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碱性纤维素酶产生菌的筛选、酶基因克隆及在大肠杆菌中的表达研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-14页
第一章 绪论第14-25页
   ·产纤维素酶微生物的选育第14-19页
     ·纤维素酶的筛选策略第14-17页
     ·产纤维素酶细菌的主要类群第17-19页
   ·细菌纤维素酶的分子生物学研究第19-22页
     ·细菌纤维素酶的组分和结构第19页
     ·细菌纤维素酶的基因克隆和表达第19-20页
     ·细菌纤维素酶的体外改造第20-22页
   ·纤维素酶的应用前景第22-24页
     ·在纤维乙醇中的应用第22页
     ·在洗涤剂行业的应用第22-23页
     ·在造纸行业的应用第23页
     ·在纺织行业的应用第23-24页
   ·本文的研究目的及内容第24-25页
第二章 产碱性纤维素酶细菌的筛选鉴定及其粗酶液的酶学性质第25-37页
   ·导言第25页
   ·材料与方法第25-28页
     ·土样来源第25页
     ·菌株与质粒第25页
     ·培养基第25-26页
     ·菌种筛选方法第26页
     ·纤维素酶酶活的测定第26-27页
     ·菌种鉴定第27-28页
   ·结果与讨论第28-35页
     ·菌种的分离第28-29页
     ·菌株Z-16的鉴定第29-32页
     ·菌株Z-16粗酶液的酶学性质第32-35页
   ·小结第35-37页
第三章 芽孢杆菌Z-16产碱性纤维素酶的条件优化第37-45页
   ·导言第37页
   ·材料与方法第37-38页
     ·菌种第37页
     ·培养基第37页
     ·摇瓶发酵优化方法第37页
     ·纤维素酶酶活测定第37页
     ·菌体生长的测定第37页
     ·蛋白质浓度的测定第37-38页
   ·结果与讨论第38-44页
     ·培养基中碳源对产酶的影响第38-39页
     ·培养基中氮源对产酶的影响第39页
     ·碳、氮源浓度对产酶的影响第39-40页
     ·NaCl浓度对产酶的影响第40-41页
     ·初始pH值对产酶的影响第41页
     ·培养温度对产酶的影响第41-42页
     ·摇床转速对产酶的影响第42-43页
     ·接种量对产酶的影响第43页
     ·摇瓶装液量对产酶的影响第43-44页
   ·小结第44-45页
第四章 芽孢杆菌Z-16纤维素酶的基因克隆及表达研究第45-58页
   ·导言第45页
   ·材料与方法第45-52页
     ·菌株与质粒第45页
     ·工具酶与生化试剂第45-46页
     ·培养基第46页
     ·Bacillus sp.Z-16所产纤维素酶基因的克隆第46-50页
     ·纤维素酶基因gen2和gen3在E.coli BL21(DE3)中的高效表达第50-51页
     ·纤维素酶酶活的测定第51-52页
   ·结果与讨论第52-56页
     ·纤维素酶基因的克隆及序列分析第52-53页
     ·纤维素酶基因gen2和gen3在E.coli BL21(DE3)中的高效表达第53-56页
   ·小结第56-58页
第五章 重组纤维素酶的分离纯化及酶学性质研究第58-69页
   ·导言第58页
   ·材料与方法第58-61页
     ·重组酶Cel 2和Cel 3的分离纯化第58-59页
     ·SDS-PAGE第59-60页
     ·纯酶Cel 2和Cel 3酶学性质测定第60页
     ·纯酶Cel 2和Cel 3 Km值和V_(max)的测定第60-61页
   ·结果与讨论第61-67页
     ·重组酶Cel 2和Cel 3的分离纯化第61-63页
     ·纯酶Cel 2和Cel 3的酶学性质第63-67页
     ·纯酶Cel 2和Cel 3的K_m值和V_(max)的测定第67页
   ·小结第67-69页
附录1第69-70页
附录2第70-74页
参考文献第74-83页
致谢第83-84页
学位论文评阅及答辩情况表第84页

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