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飞蝗细胞色素P450基因的分子特性及功能研究

中文摘要第1-16页
ABSTRACT第16-21页
第一章 前言第21-43页
   ·细胞色素P450与细胞色素P450酶系第21-24页
     ·细胞色素P450第21页
     ·细胞色素P450酶系第21-22页
     ·细胞色素P450的命名第22-23页
     ·细胞色素P450的结构特征第23-24页
   ·昆虫细胞色素P450的多样性及其进化第24-27页
     ·种类的多样性第24-26页
     ·分布的多样性第26页
     ·催化反应的多样性第26页
     ·细胞色素P450的进化第26-27页
   ·昆虫细胞色素P450基因的功能第27-34页
     ·内源物质的代谢第28-30页
     ·外源物质的代谢第30-34页
   ·昆虫细胞色素P450基因的表达与诱导第34-35页
     ·昆虫细胞色素P450基因的表达特性第34页
     ·昆虫细胞色素P450的诱导第34-35页
   ·昆虫细胞色素P450的研究方法第35-40页
     ·昆虫细胞色素P450基因的克隆策略第35-38页
     ·昆虫细胞色素P450的异源表达系统第38-40页
   ·飞蝗概述第40-42页
     ·飞蝗的分布与为害第40页
     ·飞蝗的研究进展第40-42页
   ·本研究的立题依据及主要研究内容第42-43页
第二章 飞蝗细胞色素P450基因EST序列的获得及其特性分析第43-59页
   ·研究材料第43-45页
     ·供试昆虫第43-44页
     ·主要试剂第44页
     ·主要仪器第44-45页
   ·研究方法第45-50页
     ·飞蝗EST数据库中细胞色素P450基因的搜索第45页
     ·飞蝗细胞色素P450基因PCR引物设计第45页
     ·RT-PCR分析细胞色素P450基因的表达特性第45-48页
     ·杀虫剂对飞蝗细胞色素P450的影响第48-50页
   ·结果与分析第50-56页
     ·飞蝗细胞色素P450基因片段的获得第50-52页
     ·基于RT-PCR的细胞色素P450基因的表达特性分析第52-53页
     ·杀虫剂对飞蝗细胞色素P450的影响第53-56页
   ·讨论第56-59页
第三章 飞蝗细胞色素P450基因克隆第59-82页
   ·研究材料第59-60页
     ·供试昆虫第59页
     ·主要试剂第59-60页
     ·主要仪器第60页
   ·研究方法第60-67页
     ·飞蝗细胞色素P450基因cDNA全长的获得第60-65页
     ·飞蝗细胞色素P450基因全长cDNA的验证第65-67页
     ·飞蝗细胞色素P450基因序列分析第67页
     ·飞蝗细胞色素P450的聚类分析第67页
   ·结果与分析第67-80页
     ·飞蝗细胞色素P450基因全长cDNA的获得及命名第67-68页
     ·飞蝗细胞色素P450基因cDNA序列的生物信息学分析第68-79页
     ·飞蝗细胞色素P450的聚类分析第79-80页
   ·讨论第80-82页
第四章 飞蝗细胞色素P450基因的发育和组织表达特异性第82-90页
   ·研究材料第82-83页
     ·供试昆虫第82页
     ·主要试剂第82页
     ·主要仪器第82-83页
   ·研究方法第83-85页
     ·飞蝗细胞色素P450基因Real-time PCR引物设计第83页
     ·飞蝗细胞色素P450基因在不同发育阶段的表达第83-84页
     ·飞蝗细胞色素P450基因在不同组织部位的表达第84-85页
   ·结果与分析第85-88页
     ·飞蝗细胞色素P450基因不同发育阶段的表达分析第85页
     ·飞蝗细胞色素P450基因不同组织部位的表达分析第85-88页
   ·讨论第88-90页
第五章 溴氰菊酯对飞蝗细胞色素P450基因的诱导表达第90-97页
   ·研究材料第90页
     ·供试昆虫第90页
     ·主要试剂第90页
     ·主要仪器第90页
   ·研究方法第90-92页
     ·实验材料的准备第90-91页
     ·总RNA的提取、纯化及cDNA第一链的合成第91页
     ·Real-time PCR分析溴氰菊酯对飞蝗细胞色素P450基因表达的影响第91页
     ·数据分析第91-92页
   ·结果与分析第92-95页
     ·不同浓度溴氰菊酯对飞蝗细胞色素P450基因的诱导表达第92页
     ·溴氰菊酯处理飞蝗不同时间后细胞色素P450基因的诱导表达第92-95页
   ·讨论第95-97页
第六章 飞蝗细胞色素P450基因的解毒功能分析第97-106页
   ·研究材料第97-98页
     ·供试昆虫第97页
     ·主要试剂第97-98页
     ·主要仪器第98页
   ·研究方法第98-101页
     ·飞蝗细胞色素P450基因dsRNA引物设计及体外合成第98-100页
     ·飞蝗细胞色素P450基因沉默效率及交叉干扰检测第100页
     ·细胞色素P450基因沉默后飞蝗对杀虫剂的敏感性分析第100-101页
   ·结果与分析第101-104页
     ·飞蝗细胞色素P450基因沉默效率及交叉干扰分析第101-102页
     ·细胞色素P450基因沉默后飞蝗对杀虫剂的敏感性分析第102-104页
   ·讨论第104-106页
第七章 飞蝗细胞色素P450基因的原核表达第106-114页
   ·研究材料第106-107页
     ·供试昆虫第106页
     ·主要试剂第106-107页
     ·主要仪器第107页
   ·研究方法第107-110页
     ·飞蝗CYP409A1和CYP408B1蛋白表达引物设计第107页
     ·PCR扩增及产物检测第107-108页
     ·PCR扩增产物的回收纯化第108页
     ·双酶切及连接反应第108-109页
     ·转化第109-110页
     ·重组质粒的表达第110页
     ·重组蛋白的诱导表达第110页
     ·表达产物的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测第110页
   ·结果与分析第110-112页
     ·飞蝗CYP409A1和CYP408B1蛋白全长表达验证第110-111页
     ·飞蝗CYP409A1和CYP408B1基因重组表达载体的检测第111页
     ·SDS-PAGE分析CYP409A1和CYP408B1在大肠杆菌中的表达第111-112页
   ·讨论第112-114页
全文总结第114-117页
参考文献第117-136页
攻读学位期间取得的研究成果第136-138页
致谢第138-139页
个人简况及联系方式第139-141页

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