摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-24页 |
·鸭病毒性肠炎研究进展 | 第9-17页 |
·DEV 的历史及分类地位 | 第9页 |
·DEV 的特点 | 第9-11页 |
·DEV 理化特点及生物学特性 | 第11-12页 |
·DVE 的流行病学 | 第12页 |
·DVE 的症状 | 第12-13页 |
·DVE 的诊断 | 第13-14页 |
·DVE 的防制 | 第14-15页 |
·DEV 分子生物学研究进展 | 第15-16页 |
·存在的问题与展望 | 第16-17页 |
·重组禽α疱疹病毒的研究进展 | 第17-24页 |
·禽α疱疹病毒的分子生物学特性 | 第17-18页 |
·重组禽α疱疹病毒的构建 | 第18-21页 |
·重组禽α疱疹病毒的应用 | 第21-23页 |
·展望 | 第23-24页 |
第二章 实验研究 | 第24-71页 |
实验一 鸭瘟病毒gH,TK 和UL24 基因的克隆和序列分析 | 第24-46页 |
·材料 | 第25页 |
·质粒载体、工程菌和试验毒株 | 第25页 |
·酶和其他试剂、器材 | 第25页 |
·鸡胚 | 第25页 |
·常用缓冲液及培养基配置 | 第25页 |
·方法 | 第25-31页 |
·CEF 制备 | 第25-26页 |
·DEV 病毒的繁殖 | 第26页 |
·病毒基因组的提取 | 第26页 |
·鸭瘟弱毒基因组gH、TK、UL24 基因的分段及全片段PCR 扩增 | 第26-28页 |
·鸭瘟弱毒基因组gH-TK-UL24 基因片段的克隆 | 第28-31页 |
·结果 | 第31-44页 |
·鸭瘟弱毒基因组gH、TK、UL24 基因的PCR 扩增 | 第31页 |
·DEV gH-TK-UL24 PCR 产物克隆及酶切鉴定 | 第31-32页 |
·序列分析 | 第32-41页 |
·遗传进化树 | 第41-44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
实验二 鸭瘟病毒强弱毒株TK 基因的克隆及序列比较分析 | 第46-55页 |
·材料 | 第47页 |
·质粒载体、工程菌和试验毒株 | 第47页 |
·酶和试剂 | 第47页 |
·方法 | 第47-49页 |
·病毒增殖 | 第47页 |
·病毒基因组的提取 | 第47-48页 |
·引物的设计与合成 | 第48页 |
·鸭瘟强弱毒基因组TK 基因的PCR 扩增 | 第48页 |
·PCR 产物的纯化及克隆 | 第48页 |
·重组质粒鉴定 | 第48-49页 |
·序列比较分析 | 第49页 |
·结果 | 第49-53页 |
·TK 基因的PCR 扩增 | 第49-50页 |
·重组质粒的PCR 及酶切鉴定 | 第50-51页 |
·鸭瘟病毒TK-UL24 基因序列分析 | 第51-53页 |
·讨论 | 第53-55页 |
实验三 鸭瘟病毒转移质粒的构建 | 第55-70页 |
·材料 | 第56-57页 |
·质粒载体、工程菌 | 第56页 |
·细胞和病毒 | 第56页 |
·工具酶及主要试剂 | 第56页 |
·常用缓冲液及培养基配置 | 第56-57页 |
·方法(转移载体的构建见图4.2) | 第57-64页 |
·TK 基因的亚克隆和鉴定 | 第57-59页 |
·GFP 基因真核表达盒的构建 | 第59-60页 |
·GFP1;GFP2;GFP3 基因真核表达盒的克隆 | 第60-61页 |
·质粒DNA 的制备及纯化 | 第61-62页 |
·DEV 病毒的繁殖及基因组DNA 的提取 | 第62-63页 |
·鸭胚成纤维细胞(DEF),鸭胚肾细胞(DEK)单层细胞的制备 | 第63页 |
·转染 | 第63-64页 |
·结果 | 第64-68页 |
·TK 基因的亚克隆和鉴定 | 第64-65页 |
·Pcmv-GFP-polyA 基因片段的PCR 扩增 | 第65页 |
·GFP3 基因片段的T 载体克隆与鉴定 | 第65-66页 |
·GFP 基因真核表达盒的克隆与鉴定 | 第66页 |
·转染 | 第66-68页 |
·讨论 | 第68-70页 |
结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-80页 |
附录A 常用缓冲液及溶液配制 | 第80-89页 |
作者简介 | 第89页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第89页 |