| 学位论文数据集 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-25页 |
| ·β-胡萝卜素的结构与性质 | 第11页 |
| ·β-胡萝卜素的代谢、生理功能 | 第11-12页 |
| ·β-胡萝卜素的应用及发展前景 | 第12-13页 |
| ·β-胡萝卜素在 S. cerevisiae 中合成途径 | 第13-16页 |
| ·中间体 IPP 的合成途径 | 第13-14页 |
| ·中间体 GGPP 的合成途径 | 第14-15页 |
| ·GGPP 合成β-胡萝卜素途径 | 第15-16页 |
| ·β-胡萝卜素生产与合成调控 | 第16-18页 |
| ·天然物萃取法 | 第16页 |
| ·化学合成法 | 第16-17页 |
| ·野生菌株微生物发酵法 | 第17页 |
| ·微生物合成β-胡萝卜素调控 | 第17-18页 |
| ·发酵水平调控 | 第17-18页 |
| ·代谢水平调控 | 第18页 |
| ·基因工程法生产β-胡萝卜素研究进展 | 第18-20页 |
| ·微生物基因工程法合成β-胡萝卜素 | 第19-20页 |
| ·植物基因工程法合成β-胡萝卜素 | 第20页 |
| ·外源基因表达对酿酒酵母甲羟戊酸途径的影响 | 第20-21页 |
| ·论文的选题意义和主要研究内容 | 第21-25页 |
| ·论文的选题意义 | 第21-22页 |
| ·主要研究内容 | 第22页 |
| ·研究方案 | 第22-25页 |
| 第二章 温度及 pH 对重组葡萄酒酵母合成β-胡萝卜素的影响 | 第25-43页 |
| ·实验材料及仪器 | 第25-26页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·实验仪器 | 第26页 |
| ·实验菌种与培养基 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-29页 |
| ·菌种培养 | 第27页 |
| ·细胞生物量和还原糖测定 | 第27页 |
| ·β-胡萝卜素提取及含量测定 | 第27页 |
| ·过氧化氢酶活性测定 | 第27-28页 |
| ·超氧化物歧化酶（SOD）酶活性测定 | 第28-29页 |
| ·细胞中总蛋白测定 | 第29页 |
| ·动力学参数计算 | 第29页 |
| ·标准曲线 | 第29-32页 |
| ·β-胡萝卜素标准曲线 | 第29-30页 |
| ·细胞干重标准曲线 | 第30-31页 |
| ·蛋白含量标准曲线 | 第31-32页 |
| ·结果与讨论 | 第32-41页 |
| ·温度对重组葡萄酒酵母合成β-胡萝卜素的影响 | 第32-36页 |
| ·pH 对重组葡萄酒酵母合成β-胡萝卜素的影响 | 第36-41页 |
| ·结论 | 第41-43页 |
| 第三章 外源β-胡萝卜素基因表达对酿酒酵母甲羟戊酸途径中关键酶的影响 | 第43-68页 |
| ·实验材料及仪器 | 第43-44页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·实验仪器 | 第44页 |
| ·实验菌种与培养基 | 第44-45页 |
| ·菌种培养 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-53页 |
| ·质粒提取 | 第45-46页 |
| ·目的片断凝胶回收 | 第46页 |
| ·转化到 DH5α大肠杆菌感受态细胞 | 第46-47页 |
| ·酵母感受态的制备 | 第47页 |
| ·共转化 | 第47页 |
| ·酵母基因组 DNA 的提取 | 第47-49页 |
| ·细胞生物量测定 | 第49页 |
| ·发酵液中乙醇、乙酸、甘油、葡糖糖测定 | 第49页 |
| ·β-胡萝卜素、番茄红素及总色素提取及含量测定 | 第49-50页 |
| ·麦角固醇提取测定 | 第50页 |
| ·RNA 提取 | 第50-51页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测所提取 RNA 的质量 | 第51页 |
| ·cDNA 的合成 | 第51-52页 |
| ·用于 Real Time PCR 的引物设计 | 第52-53页 |
| ·Real Time PCR 检测基因表达 | 第53页 |
| ·标准曲线 | 第53-55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-66页 |
| ·空质粒构建 | 第55-58页 |
| ·YIplac211YB/I/E*质粒提取 | 第55页 |
| ·HindⅢ酶切 YIplac211YB/I/E*质粒 | 第55-56页 |
| ·目的片段回收和连接反应 | 第56-57页 |
| ·转化 DH5α大肠杆菌感受态细胞和酶切线性化 | 第57-58页 |
| ·转化酵母感受态及阳性克隆鉴定 | 第58页 |
| ·β-胡萝卜素基因表达对酿酒酵母甲羟戊酸途径影响 | 第58-66页 |
| ·发酵液中碳源含量分析 | 第60页 |
| ·酿酒酵母类胡萝卜素和麦角固醇含量分析 | 第60-61页 |
| ·酿酒酵母 RNA 提取纯化 | 第61-62页 |
| ·引物特异性检测 | 第62-66页 |
| ·基因表达相对定量分析计算 | 第66页 |
| ·结论 | 第66-68页 |
| 第四章 全文总结及展望 | 第68-70页 |
| ·结论 | 第68页 |
| ·展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第72-73页 |
| 作者及导师简介 | 第73-74页 |
| 硕士研究生学位论文答辩委员会决议书 | 第74-75页 |
