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耐盐基因SeNHX1转化植物的初步研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
目录第9-15页
缩略词中英文对照表第15-17页
第一章 文献综述第17-39页
   ·植物耐盐机理及耐盐基因的相关研究第17-21页
     ·植物耐盐机理第18-20页
     ·Na~+/H~+逆向转运蛋白基因 SeNHX1 的研究第20-21页
   ·植物转基因技术及其研究进展第21-26页
     ·农杆菌介导法第22-24页
     ·显微注射法第24页
     ·基因枪法第24-25页
     ·花粉管通道法第25页
     ·花序浸泡法第25-26页
   ·利用转基因技术对植物遗传改良的研究进展第26-32页
     ·品质改良第26-28页
     ·提高植物抗逆性的遗传改良第28-30页
     ·抗病虫害基因转化植物的遗传改良第30页
     ·转基因植物作为生物反应器第30-32页
   ·植物转基因技术存在的问题第32页
     ·转化效率低第32页
     ·转基因植物安全性问题第32页
   ·紫花苜蓿耐盐性研究进展第32-36页
     ·紫花苜蓿耐盐指标的研究进展第32-35页
     ·紫花苜蓿耐盐性评价方法的研究第35-36页
   ·本课题研究目标及研究内容第36-39页
第二章 SeNHX1 转基因烟草的获得及分子生物学鉴定第39-59页
   ·材料第39-41页
     ·受体材料第39页
     ·大肠杆菌和农杆菌工程菌及质粒第39-40页
     ·主要试剂第40页
     ·培养基第40页
     ·主要仪器设备第40-41页
   ·试验方法第41-45页
     ·无菌烟草的制备第41页
     ·根癌农杆菌菌种的培养和保存第41-42页
     ·根癌农杆菌侵染液的制备第42页
     ·侵染和共培养第42页
     ·脱菌培养和选择培养第42页
     ·生根培养第42页
     ·头孢霉素抑菌剂浓度的确定第42-43页
     ·选择培养基中卡那霉素选择压的确定第43页
     ·根癌农杆菌适宜侵染浓度和侵染时间的确定第43页
     ·超声波处理辅助根癌农杆菌介导的烟草遗传转化第43页
     ·表面活性剂 Silwet L-77 对转化率的影响第43-44页
     ·转化体的分子生物学检测第44-45页
   ·结果与分析第45-55页
     ·头孢霉素抑菌剂浓度的确定第45-46页
     ·卡那霉素选择压的确立第46-47页
     ·根癌农杆菌侵染浓度及侵染时间对转化的影响第47-49页
     ·超声波处理对转化效率的影响第49-50页
     ·Silwet L-77 对转化率的影响第50页
     ·烟草转化子的基因组 DNA 的提取第50-51页
     ·质粒 pBI121-SeNHX1 电泳结果分析第51-52页
     ·部分烟草转化植株 PCR 分子检测第52-55页
   ·讨论第55-59页
     ·抗生素在烟草遗传转化中的作用第55-56页
     ·农杆菌菌液浓度及侵染时间对烟草遗传转化的影响第56-57页
     ·超声波辅助农杆菌介导法第57页
     ·表面活性剂第57-59页
第三章 转 SeNHX1 基因拟南芥的获得及分子生物学鉴定第59-67页
   ·材料与方法第59-61页
     ·实验材料第59页
     ·拟南芥种植方法第59页
     ·花序浸泡法转化拟南芥第59-60页
     ·拟南芥转化子的筛选第60页
     ·农杆菌侵染浓度及转化时间的确定第60页
     ·转化缓冲液成分的确定第60-61页
   ·结果与分析第61-65页
     ·农杆菌侵染浓度及转化时间的影响第61-62页
     ·转化缓冲液不同成分的影响第62-63页
     ·转化子的筛选第63页
     ·抗性出苗转化子的基因组 DNA 的提取第63-64页
     ·抗性出苗转化子 PCR 检测第64-65页
   ·讨论第65-67页
     ·农杆菌侵染浓度及转化时间的影响第65页
     ·转化缓冲液不同成分的影响第65-67页
第四章 SeNHX1 基因转化紫花苜蓿的研究第67-73页
   ·材料和方法第67-68页
     ·植物材料第67页
     ·培养基第67-68页
     ·主要仪器设备第68页
   ·方法第68-69页
     ·紫花苜蓿无菌受体材料材料准备第68页
     ·根癌农杆菌浸染悬浮液的制备第68-69页
     ·根癌农杆菌侵染与共培养第69页
     ·紫花苜蓿外植体的脱菌培养第69页
     ·选择培养第69页
     ·苜蓿转基因愈伤组织的激素诱导第69页
   ·结果与讨论第69-73页
     ·激素诱导结果第69-70页
     ·愈伤组织 PCR 结果第70-73页
第五章 NaCl 胁迫下 6 个苜蓿栽培品种种子萌发期耐盐性比较第73-87页
   ·材料第73-74页
     ·植物材料第73页
     ·主要试剂第73页
     ·主要设备第73-74页
     ·培养条件第74页
   ·实验方法第74-75页
     ·种子的发芽处理第74页
     ·测定指标第74-75页
     ·耐盐性数据统计及分析方法第75页
   ·结果与分析第75-83页
     ·不同 NaCl 盐浓度对发芽势的影响第75-76页
     ·不同 NaCl 盐浓度对发芽率的影响第76页
     ·不同 NaCl 盐浓度对胚根长的影响第76-78页
     ·不同 NaCl 盐浓度对胚芽长的影响第78-79页
     ·不同 NaCl 盐浓度对苗长的影响第79页
     ·不同 NaCl 盐浓度对根芽比的影响第79-80页
     ·不同 NaCl 盐浓度对单株鲜重的影响第80-81页
     ·不同 NaCl 盐浓度对发芽指数的影响第81页
     ·不同 NaCl 盐浓度对活力指数的影响第81-82页
     ·各形态指标与盐浓度关系的回归分析第82-83页
   ·6 个苜蓿品种耐盐性的综合评价第83-84页
   ·讨论第84-87页
     ·盐胁迫对苜蓿种子萌发的影响第84-85页
     ·紫花苜蓿各指标与盐浓度的相关性第85页
     ·6 个紫花苜蓿品种耐盐性的综合评价第85-87页
第六章 全文结论第87-91页
   ·根癌农杆菌介导的烟草遗传转化的研究第87-88页
   ·花序浸泡法转化拟南芥的研究第88页
   ·6 个紫花苜蓿品种种子萌发期的耐盐性第88-89页
   ·本研究的创新点第89页
   ·下一步研究的设想第89-91页
     ·SeNHX1 基因烟草以及拟南芥转化植株的进一步分子生物学检测第89页
     ·SeNHX1 基因烟草转化植株以及拟南芥转化植株在盐胁迫下的耐盐性检测第89页
     ·SeNHX1 基因紫花苜蓿转化植株的再生及分子生物学检测第89-90页
     ·再生植株的耐盐性鉴定第90页
     ·SeNHX1 基因在紫花苜蓿转化植株中稳定性表达检测第90-91页
参考文献第91-99页
附录第99-101页
致谢第101-103页
攻读学位期间发表的学术论文第103页

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