中文摘要 | 第1-15页 |
英文摘要 | 第15-19页 |
符号说明 | 第19-20页 |
第一章 活细胞内生物单分子的荧光成像 | 第20-82页 |
·引言 | 第20-21页 |
·荧光成像技术 | 第21-60页 |
·全内反射荧光显微术 | 第21-57页 |
·全内反射现象 | 第21-23页 |
·全内反射荧光显微镜的TIR成像系统 | 第23-24页 |
·全内反射荧光显微镜 | 第24-25页 |
·全内反射显微术在生物单分子探测中的应用 | 第25-57页 |
·离体生物单分子探测 | 第26-46页 |
·活细胞中生物单分子探测 | 第46-57页 |
·共聚焦荧光显微术 | 第57-58页 |
·近场扫描光学显微术 | 第58-59页 |
·多光子激发荧光显微术 | 第59-60页 |
·荧光光谱技术 | 第60-64页 |
·荧光共振能量转移 | 第60-62页 |
·荧光寿命成像显微术 | 第62-63页 |
·荧光相关光谱 | 第63-64页 |
·荧光探针及标记方法 | 第64-68页 |
·荧光探针 | 第64-67页 |
·荧光探针的标记 | 第67-68页 |
·展望 | 第68页 |
·参考文献 | 第68-82页 |
第二章 全内反射荧光显微术结合细胞内落射荧光显微术观测活细胞内单个量子点标记的生物大分子 | 第82-106页 |
·引言 | 第82-84页 |
·材料和方法 | 第84-86页 |
·试剂 | 第84页 |
·细胞培养及处理 | 第84-85页 |
·物镜型全内反射荧光显微镜 | 第85-86页 |
·活细胞上单个insulin-QDs荧光图像的获取 | 第86页 |
·结果与讨论 | 第86-99页 |
·细胞自发荧光的消除 | 第86-91页 |
·细胞膜受体结合insulin的特异性 | 第91-93页 |
·采用TIRFM对活细胞上表面的单个insulin-QD进行成像 | 第93-96页 |
·细胞内Epi-FM观测胞内和下表面质膜荧光图像 | 第96-99页 |
·结论 | 第99-100页 |
·参考文献 | 第100-106页 |
第三章 单分子水平观测胰岛素作用下质膜上胰岛素受体的聚集 | 第106-145页 |
·引言 | 第106-107页 |
·实验部分 | 第107-110页 |
·试剂 | 第107-108页 |
·细胞培养 | 第108页 |
·细胞自发荧光的漂白 | 第108页 |
·观察细胞上insulin的结合及IR的聚集分布情况 | 第108页 |
·观察细胞上anti-IR的结合及IR的聚集分布情况 | 第108-109页 |
·特异性结合实验 | 第109页 |
·仪器 | 第109页 |
·成像方法及数据分析 | 第109-110页 |
·结果与讨论 | 第110-137页 |
·Insulin-biotin的QD-streptavidin荧光标记 | 第110-112页 |
·Insulin-biotin和QD-streptavidin的结合方式 | 第112-115页 |
·细胞膜IR结合insulin的特异性 | 第115-119页 |
·IR-insulin复合物的形成 | 第119-121页 |
·细胞膜上单个IR-insulin复合物的荧光观测 | 第121-125页 |
·细胞膜IR-insulin聚集体的荧光观测 | 第125-128页 |
·单分子水平追踪质膜上IR二聚现象 | 第128-130页 |
·单分子追踪IR-insulin多聚现象 | 第130-132页 |
·连续观测质膜上insulin-QD的结合和IR-insulin复合物的聚集 | 第132-134页 |
·Insulin在IR信号转导中的诱导作用 | 第134-137页 |
·结论 | 第137页 |
·参考文献 | 第137-145页 |
第四章 全内反射结合胞内落射荧光成像法观测活细胞内IR-insulin内涵体 | 第145-177页 |
·引言 | 第145-148页 |
·实验部分 | 第148-149页 |
·试剂 | 第148页 |
·细胞培养 | 第148页 |
·细胞自发荧光的漂白 | 第148页 |
·观察质膜上IR-insulin聚集体的内吞 | 第148页 |
·观察细胞内IR-insulin内涵体 | 第148-149页 |
·观察不同孵育时间IR-insulin的内在化 | 第149页 |
·连续观测胞内IR-insulin内涵体 | 第149页 |
·特异性结合实验 | 第149页 |
·仪器、成像方法及数据分析 | 第149页 |
·结果与讨论 | 第149-172页 |
·细胞膜IR结合insulin的特异性 | 第150页 |
·细胞内IR-insulin内涵体的形成 | 第150-152页 |
·质膜上及胞内IR-insulin的荧光观测 | 第152-157页 |
·早期内涵体和晚期内涵体的荧光观测 | 第157-160页 |
·追踪观察质膜上IR-insulin聚集体的内吞 | 第160-162页 |
·实时观测胞内IR-insulin内涵体 | 第162-172页 |
·结论 | 第172页 |
·参考文献 | 第172-177页 |
致谢 | 第177-178页 |
博士期间发表论文 | 第178-179页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第179-180页 |
英文论文 | 第180-224页 |