摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
第一章 SOCS 在生命机体中的作用研究 | 第13-18页 |
·SOCS 家族概述 | 第14-16页 |
·SOCS 结构 | 第14-15页 |
·SOCS 合成与降解 | 第15页 |
·SOCS 在代谢中的作用 | 第15页 |
·SOCS 在免疫系统中的作用 | 第15页 |
·SOCS 与糖尿病 | 第15-16页 |
·SOCS3 信号通路作用机制 | 第16-18页 |
第二章 细胞凋亡机制研究进展 | 第18-22页 |
·细胞凋亡的特征 | 第18页 |
·分子机制 | 第18-20页 |
·凋亡相关的基因和蛋白 | 第18-19页 |
·信号途径 | 第19-20页 |
·其它凋亡因素 | 第20页 |
·检测方法 | 第20-21页 |
·ELISA 法 | 第20页 |
·原位末端转移酶标记技术 | 第20-21页 |
·DNA 电泳 | 第21页 |
·流式细胞分析 | 第21页 |
·透射电镜检测 | 第21页 |
·生物传感器检测 | 第21页 |
·展望 | 第21-22页 |
第三章 PEGFP-N1-SOCS3 载体构建 | 第22-28页 |
·材料与方法 | 第22-25页 |
·材料 | 第22页 |
·RNA 提取(Trizol) | 第22-23页 |
·反转录 | 第23页 |
·PCR 扩增 | 第23-24页 |
·克隆产物的鉴定 | 第24页 |
·感受态细胞制备及转染 | 第24-25页 |
·结果与分析 | 第25-26页 |
·脂肪组织提取RNA 的完整性检测结果 | 第25页 |
·RT-PCR 结果检测 β-actin 及 SOCS3 扩增产物的鉴定 | 第25页 |
·重组质粒的鉴定 | 第25-26页 |
·讨论 | 第26-28页 |
第四章 SOCS3 生物信息学分析 | 第28-34页 |
·方法 | 第28页 |
·SOCS3 理化性质分析 | 第28页 |
·SOCS3 蛋白的信号肽分析 | 第28页 |
·SOCS3 蛋白的细胞定位分析 | 第28页 |
·SOCS3 蛋白结构分析 | 第28页 |
·结果 | 第28-32页 |
·SOCS3 理化性质分析结果 | 第28-29页 |
·SOCS3 蛋白的信号肽分析结果 | 第29-30页 |
·SOCS3 蛋白的细胞定位分析结果 | 第30页 |
·SOCS3 蛋白结构分析结果 | 第30-32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
第五章 pEGFP-N1-SOCS3 对3T3-L1 细胞凋亡的影响 | 第34-43页 |
·材料与方法 | 第34-38页 |
·材料、试剂、仪器 | 第34-35页 |
·细胞培养及转染 | 第35页 |
·转染重组质粒的3T3-L1 脂肪细胞GFP 表达的观察 | 第35页 |
·Hoechst 33258 染色 | 第35页 |
·RT-PCR 检测相关基因的表达 | 第35-36页 |
·蛋白的提取以及表达分析 | 第36-38页 |
·检测3T3-L1 细胞系中SOCS3 mRNA 和SOCS3 蛋白表达 | 第38页 |
·凋亡相关基因Bax 和c-myc 和bcl-2 和mcl-1 基因的表达 | 第38页 |
·结果与分析 | 第38-41页 |
·重组质粒pEGFP-N1-SOCS3 转染3T3-L1 细胞GFP 表达的观察 | 第38页 |
·重组质粒pEGFP-N1-SOCS3 转染3T3-L1 细胞中SOCS3 mRNA 和蛋白表达检测 | 第38-40页 |
·SOCS3 对3T3-L1 细胞凋亡的观察 | 第40页 |
·凋亡相关基因Bax、c-myc 和bcl-2、mcl-1 基因的表达 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
第六章 pEGFP-N1-SOCS3 对小鼠前体脂肪细胞凋亡的影响 | 第43-50页 |
·材料与方法 | 第43-45页 |
·材料、试剂、仪器 | 第43页 |
·实验动物 | 第43页 |
·细胞培养及转染 | 第43页 |
·转染重组质粒的前体脂肪细胞GFP 表达的观察 | 第43页 |
·RT-PCR 检测相关基因的表达 | 第43-44页 |
·蛋白的提取以及表达分析 | 第44页 |
·检测前体脂肪细胞细胞系中SOCS3 mRNA 和SOCS3 蛋白表达 | 第44-45页 |
·凋亡相关基因Bax、c-myc、survivin 以及bcl-2、mcl-1 和NF-κB 基因的表达 | 第45页 |
·SOCS3 对JAK2、STAT3 的影响 | 第45页 |
·SOCS3 超表达对SOCS2 表达的影响 | 第45页 |
·结果与分析 | 第45-48页 |
·重组质粒pEGFP-N1-SOCS3 转染前体脂肪细胞GFP 表达的观察 | 第45-46页 |
·重组质粒pEGFP-N1-SOCS3 转染前体脂肪细胞中SOCS3 m RNA 和蛋白表达检测 | 第46页 |
·凋亡相关基因Bax、c-myc、survivin 以及bcl-2、mcl-1 和NF-κB 基因的表达 | 第46-47页 |
·重组载体pEGFP-N1-SOCS3 对JAK2、STAT3 表达的影响 | 第47页 |
·重组载体pEGFP-N1-SOCS3 对SOCS2 表达的影响 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
结论 | 第50页 |
本试验研究的创新点 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简介 | 第57页 |