乳腺癌阅读框架内噬菌体文库的构建
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-26页 |
| ·癌症的病因和危害 | 第12页 |
| ·肿瘤标志物的基本知识 | 第12-14页 |
| ·肿瘤标志物的定义 | 第12-13页 |
| ·乳腺癌肿瘤标志物 | 第13页 |
| ·肿瘤标志物的筛选 | 第13-14页 |
| ·噬菌体展示技术概述 | 第14-19页 |
| ·λ噬菌体展示系统 | 第15-16页 |
| ·单链丝状噬菌体展示系统 | 第16-17页 |
| ·T4噬菌体展示系统 | 第17页 |
| ·T7噬菌体展示系统 | 第17-19页 |
| ·噬菌体展示文库的应用 | 第19-23页 |
| ·构建噬菌体抗体库 | 第20-21页 |
| ·噬菌体展示技术用于抗原表位的研究 | 第21-22页 |
| ·噬菌体展示技术用于各种疾病的研究 | 第22-23页 |
| ·噬菌体展示技术用于新型疫苗的研究 | 第23页 |
| ·开放阅读框架的筛选 | 第23-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第2章 乳腺癌双链CDNA的合成 | 第26-34页 |
| ·材料与方法 | 第27-31页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·乳腺癌组织 | 第27页 |
| ·生化试剂及试剂盒 | 第27页 |
| ·耗材与主要实验仪器 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-31页 |
| ·乳腺癌组织的获取及保存 | 第28页 |
| ·总RNA提取 | 第28页 |
| ·mRNA分离纯化 | 第28-29页 |
| ·cDNA合成及末端平端化 | 第29-31页 |
| ·加EcoR Ⅰ/HindⅢ接头 | 第31页 |
| ·结果 | 第31-32页 |
| ·总RNA提取结果 | 第31-32页 |
| ·mRNA分离结果 | 第32页 |
| ·dscDNA合成结果 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第3章 质粒PKE-2载体的制备 | 第34-39页 |
| ·材料与方法 | 第34-37页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-37页 |
| ·大肠杆菌DH5α菌株感受态细胞的制备 | 第34页 |
| ·pKE-2文库质粒的扩增 | 第34-35页 |
| ·pKE-2文库质粒的提取和电泳检测 | 第35-36页 |
| ·pKE-2文库质粒的双酶切及鉴定 | 第36页 |
| ·pKE-2质粒载体的回收 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-38页 |
| ·pKE-2载体的提取结果 | 第37页 |
| ·pKE-2载体的酶切纯化回收结果 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 第4章 T7噬菌体载体的制备 | 第39-44页 |
| ·材料与方法 | 第39-41页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-41页 |
| ·T7噬菌体宿主菌的培养 | 第39-40页 |
| ·T7噬菌体的扩增 | 第40页 |
| ·T7噬菌体DNA的提取-酚抽法 | 第40页 |
| ·T7噬菌体DNA的双酶切及纯化 | 第40-41页 |
| ·T7载体的回收 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-42页 |
| ·T7噬菌体DNA的电泳鉴定 | 第41-42页 |
| ·T7噬菌体DNA纯度的测定 | 第42页 |
| ·双酶切后T7 DNA纯度的测定 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第5章 阅读框架内克隆的筛选及鉴定 | 第44-48页 |
| ·材料与方法 | 第44-45页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-45页 |
| ·双链cDNA与pKE-2载体的连接 | 第44页 |
| ·转化大肠杆菌DH5a | 第44页 |
| ·菌落PCR并测序鉴定 | 第44-45页 |
| ·阳性克隆的收集保存及ORF内cDNA片段的获取 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-46页 |
| ·卡那霉素抗性筛选效率 | 第45页 |
| ·ORF内cDNA片段的获取 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第6章 噬菌体展示文库的包装及鉴定 | 第48-53页 |
| ·材料与方法 | 第48-50页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-50页 |
| ·cDNA片段与T7载体的链接及体外包装 | 第48-49页 |
| ·T7噬菌体展示文库的鉴定 | 第49-50页 |
| ·结果 | 第50-51页 |
| ·初始噬菌体文库的滴度 | 第50页 |
| ·扩增后噬菌体文库的滴度 | 第50页 |
| ·PCR鉴定文库插入片段分布情况 | 第50页 |
| ·测序结果 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
