摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
目录 | 第9-15页 |
缩略词中英文对照表 | 第15-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-39页 |
·植物耐盐机理及耐盐基因的相关研究 | 第17-21页 |
·植物耐盐机理 | 第18-20页 |
·Na~+/H~+逆向转运蛋白基因 SeNHX1 的研究 | 第20-21页 |
·植物转基因技术及其研究进展 | 第21-26页 |
·农杆菌介导法 | 第22-24页 |
·显微注射法 | 第24页 |
·基因枪法 | 第24-25页 |
·花粉管通道法 | 第25页 |
·花序浸泡法 | 第25-26页 |
·利用转基因技术对植物遗传改良的研究进展 | 第26-32页 |
·品质改良 | 第26-28页 |
·提高植物抗逆性的遗传改良 | 第28-30页 |
·抗病虫害基因转化植物的遗传改良 | 第30页 |
·转基因植物作为生物反应器 | 第30-32页 |
·植物转基因技术存在的问题 | 第32页 |
·转化效率低 | 第32页 |
·转基因植物安全性问题 | 第32页 |
·紫花苜蓿耐盐性研究进展 | 第32-36页 |
·紫花苜蓿耐盐指标的研究进展 | 第32-35页 |
·紫花苜蓿耐盐性评价方法的研究 | 第35-36页 |
·本课题研究目标及研究内容 | 第36-39页 |
第二章 SeNHX1 转基因烟草的获得及分子生物学鉴定 | 第39-59页 |
·材料 | 第39-41页 |
·受体材料 | 第39页 |
·大肠杆菌和农杆菌工程菌及质粒 | 第39-40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·培养基 | 第40页 |
·主要仪器设备 | 第40-41页 |
·试验方法 | 第41-45页 |
·无菌烟草的制备 | 第41页 |
·根癌农杆菌菌种的培养和保存 | 第41-42页 |
·根癌农杆菌侵染液的制备 | 第42页 |
·侵染和共培养 | 第42页 |
·脱菌培养和选择培养 | 第42页 |
·生根培养 | 第42页 |
·头孢霉素抑菌剂浓度的确定 | 第42-43页 |
·选择培养基中卡那霉素选择压的确定 | 第43页 |
·根癌农杆菌适宜侵染浓度和侵染时间的确定 | 第43页 |
·超声波处理辅助根癌农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第43页 |
·表面活性剂 Silwet L-77 对转化率的影响 | 第43-44页 |
·转化体的分子生物学检测 | 第44-45页 |
·结果与分析 | 第45-55页 |
·头孢霉素抑菌剂浓度的确定 | 第45-46页 |
·卡那霉素选择压的确立 | 第46-47页 |
·根癌农杆菌侵染浓度及侵染时间对转化的影响 | 第47-49页 |
·超声波处理对转化效率的影响 | 第49-50页 |
·Silwet L-77 对转化率的影响 | 第50页 |
·烟草转化子的基因组 DNA 的提取 | 第50-51页 |
·质粒 pBI121-SeNHX1 电泳结果分析 | 第51-52页 |
·部分烟草转化植株 PCR 分子检测 | 第52-55页 |
·讨论 | 第55-59页 |
·抗生素在烟草遗传转化中的作用 | 第55-56页 |
·农杆菌菌液浓度及侵染时间对烟草遗传转化的影响 | 第56-57页 |
·超声波辅助农杆菌介导法 | 第57页 |
·表面活性剂 | 第57-59页 |
第三章 转 SeNHX1 基因拟南芥的获得及分子生物学鉴定 | 第59-67页 |
·材料与方法 | 第59-61页 |
·实验材料 | 第59页 |
·拟南芥种植方法 | 第59页 |
·花序浸泡法转化拟南芥 | 第59-60页 |
·拟南芥转化子的筛选 | 第60页 |
·农杆菌侵染浓度及转化时间的确定 | 第60页 |
·转化缓冲液成分的确定 | 第60-61页 |
·结果与分析 | 第61-65页 |
·农杆菌侵染浓度及转化时间的影响 | 第61-62页 |
·转化缓冲液不同成分的影响 | 第62-63页 |
·转化子的筛选 | 第63页 |
·抗性出苗转化子的基因组 DNA 的提取 | 第63-64页 |
·抗性出苗转化子 PCR 检测 | 第64-65页 |
·讨论 | 第65-67页 |
·农杆菌侵染浓度及转化时间的影响 | 第65页 |
·转化缓冲液不同成分的影响 | 第65-67页 |
第四章 SeNHX1 基因转化紫花苜蓿的研究 | 第67-73页 |
·材料和方法 | 第67-68页 |
·植物材料 | 第67页 |
·培养基 | 第67-68页 |
·主要仪器设备 | 第68页 |
·方法 | 第68-69页 |
·紫花苜蓿无菌受体材料材料准备 | 第68页 |
·根癌农杆菌浸染悬浮液的制备 | 第68-69页 |
·根癌农杆菌侵染与共培养 | 第69页 |
·紫花苜蓿外植体的脱菌培养 | 第69页 |
·选择培养 | 第69页 |
·苜蓿转基因愈伤组织的激素诱导 | 第69页 |
·结果与讨论 | 第69-73页 |
·激素诱导结果 | 第69-70页 |
·愈伤组织 PCR 结果 | 第70-73页 |
第五章 NaCl 胁迫下 6 个苜蓿栽培品种种子萌发期耐盐性比较 | 第73-87页 |
·材料 | 第73-74页 |
·植物材料 | 第73页 |
·主要试剂 | 第73页 |
·主要设备 | 第73-74页 |
·培养条件 | 第74页 |
·实验方法 | 第74-75页 |
·种子的发芽处理 | 第74页 |
·测定指标 | 第74-75页 |
·耐盐性数据统计及分析方法 | 第75页 |
·结果与分析 | 第75-83页 |
·不同 NaCl 盐浓度对发芽势的影响 | 第75-76页 |
·不同 NaCl 盐浓度对发芽率的影响 | 第76页 |
·不同 NaCl 盐浓度对胚根长的影响 | 第76-78页 |
·不同 NaCl 盐浓度对胚芽长的影响 | 第78-79页 |
·不同 NaCl 盐浓度对苗长的影响 | 第79页 |
·不同 NaCl 盐浓度对根芽比的影响 | 第79-80页 |
·不同 NaCl 盐浓度对单株鲜重的影响 | 第80-81页 |
·不同 NaCl 盐浓度对发芽指数的影响 | 第81页 |
·不同 NaCl 盐浓度对活力指数的影响 | 第81-82页 |
·各形态指标与盐浓度关系的回归分析 | 第82-83页 |
·6 个苜蓿品种耐盐性的综合评价 | 第83-84页 |
·讨论 | 第84-87页 |
·盐胁迫对苜蓿种子萌发的影响 | 第84-85页 |
·紫花苜蓿各指标与盐浓度的相关性 | 第85页 |
·6 个紫花苜蓿品种耐盐性的综合评价 | 第85-87页 |
第六章 全文结论 | 第87-91页 |
·根癌农杆菌介导的烟草遗传转化的研究 | 第87-88页 |
·花序浸泡法转化拟南芥的研究 | 第88页 |
·6 个紫花苜蓿品种种子萌发期的耐盐性 | 第88-89页 |
·本研究的创新点 | 第89页 |
·下一步研究的设想 | 第89-91页 |
·SeNHX1 基因烟草以及拟南芥转化植株的进一步分子生物学检测 | 第89页 |
·SeNHX1 基因烟草转化植株以及拟南芥转化植株在盐胁迫下的耐盐性检测 | 第89页 |
·SeNHX1 基因紫花苜蓿转化植株的再生及分子生物学检测 | 第89-90页 |
·再生植株的耐盐性鉴定 | 第90页 |
·SeNHX1 基因在紫花苜蓿转化植株中稳定性表达检测 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-99页 |
附录 | 第99-101页 |
致谢 | 第101-103页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第103页 |