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C57BL/6J小鼠肝脏不同细胞类群的分选及肝细胞蛋白质表达谱构建

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 文献综述:小鼠肝脏蛋白质组学的研究进展第13-40页
   ·引言第13-16页
   ·小鼠肝脏组织水平的蛋白质组学研究第16-19页
     ·小鼠肝脏组织的蛋白质组学研究第16-18页
     ·小鼠肝脏组织间隙液的蛋白质组学研究第18-19页
   ·小鼠肝脏亚细胞水平的蛋白质组学研究第19-26页
     ·小鼠肝脏线粒体蛋白质组学研究第20-22页
     ·小鼠肝脏内质网蛋白质组学研究第22页
     ·小鼠肝脏细胞质膜蛋白质组学研究第22-24页
     ·小鼠肝脏过氧化物酶体蛋白质组学研究第24-25页
     ·小鼠肝脏微粒体蛋白质组学研究第25页
     ·小鼠肝脏中蛋白复合体的蛋白质组学研究第25-26页
   ·小鼠肝脏细胞水平的蛋白质组学研究第26-27页
     ·小鼠肝脏实质细胞蛋白质组学研究第26-27页
     ·小鼠肝脏干细胞/祖细胞蛋白质组学研究第27页
   ·疾病模型小鼠肝脏的蛋白质组学研究第27-35页
     ·肥胖小鼠肝脏蛋白质组学研究第27-28页
     ·脂肪肝小鼠蛋白质组学研究第28-29页
     ·肝炎病毒感染小鼠肝脏蛋白质组学研究第29-30页
     ·衰老小鼠肝脏蛋白质组学研究第30-32页
     ·药物/毒素对小鼠肝脏影响蛋白质组研究第32-34页
     ·转基因小鼠模型的蛋白质组研究第34-35页
   ·小鼠肝脏蛋白质修饰谱和相互作用组研究第35-39页
     ·肝脏磷酸化蛋白质组学研究第35-37页
     ·肝脏糖蛋白质组学研究第37-38页
     ·肝脏蛋白相互作用组学研究第38-39页
   ·结语第39页
   ·本研究的目的和意义第39-40页
第二章 小鼠肝脏原位灌流法建立及肝细胞分选第40-49页
   ·材料与方法第41-43页
     ·材料第41-42页
     ·方法第42-43页
   ·结果与分析第43-45页
     ·小鼠肝脏在体原位循环灌流体系的建立第43页
     ·小鼠肝细胞的得率及存活率第43-44页
     ·小鼠肝细胞的形态观察第44页
     ·小鼠肝细胞的纯度检测结果第44-45页
   ·讨论第45-48页
   ·小结第48-49页
第三章 肝脏非实质细胞分选方法的初步建立第49-62页
   ·材料与方法第50-51页
     ·材料第50-51页
   ·方法第51-54页
     ·小鼠肝细胞分离纯化第51-52页
     ·Nycodenz?密度梯度细胞分离液分选小鼠肝脏非实质细胞第52页
     ·PercollTM 淋巴细胞分离液分选肝脏非实质细胞第52页
     ·OptiPrepTM 细胞密度梯度分离液分选肝脏非实质细胞第52页
     ·流式细胞术检测肝脏非实质细胞纯度第52-53页
     ·免疫磁珠法分离肝脏血窦内皮细胞第53页
     ·Moflo 高速流式细胞分选仪分选肝脏非实质细胞第53页
     ·肝脏非实质细胞活性检测与得率计算第53-54页
     ·细胞冻存第54页
   ·结果与分析第54-60页
     ·密度梯度法纯化小鼠肝脏非实质细胞的纯度第54-57页
     ·免疫磁珠法分选小鼠肝脏血窦内皮细胞第57页
     ·Moflo 高速流式细胞分选仪分选的肝脏非实质细胞第57-59页
     ·比较不同细胞分选方法所得细胞的活性和细胞得率第59-60页
   ·讨论第60-61页
   ·小结第61-62页
第四章 C57BL/6J 小鼠肝细胞蛋白质表达谱的构建与分析第62-92页
   ·材料第63-65页
     ·实验动物第63页
     ·试剂第63页
     ·常规溶液配制第63-64页
     ·仪器第64-65页
   ·方法第65-69页
     ·总体技术路线第65页
     ·C57 小鼠肝细胞的提取第65页
     ·C57 小鼠肝细胞蛋白质样品制备第65-66页
     ·C57 小鼠肝细胞蛋白SDS-PAGE 分离第66页
     ·SDS-PAGE 分离的肝细胞蛋白质胶内酶切肽段提取及质谱鉴定第66-67页
     ·C57 小鼠肝细胞全蛋白质溶液酶切及其质谱鉴定第67-68页
     ·质谱数据的搜库和数据过滤标准的确定第68页
     ·小鼠肝细胞表达谱数据的生物信息学分析第68-69页
   ·结果与分析第69-88页
     ·不同技术路线鉴定小鼠肝细胞蛋白质的结果第69页
       ·不同技术路线所鉴定蛋白质和特异肽段的重叠度分析第69-71页
     ·不同技术路线所鉴定蛋白的理化性质第71-72页
     ·代谢类蛋白质分子的鉴定第72-78页
     ·小鼠肝细胞中鉴定到的新蛋白第78-80页
     ·小鼠肝细胞蛋白质表达谱中所鉴定的 CYP第80-84页
     ·小鼠肝细胞与肝脏组织水平的蛋白质表达谱数据的比较分析第84-86页
     ·C57 小鼠肝细胞蛋白质的亚细胞定位比较分析第86-88页
   ·讨论第88-91页
   ·小结第91-92页
结论第92-93页
参考文献第93-107页
附录1第107-115页
附录2第115-202页
英文缩写词对照表第202-203页
致谢第203-204页
作者简历第204页

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