中文摘要 | 第1-16页 |
ABSTRACT | 第16-21页 |
第一章 前言 | 第21-43页 |
·细胞色素P450与细胞色素P450酶系 | 第21-24页 |
·细胞色素P450 | 第21页 |
·细胞色素P450酶系 | 第21-22页 |
·细胞色素P450的命名 | 第22-23页 |
·细胞色素P450的结构特征 | 第23-24页 |
·昆虫细胞色素P450的多样性及其进化 | 第24-27页 |
·种类的多样性 | 第24-26页 |
·分布的多样性 | 第26页 |
·催化反应的多样性 | 第26页 |
·细胞色素P450的进化 | 第26-27页 |
·昆虫细胞色素P450基因的功能 | 第27-34页 |
·内源物质的代谢 | 第28-30页 |
·外源物质的代谢 | 第30-34页 |
·昆虫细胞色素P450基因的表达与诱导 | 第34-35页 |
·昆虫细胞色素P450基因的表达特性 | 第34页 |
·昆虫细胞色素P450的诱导 | 第34-35页 |
·昆虫细胞色素P450的研究方法 | 第35-40页 |
·昆虫细胞色素P450基因的克隆策略 | 第35-38页 |
·昆虫细胞色素P450的异源表达系统 | 第38-40页 |
·飞蝗概述 | 第40-42页 |
·飞蝗的分布与为害 | 第40页 |
·飞蝗的研究进展 | 第40-42页 |
·本研究的立题依据及主要研究内容 | 第42-43页 |
第二章 飞蝗细胞色素P450基因EST序列的获得及其特性分析 | 第43-59页 |
·研究材料 | 第43-45页 |
·供试昆虫 | 第43-44页 |
·主要试剂 | 第44页 |
·主要仪器 | 第44-45页 |
·研究方法 | 第45-50页 |
·飞蝗EST数据库中细胞色素P450基因的搜索 | 第45页 |
·飞蝗细胞色素P450基因PCR引物设计 | 第45页 |
·RT-PCR分析细胞色素P450基因的表达特性 | 第45-48页 |
·杀虫剂对飞蝗细胞色素P450的影响 | 第48-50页 |
·结果与分析 | 第50-56页 |
·飞蝗细胞色素P450基因片段的获得 | 第50-52页 |
·基于RT-PCR的细胞色素P450基因的表达特性分析 | 第52-53页 |
·杀虫剂对飞蝗细胞色素P450的影响 | 第53-56页 |
·讨论 | 第56-59页 |
第三章 飞蝗细胞色素P450基因克隆 | 第59-82页 |
·研究材料 | 第59-60页 |
·供试昆虫 | 第59页 |
·主要试剂 | 第59-60页 |
·主要仪器 | 第60页 |
·研究方法 | 第60-67页 |
·飞蝗细胞色素P450基因cDNA全长的获得 | 第60-65页 |
·飞蝗细胞色素P450基因全长cDNA的验证 | 第65-67页 |
·飞蝗细胞色素P450基因序列分析 | 第67页 |
·飞蝗细胞色素P450的聚类分析 | 第67页 |
·结果与分析 | 第67-80页 |
·飞蝗细胞色素P450基因全长cDNA的获得及命名 | 第67-68页 |
·飞蝗细胞色素P450基因cDNA序列的生物信息学分析 | 第68-79页 |
·飞蝗细胞色素P450的聚类分析 | 第79-80页 |
·讨论 | 第80-82页 |
第四章 飞蝗细胞色素P450基因的发育和组织表达特异性 | 第82-90页 |
·研究材料 | 第82-83页 |
·供试昆虫 | 第82页 |
·主要试剂 | 第82页 |
·主要仪器 | 第82-83页 |
·研究方法 | 第83-85页 |
·飞蝗细胞色素P450基因Real-time PCR引物设计 | 第83页 |
·飞蝗细胞色素P450基因在不同发育阶段的表达 | 第83-84页 |
·飞蝗细胞色素P450基因在不同组织部位的表达 | 第84-85页 |
·结果与分析 | 第85-88页 |
·飞蝗细胞色素P450基因不同发育阶段的表达分析 | 第85页 |
·飞蝗细胞色素P450基因不同组织部位的表达分析 | 第85-88页 |
·讨论 | 第88-90页 |
第五章 溴氰菊酯对飞蝗细胞色素P450基因的诱导表达 | 第90-97页 |
·研究材料 | 第90页 |
·供试昆虫 | 第90页 |
·主要试剂 | 第90页 |
·主要仪器 | 第90页 |
·研究方法 | 第90-92页 |
·实验材料的准备 | 第90-91页 |
·总RNA的提取、纯化及cDNA第一链的合成 | 第91页 |
·Real-time PCR分析溴氰菊酯对飞蝗细胞色素P450基因表达的影响 | 第91页 |
·数据分析 | 第91-92页 |
·结果与分析 | 第92-95页 |
·不同浓度溴氰菊酯对飞蝗细胞色素P450基因的诱导表达 | 第92页 |
·溴氰菊酯处理飞蝗不同时间后细胞色素P450基因的诱导表达 | 第92-95页 |
·讨论 | 第95-97页 |
第六章 飞蝗细胞色素P450基因的解毒功能分析 | 第97-106页 |
·研究材料 | 第97-98页 |
·供试昆虫 | 第97页 |
·主要试剂 | 第97-98页 |
·主要仪器 | 第98页 |
·研究方法 | 第98-101页 |
·飞蝗细胞色素P450基因dsRNA引物设计及体外合成 | 第98-100页 |
·飞蝗细胞色素P450基因沉默效率及交叉干扰检测 | 第100页 |
·细胞色素P450基因沉默后飞蝗对杀虫剂的敏感性分析 | 第100-101页 |
·结果与分析 | 第101-104页 |
·飞蝗细胞色素P450基因沉默效率及交叉干扰分析 | 第101-102页 |
·细胞色素P450基因沉默后飞蝗对杀虫剂的敏感性分析 | 第102-104页 |
·讨论 | 第104-106页 |
第七章 飞蝗细胞色素P450基因的原核表达 | 第106-114页 |
·研究材料 | 第106-107页 |
·供试昆虫 | 第106页 |
·主要试剂 | 第106-107页 |
·主要仪器 | 第107页 |
·研究方法 | 第107-110页 |
·飞蝗CYP409A1和CYP408B1蛋白表达引物设计 | 第107页 |
·PCR扩增及产物检测 | 第107-108页 |
·PCR扩增产物的回收纯化 | 第108页 |
·双酶切及连接反应 | 第108-109页 |
·转化 | 第109-110页 |
·重组质粒的表达 | 第110页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第110页 |
·表达产物的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测 | 第110页 |
·结果与分析 | 第110-112页 |
·飞蝗CYP409A1和CYP408B1蛋白全长表达验证 | 第110-111页 |
·飞蝗CYP409A1和CYP408B1基因重组表达载体的检测 | 第111页 |
·SDS-PAGE分析CYP409A1和CYP408B1在大肠杆菌中的表达 | 第111-112页 |
·讨论 | 第112-114页 |
全文总结 | 第114-117页 |
参考文献 | 第117-136页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第136-138页 |
致谢 | 第138-139页 |
个人简况及联系方式 | 第139-141页 |