| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-35页 |
| ·乳腺癌及其治疗现状 | 第12-14页 |
| ·乳腺癌发病机制 | 第12-13页 |
| ·乳腺癌临床治疗手段 | 第13-14页 |
| ·RNA干扰现象 | 第14-16页 |
| ·siRNA与癌症治疗 | 第16-20页 |
| ·siRNA的应用 | 第16-17页 |
| ·siRNA在癌症治疗中的应用 | 第17-20页 |
| ·治疗癌症的siRNA输送系统 | 第20-24页 |
| ·化学修饰的siRNA给药体系 | 第21页 |
| ·脂质类的siRNA给药体系 | 第21-22页 |
| ·聚合物类的siRNA给药体系 | 第22-23页 |
| ·键合和靶向输送siRNA的给药体系 | 第23-24页 |
| ·物理方法输送siRNA的给药体系 | 第24页 |
| ·Her2与乳腺癌治疗 | 第24-28页 |
| ·Her2的生物学效应 | 第24-25页 |
| ·Her2抑制剂 | 第25-26页 |
| ·以Her2为导向的乳腺癌治疗 | 第26-28页 |
| ·本论文的选题目的及主要研究内容 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-35页 |
| 第二章 Her2单链片段抗体及融合蛋白的表达和纯化 | 第35-53页 |
| ·引言 | 第35-36页 |
| ·实验部分 | 第36-42页 |
| ·主要材料 | 第36页 |
| ·主要药品及溶液配制 | 第36-37页 |
| ·pET28a-Her2 ScFv-protamine表达载体的构建和蛋白纯化 | 第37-40页 |
| ·pET28a-Her2 ScFv-cys表达载体的构建和蛋白纯化 | 第40-42页 |
| ·结果与讨论 | 第42-51页 |
| ·F5-P的表达和纯化 | 第42-46页 |
| ·F5-cys的表达和纯化 | 第46-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-53页 |
| 第三章 Her2 ScFv融合蛋白靶向输送siRNA用于Her2阳性乳腺癌的治疗 | 第53-79页 |
| ·引言 | 第53-54页 |
| ·实验部分 | 第54-64页 |
| ·主要药品及溶液配制 | 第54-55页 |
| ·细胞培养 | 第55-56页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检验F5-P融合蛋白结合siRNA的能力 | 第56页 |
| ·F5-P融合蛋白输送siRNA到Her2阳性乳腺癌细胞 | 第56页 |
| ·F5-P融合蛋白输送siDNMTs对DNMTs mRNA表达的影响 | 第56-58页 |
| ·F5-P融合蛋白输送siDNMTs对DNMTs蛋白表达的影响 | 第58-60页 |
| ·F5-P融合蛋白输送siDNMTs对RASSF1A甲基化的影响 | 第60-61页 |
| ·F5-P融合蛋白输送siDNMTs对乳腺癌细胞增殖的影响 | 第61页 |
| ·原位肿瘤模型建立 | 第61-62页 |
| ·F5-P融合蛋白在荷瘤裸鼠体内的分布 | 第62页 |
| ·F5-P融合蛋白输送siDNMTs抑制小鼠原位乳腺癌的生长 | 第62页 |
| ·肿瘤组织中的DNMTs表达水平和RASSF1A甲基化的检测 | 第62页 |
| ·免疫组织化学染色检测乳腺癌原位肿瘤细胞凋亡和增殖 | 第62-64页 |
| ·结果与讨论 | 第64-75页 |
| ·F5-P融合蛋白结合siRNA | 第64页 |
| ·F5-P融合蛋白将siRNA靶向输送到Her2阳性乳腺癌 | 第64-67页 |
| ·F5-P融合蛋白输送siDNMTs下调靶基因的表达并抑制RASSF1A甲基化 | 第67-69页 |
| ·F5-P融合蛋白输送siDNMTs抑制细胞增殖 | 第69-70页 |
| ·F5-P融合蛋白输送siDNMTs抑制乳腺癌的生长 | 第70-75页 |
| ·本章小结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-79页 |
| 第四章 Her2靶向纳米颗粒输送PLK1-siRNA用于乳腺癌治疗的研究 | 第79-108页 |
| ·引言 | 第79-80页 |
| ·实验部分 | 第80-88页 |
| ·原料及试剂 | 第80-81页 |
| ·Mal-PEG-PLA纳米颗粒的制备 | 第81页 |
| ·Her2靶向纳米颗粒的制备 | 第81-82页 |
| ·细胞培养 | 第82页 |
| ·靶向纳米颗粒与Her2亲和力的检测 | 第82页 |
| ·纳米颗粒包载的siRNA生物学活性检测 | 第82-83页 |
| ·细胞对靶向纳米颗粒的摄取 | 第83-84页 |
| ·MTT实验检测包载siPLK1靶向纳米颗粒的生物相容性 | 第84-85页 |
| ·靶向纳米颗粒输送siPLK1对PLK1 mRNA表达的影响 | 第85-86页 |
| ·靶向纳米颗粒输送siPLK1对PLK1蛋白表达的影响 | 第86页 |
| ·靶向纳米颗粒输送siPLK1对癌细胞凋亡的影响 | 第86-87页 |
| ·靶向纳米颗粒输送siPLK1对癌细胞增殖的影响 | 第87页 |
| ·原位肿瘤模型建立 | 第87页 |
| ·靶向纳米颗粒在荷瘤裸鼠体内的分布 | 第87页 |
| ·靶向纳米颗粒输送siPLK1抑制小鼠原位乳腺癌的生长 | 第87-88页 |
| ·肿瘤组织中的PLK1表达水平检测 | 第88页 |
| ·免疫组织化学染色检测乳腺癌原位肿瘤细胞凋亡和增殖 | 第88页 |
| ·结果与讨论 | 第88-104页 |
| ·靶向纳米颗粒的制备和表征 | 第88-90页 |
| ·乳腺癌细胞的Her2和PLK1表达 | 第90页 |
| ·靶细胞Her2受体与靶向纳米颗粒的亲和能力 | 第90-91页 |
| ·包载在纳米颗粒中的siRNA具有良好的生物学活性 | 第91-92页 |
| ·靶向纳米颗粒高效特异输送siRNA到Her2阳性乳腺癌细胞 | 第92-94页 |
| ·包载siPLK1的靶向纳米颗粒下调靶基因表达 | 第94-96页 |
| ·T-NP_(siPLK1)沉默靶基因表达更有效抑制Her2阳性乳腺癌细胞增殖 | 第96-99页 |
| ·T-NP_(siPLK1)更有效诱导Her2阳性乳腺癌细胞凋亡 | 第99-101页 |
| ·T-NP_(siPLK1)沉默PLK1基因表达而促进对Her2阳性乳腺癌生长的抑制 | 第101-104页 |
| ·本章小结 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-108页 |
| 附录一 Her2靶向蛋白的DNA序列 | 第108-110页 |
| 附录二 实验仪器 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 在读期间发表的学术论文和取得的研究成果 | 第112-113页 |
