中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
1 前言 | 第12-38页 |
·蕨类植物概述 | 第12-20页 |
·蕨类植物在植物界的系统位置与分布 | 第12-13页 |
·蕨类植物分子生物学研究进展 | 第13页 |
·蕨类植物的综合利用价值 | 第13-17页 |
·中华水韭 | 第17-20页 |
·超氧化物歧化酶概述 | 第20-33页 |
·超氧化物歧化酶的发现 | 第20-21页 |
·超氧化物歧化酶的种类和分布 | 第21-23页 |
·超氧化物歧化酶的分子生物学研究进展 | 第23-27页 |
·超氧化物歧化酶的应用 | 第27-29页 |
·铁超氧化物歧化酶(Fe-SOD) | 第29-33页 |
·植物中SOD基因工程进展 | 第33-36页 |
·本论文的研究目的和意义 | 第36-38页 |
2 材料和方法 | 第38-56页 |
·材料 | 第38-42页 |
·本实验采用的蕨类 | 第38页 |
·本实验采用的质粒 | 第38页 |
·本实验采用的菌株 | 第38-39页 |
·本实验构建的质粒 | 第39页 |
·本实验所用酶 | 第39页 |
·本实验所用试剂及酶 | 第39-41页 |
·本实验所用仪器设备 | 第41-42页 |
·方法 | 第42-56页 |
·中华水韭的培养 | 第42页 |
·中华水韭总RNA的提取 | 第42-43页 |
·保守片段cDNA序列的获得 | 第43-46页 |
·RACE获得全长cDNA序列 | 第46-53页 |
·目的基因在大肠杆菌中的表达 | 第53-54页 |
·SDS-PAGE检测 | 第54页 |
·Westernblot鉴定 | 第54-56页 |
3 结果与分析 | 第56-66页 |
·中华水韭的培养 | 第56页 |
·中华水韭总RNA的提取 | 第56-57页 |
·中华水韭IsFeSOD基因核心片段的获得 | 第57-58页 |
·PCR扩增IsFeSOD基因核心片段 | 第57-58页 |
·T5-SOD载体的构建及同源性分析 | 第58页 |
·RACE获得全长cDNA序列 | 第58-60页 |
·PCR扩增IsFeSOD5’端 | 第58-59页 |
·PCR扩增IsFeSOD3’端 | 第59-60页 |
·Fe-SOD全长cDNA序列的获得 | 第60页 |
·pET32a-Fe-SOD载体的构建 | 第60-61页 |
·生物信息学分析 | 第61-64页 |
·IsFeSOD基因全长测序结果与分析 | 第61-63页 |
·中华水韭IsFeSOD基因与其它植物Fe-SOD氨基酸序列的多序列比对 | 第63-64页 |
·pET32a-FeSOD基因在大肠杆菌中的表达及纯化 | 第64-65页 |
·pET32a-FeSOD重组蛋白的Westernblot分析与验证 | 第65-66页 |
4 讨论 | 第66-70页 |
·Fe-SOD基因的分布与进化 | 第66-70页 |
5 总结与展望 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-83页 |
致谢 | 第83-85页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第85页 |