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西瓜噬酸菌在非寄主植物种子中的存活及Ⅳ型菌毛相关基因的功能分析

目录第1-7页
摘要第7-8页
ABSTRACT第8-10页
第一部分 文献综述第10-27页
 第一章 西瓜噬酸菌第11-15页
  1 西瓜噬酸菌第11-12页
  2 病原菌分类地位、生物学和生理生化特性第12-13页
  3 症状特点第13页
  4 传播及侵染循环第13页
  5 研究现状第13-15页
 第二章 Ⅳ型菌毛研究进展第15-25页
  1 细菌分泌系统第15-20页
   ·Ⅰ型分泌系统(T1SS)第15-16页
   ·Ⅱ型分泌系统(T2SS)第16-17页
   ·Ⅲ型分泌系统(T3SS)第17页
   ·Ⅳ型分泌系统(T4SS)第17-18页
   ·Ⅴ型分泌系统(T5SS)第18-19页
   ·Ⅵ型分泌系统(T6SS)第19-20页
  2 Ⅳ型菌毛第20-25页
   ·Ⅳ型菌毛的结构第21-22页
   ·Ⅳ型菌毛的致病机制第22-25页
 第三章 绿色荧光蛋白标记第25-27页
  1 绿色荧光蛋白第25页
  2 GFP的应用第25-26页
   ·作为转基因植物和动物的筛选标记第25-26页
   ·基因表达及产物定位第26页
   ·用于免疫学,临床检验第26页
   ·GFP还可以追踪微生物在体内的感染途径,病毒和宿主的相互作用第26页
  3 植物与微生物之间的相互作用第26页
  4 GFP应用的展望第26-27页
第二部分 研究内容第27-59页
 第一章 西瓜噬酸菌在非寄主植物中寄生的研究第29-41页
  摘要第29页
  1 材料与方法第29-32页
   ·供试菌株和质粒及其培养条件第29-30页
   ·主要试剂和仪器第30页
   ·试剂第30页
   ·培养基第30-31页
   ·菌株的培养条件及保存第31页
   ·引物第31-32页
  2 试验方法第32-36页
   ·细菌基因组DNA的提取第32-33页
   ·PCR扩增及产物回收第33页
   ·质粒的提取第33-34页
   ·DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算第34页
   ·大肠杆菌热击感受态的制备和转化第34-35页
   ·荧光的构建第35页
   ·荧光标记菌株的验证第35-36页
   ·荧光标记菌在非寄主中存活的研究第36页
   ·杂草种子分离的菌株的致病性第36页
  3 结果与分析第36-40页
   ·构建好的荧光标记菌株第36-37页
   ·生长曲线第37-38页
   ·对致病性没有影响第38页
   ·荧光标记菌在杂草中存活第38-39页
   ·杂草种子分离的菌株的致病性第39-40页
  4 讨论第40-41页
 第二章 西瓜噬酸菌Ⅳ型菌毛相关基因的功能研究第41-59页
  摘要第41-42页
  1 材料与方法第42-46页
   ·供试菌株和质粒及其培养条件第42-43页
   ·主要试剂和仪器第43页
   ·试剂第43-44页
   ·培养基第44页
   ·菌株的培养条件及保存第44页
   ·引物第44-46页
  2 试验方法第46-48页
   ·细菌基因组DNA的提取第46页
   ·PCR扩增及产物回收第46页
   ·质粒的提取第46页
   ·DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算第46页
   ·大肠杆菌热击感受态的制备和转化第46页
   ·突变体的构建和互补菌株的构建第46页
   ·致病性测定第46页
   ·在MMX培养基中的生长测定第46-47页
   ·细菌胞外纤维素酶的检测第47页
   ·细胞形态观察第47页
   ·游动性实验第47页
   ·生物膜形成测定第47页
   ·烟草过敏性反应(HR)测定第47-48页
  3 结果和分析第48-56页
   ·突变株及互补菌株构建第48-50页
   ·各突变体对致病性的影响第50-51页
   ·突变菌株不影响果斑菌的生长第51-52页
   ·基因突变不影响细菌胞外纤维素酶第52-53页
   ·基因突变影响了西瓜噬酸菌的Ⅳ型菌毛合成第53页
   ·基因突变影响西瓜噬酸菌的游动性第53-54页
   ·基因突变影响西瓜噬酸菌的生物膜形成第54-55页
   ·基因突变不影响细菌激发烟草过敏性反应第55-56页
  4 讨论第56-59页
参考文献第59-67页
附录第67-75页
致谢第75页

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