| 中文摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 符号说明 | 第15-19页 |
| 第一部分 牛蒡寡糖脂质体的制备和鉴定 | 第19-51页 |
| 第一章 前言 | 第19-35页 |
| ·脂质体简介 | 第19-23页 |
| ·脂质体的结构和形成机理 | 第19-21页 |
| ·脂质体的特点和分类 | 第21-22页 |
| ·脂质体的作用机制 | 第22-23页 |
| ·脂质体的研究进展 | 第23-30页 |
| ·脂质体制备方法的研究进展 | 第23-25页 |
| ·新型脂质体 | 第25-27页 |
| ·脂质体的应用 | 第27-30页 |
| ·脂质体的质量评价 | 第30-32页 |
| ·脂质体的物理性质 | 第30-32页 |
| ·脂质体的稳定性 | 第32页 |
| ·展望 | 第32-33页 |
| ·牛蒡寡糖及其研究进展 | 第33-34页 |
| ·选题的依据及研究内容 | 第34-35页 |
| 第二章 实验器材和材料 | 第35页 |
| ·实验器材 | 第35页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| 第三章 实验方法 | 第35-40页 |
| ·牛蒡寡糖含量的测定 | 第35-37页 |
| ·测定波长的确定 | 第36页 |
| ·标准曲线的制作 | 第36页 |
| ·回收率和精密度试验 | 第36页 |
| ·换算因子的计算 | 第36页 |
| ·超滤-分光光度法测定包封率的可行性分析实验 | 第36-37页 |
| ·牛蒡寡糖脂质体的制备和条件优化 | 第37-39页 |
| ·制备工艺的选择优化 | 第37-38页 |
| ·脂质体制备条件优化 | 第38页 |
| ·高压均质条件的优化 | 第38-39页 |
| ·牛蒡寡糖脂质体的理化性质研究 | 第39-40页 |
| ·牛蒡寡糖脂质体的形态观察 | 第39页 |
| ·Zeta电势测定 | 第39页 |
| ·脂质体粒径与粒度分布研究 | 第39页 |
| ·脂质体稳定性研究实验 | 第39-40页 |
| 第四章 实验结果和讨论 | 第40-50页 |
| ·实验结果 | 第40-47页 |
| ·标准曲线的制作 | 第40-42页 |
| ·牛蒡寡糖脂质体的制备和条件优化 | 第42-45页 |
| ·牛蒡寡糖脂质体的理化性质研究 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-50页 |
| ·牛蒡寡糖脂质体制备可行性的理论讨论 | 第47-48页 |
| ·牛蒡寡糖脂质体制备方法选择 | 第48页 |
| ·制备条件的筛选 | 第48-49页 |
| ·包封率测定方法的选择 | 第49页 |
| ·脂质体的稳定性讨论 | 第49-50页 |
| 第五章 小结 | 第50页 |
| 第六章 存在的问题和建议 | 第50-51页 |
| 第二部分 肿瘤相关人α-1,6岩藻糖基转移酶的初步研究 | 第51-107页 |
| 第一章 前言 | 第51-71页 |
| ·糖基转移酶介绍 | 第51-55页 |
| ·糖基转移酶的分类及机理 | 第51-52页 |
| ·糖基转移酶的结构和功能 | 第52-54页 |
| ·糖基转移酶的学术趋势 | 第54-55页 |
| ·α-1,6岩藻糖基转移酶介绍 | 第55-65页 |
| ·人α-1,6 FucT基因(FUT8) | 第56-58页 |
| ·α-1,6 FucT蛋白的结构特点 | 第58-61页 |
| ·α-1,6 FucT的底物 | 第61页 |
| ·α-1,6 FucT的研究现状 | 第61-65页 |
| ·常见的表达系统介绍 | 第65-70页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第66-68页 |
| ·毕赤酵母表达体系 | 第68-69页 |
| ·试剂盒体外表达系统 | 第69-70页 |
| ·选题的依据及研究内容 | 第70-71页 |
| 第二章 实验材料与仪器 | 第71-77页 |
| ·实验材料 | 第71-74页 |
| ·实验所用动物、细胞、载体和菌株 | 第71页 |
| ·培养基和溶液 | 第71-74页 |
| ·实验所用试剂与耗材 | 第74-75页 |
| ·实验仪器 | 第75-77页 |
| 第三章 实验方法 | 第77-95页 |
| ·MKN-45细胞系的复苏、培养及冻存 | 第77页 |
| ·细胞总RNA的提取与检测 | 第77-79页 |
| ·Biozol法提取总RNA | 第77-78页 |
| ·琼糖凝胶电泳检测总RNA | 第78-79页 |
| ·FUT8 DNA的克隆与鉴定 | 第79-80页 |
| ·引物设计 | 第79页 |
| ·mRNA的逆转录 | 第79-80页 |
| ·FUT8在大肠杆菌中的表达与多抗制备 | 第80-88页 |
| ·全长FUT8基因的克隆 | 第80页 |
| ·FUT8与pEASY-T1载体的连接及大肠杆菌的转化 | 第80-81页 |
| ·pEASY-T1-FUT8重组质粒的筛选和鉴定 | 第81页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第81-84页 |
| ·FUT8在大肠杆菌DE3和Rosetta中诱导表达及条件优化 | 第84-85页 |
| ·包涵体的大量制备及纯化 | 第85-86页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第86-87页 |
| ·多抗性质鉴定 | 第87-88页 |
| ·FUT8在巴斯德毕赤氏酵母中的表达 | 第88-93页 |
| ·目的基因的扩增 | 第88-89页 |
| ·pPIC9K质粒的提取 | 第89页 |
| ·pPIC9K-FUT 8重组质粒的构建 | 第89-90页 |
| ·重组质粒线性化 | 第90页 |
| ·毕赤酵母电转化感受态细胞的制备 | 第90-91页 |
| ·毕赤酵母的电转化 | 第91页 |
| ·毕赤酵母重组转化子的筛选 | 第91-92页 |
| ·重组毕赤酵母菌株的表达 | 第92页 |
| ·发酵液的浓缩处理 | 第92-93页 |
| ·Western-Blot检测目的蛋白的表达 | 第93页 |
| ·FUT8的体外表达 | 第93-95页 |
| ·重组质粒处理 | 第93页 |
| ·重组质粒的体外转录和翻译 | 第93-94页 |
| ·SDS-PAGE和Western Blot分析 | 第94-95页 |
| 第四章 结果与讨论 | 第95-106页 |
| ·实验结果 | 第95-104页 |
| ·总RNA提取后电泳及其浓度计算结果 | 第95-96页 |
| ·FUT8和sFUT8的克隆与鉴定 | 第96页 |
| ·FUT8在大肠杆菌中的表达与多抗制备 | 第96-100页 |
| ·FUT8在巴斯德毕赤氏酵母中的表达 | 第100-103页 |
| ·FUT8的体外表达及Western-Blot检测 | 第103-104页 |
| ·讨论 | 第104-106页 |
| ·sFUT8基因片段的选择与原核表达的构想 | 第104页 |
| ·原核表达E coli菌株的选择 | 第104页 |
| ·原核表达形成包涵体的原因分析 | 第104-105页 |
| ·小鼠免疫与多抗的产生 | 第105-106页 |
| 第五章 小结 | 第106页 |
| 第六章 存在的问题和建议 | 第106-107页 |
| 附录 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 攻读学位期间将要和参与发表的学术论文 | 第122-123页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第123页 |
