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中华水韭铁超氧化物歧化酶基因的(IsFeSOD)克隆与分析

中文摘要第1-8页
Abstract第8-12页
1 前言第12-38页
   ·蕨类植物概述第12-20页
     ·蕨类植物在植物界的系统位置与分布第12-13页
     ·蕨类植物分子生物学研究进展第13页
     ·蕨类植物的综合利用价值第13-17页
     ·中华水韭第17-20页
   ·超氧化物歧化酶概述第20-33页
     ·超氧化物歧化酶的发现第20-21页
     ·超氧化物歧化酶的种类和分布第21-23页
     ·超氧化物歧化酶的分子生物学研究进展第23-27页
     ·超氧化物歧化酶的应用第27-29页
     ·铁超氧化物歧化酶(Fe-SOD)第29-33页
   ·植物中SOD基因工程进展第33-36页
   ·本论文的研究目的和意义第36-38页
2 材料和方法第38-56页
   ·材料第38-42页
     ·本实验采用的蕨类第38页
     ·本实验采用的质粒第38页
     ·本实验采用的菌株第38-39页
     ·本实验构建的质粒第39页
     ·本实验所用酶第39页
     ·本实验所用试剂及酶第39-41页
     ·本实验所用仪器设备第41-42页
   ·方法第42-56页
     ·中华水韭的培养第42页
     ·中华水韭总RNA的提取第42-43页
     ·保守片段cDNA序列的获得第43-46页
     ·RACE获得全长cDNA序列第46-53页
     ·目的基因在大肠杆菌中的表达第53-54页
     ·SDS-PAGE检测第54页
     ·Westernblot鉴定第54-56页
3 结果与分析第56-66页
   ·中华水韭的培养第56页
   ·中华水韭总RNA的提取第56-57页
   ·中华水韭IsFeSOD基因核心片段的获得第57-58页
     ·PCR扩增IsFeSOD基因核心片段第57-58页
     ·T5-SOD载体的构建及同源性分析第58页
   ·RACE获得全长cDNA序列第58-60页
     ·PCR扩增IsFeSOD5’端第58-59页
     ·PCR扩增IsFeSOD3’端第59-60页
     ·Fe-SOD全长cDNA序列的获得第60页
   ·pET32a-Fe-SOD载体的构建第60-61页
   ·生物信息学分析第61-64页
     ·IsFeSOD基因全长测序结果与分析第61-63页
     ·中华水韭IsFeSOD基因与其它植物Fe-SOD氨基酸序列的多序列比对第63-64页
   ·pET32a-FeSOD基因在大肠杆菌中的表达及纯化第64-65页
   ·pET32a-FeSOD重组蛋白的Westernblot分析与验证第65-66页
4 讨论第66-70页
   ·Fe-SOD基因的分布与进化第66-70页
5 总结与展望第70-72页
参考文献第72-83页
致谢第83-85页
攻读学位期间的研究成果第85页

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