线及C线的优化结果 | 第37页 |
| ·试纸条的组装和判定 | 第37-38页 |
| ·敏感性试验 | 第38页 |
| ·特异性试验 | 第38-39页 |
| ·重复性试验 | 第39页 |
| ·稳定性试验 | 第39页 |
| ·试纸条的初步应用 | 第39-42页 |
| 讨论 | 第42-46页 |
| 1. 关于细胞培养过程中的污染 | 第42页 |
| 2. 细胞融合及筛选 | 第42-43页 |
| 3. 单克隆抗体的纯化 | 第43页 |
| 4. 胶体金试纸条的制备 | 第43-44页 |
| 5. 关于检测结果的分析 | 第44-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
