目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-27页 |
第一章 西瓜噬酸菌 | 第11-15页 |
1 西瓜噬酸菌 | 第11-12页 |
2 病原菌分类地位、生物学和生理生化特性 | 第12-13页 |
3 症状特点 | 第13页 |
4 传播及侵染循环 | 第13页 |
5 研究现状 | 第13-15页 |
第二章 Ⅳ型菌毛研究进展 | 第15-25页 |
1 细菌分泌系统 | 第15-20页 |
·Ⅰ型分泌系统(T1SS) | 第15-16页 |
·Ⅱ型分泌系统(T2SS) | 第16-17页 |
·Ⅲ型分泌系统(T3SS) | 第17页 |
·Ⅳ型分泌系统(T4SS) | 第17-18页 |
·Ⅴ型分泌系统(T5SS) | 第18-19页 |
·Ⅵ型分泌系统(T6SS) | 第19-20页 |
2 Ⅳ型菌毛 | 第20-25页 |
·Ⅳ型菌毛的结构 | 第21-22页 |
·Ⅳ型菌毛的致病机制 | 第22-25页 |
第三章 绿色荧光蛋白标记 | 第25-27页 |
1 绿色荧光蛋白 | 第25页 |
2 GFP的应用 | 第25-26页 |
·作为转基因植物和动物的筛选标记 | 第25-26页 |
·基因表达及产物定位 | 第26页 |
·用于免疫学,临床检验 | 第26页 |
·GFP还可以追踪微生物在体内的感染途径,病毒和宿主的相互作用 | 第26页 |
3 植物与微生物之间的相互作用 | 第26页 |
4 GFP应用的展望 | 第26-27页 |
第二部分 研究内容 | 第27-59页 |
第一章 西瓜噬酸菌在非寄主植物中寄生的研究 | 第29-41页 |
摘要 | 第29页 |
1 材料与方法 | 第29-32页 |
·供试菌株和质粒及其培养条件 | 第29-30页 |
·主要试剂和仪器 | 第30页 |
·试剂 | 第30页 |
·培养基 | 第30-31页 |
·菌株的培养条件及保存 | 第31页 |
·引物 | 第31-32页 |
2 试验方法 | 第32-36页 |
·细菌基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
·PCR扩增及产物回收 | 第33页 |
·质粒的提取 | 第33-34页 |
·DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算 | 第34页 |
·大肠杆菌热击感受态的制备和转化 | 第34-35页 |
·荧光的构建 | 第35页 |
·荧光标记菌株的验证 | 第35-36页 |
·荧光标记菌在非寄主中存活的研究 | 第36页 |
·杂草种子分离的菌株的致病性 | 第36页 |
3 结果与分析 | 第36-40页 |
·构建好的荧光标记菌株 | 第36-37页 |
·生长曲线 | 第37-38页 |
·对致病性没有影响 | 第38页 |
·荧光标记菌在杂草中存活 | 第38-39页 |
·杂草种子分离的菌株的致病性 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-41页 |
第二章 西瓜噬酸菌Ⅳ型菌毛相关基因的功能研究 | 第41-59页 |
摘要 | 第41-42页 |
1 材料与方法 | 第42-46页 |
·供试菌株和质粒及其培养条件 | 第42-43页 |
·主要试剂和仪器 | 第43页 |
·试剂 | 第43-44页 |
·培养基 | 第44页 |
·菌株的培养条件及保存 | 第44页 |
·引物 | 第44-46页 |
2 试验方法 | 第46-48页 |
·细菌基因组DNA的提取 | 第46页 |
·PCR扩增及产物回收 | 第46页 |
·质粒的提取 | 第46页 |
·DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算 | 第46页 |
·大肠杆菌热击感受态的制备和转化 | 第46页 |
·突变体的构建和互补菌株的构建 | 第46页 |
·致病性测定 | 第46页 |
·在MMX培养基中的生长测定 | 第46-47页 |
·细菌胞外纤维素酶的检测 | 第47页 |
·细胞形态观察 | 第47页 |
·游动性实验 | 第47页 |
·生物膜形成测定 | 第47页 |
·烟草过敏性反应(HR)测定 | 第47-48页 |
3 结果和分析 | 第48-56页 |
·突变株及互补菌株构建 | 第48-50页 |
·各突变体对致病性的影响 | 第50-51页 |
·突变菌株不影响果斑菌的生长 | 第51-52页 |
·基因突变不影响细菌胞外纤维素酶 | 第52-53页 |
·基因突变影响了西瓜噬酸菌的Ⅳ型菌毛合成 | 第53页 |
·基因突变影响西瓜噬酸菌的游动性 | 第53-54页 |
·基因突变影响西瓜噬酸菌的生物膜形成 | 第54-55页 |
·基因突变不影响细菌激发烟草过敏性反应 | 第55-56页 |
4 讨论 | 第56-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
附录 | 第67-75页 |
致谢 | 第75页 |