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单分子水平研究活细胞中胰岛素与其受体复合物的运动、聚集及内吞

中文摘要第1-15页
英文摘要第15-19页
符号说明第19-20页
第一章 活细胞内生物单分子的荧光成像第20-82页
   ·引言第20-21页
   ·荧光成像技术第21-60页
     ·全内反射荧光显微术第21-57页
       ·全内反射现象第21-23页
       ·全内反射荧光显微镜的TIR成像系统第23-24页
       ·全内反射荧光显微镜第24-25页
       ·全内反射显微术在生物单分子探测中的应用第25-57页
         ·离体生物单分子探测第26-46页
         ·活细胞中生物单分子探测第46-57页
     ·共聚焦荧光显微术第57-58页
     ·近场扫描光学显微术第58-59页
     ·多光子激发荧光显微术第59-60页
   ·荧光光谱技术第60-64页
     ·荧光共振能量转移第60-62页
     ·荧光寿命成像显微术第62-63页
     ·荧光相关光谱第63-64页
   ·荧光探针及标记方法第64-68页
     ·荧光探针第64-67页
     ·荧光探针的标记第67-68页
   ·展望第68页
   ·参考文献第68-82页
第二章 全内反射荧光显微术结合细胞内落射荧光显微术观测活细胞内单个量子点标记的生物大分子第82-106页
   ·引言第82-84页
   ·材料和方法第84-86页
     ·试剂第84页
     ·细胞培养及处理第84-85页
     ·物镜型全内反射荧光显微镜第85-86页
     ·活细胞上单个insulin-QDs荧光图像的获取第86页
   ·结果与讨论第86-99页
     ·细胞自发荧光的消除第86-91页
     ·细胞膜受体结合insulin的特异性第91-93页
     ·采用TIRFM对活细胞上表面的单个insulin-QD进行成像第93-96页
     ·细胞内Epi-FM观测胞内和下表面质膜荧光图像第96-99页
   ·结论第99-100页
   ·参考文献第100-106页
第三章 单分子水平观测胰岛素作用下质膜上胰岛素受体的聚集第106-145页
   ·引言第106-107页
   ·实验部分第107-110页
     ·试剂第107-108页
     ·细胞培养第108页
     ·细胞自发荧光的漂白第108页
     ·观察细胞上insulin的结合及IR的聚集分布情况第108页
     ·观察细胞上anti-IR的结合及IR的聚集分布情况第108-109页
     ·特异性结合实验第109页
     ·仪器第109页
     ·成像方法及数据分析第109-110页
   ·结果与讨论第110-137页
     ·Insulin-biotin的QD-streptavidin荧光标记第110-112页
     ·Insulin-biotin和QD-streptavidin的结合方式第112-115页
     ·细胞膜IR结合insulin的特异性第115-119页
     ·IR-insulin复合物的形成第119-121页
     ·细胞膜上单个IR-insulin复合物的荧光观测第121-125页
     ·细胞膜IR-insulin聚集体的荧光观测第125-128页
     ·单分子水平追踪质膜上IR二聚现象第128-130页
     ·单分子追踪IR-insulin多聚现象第130-132页
     ·连续观测质膜上insulin-QD的结合和IR-insulin复合物的聚集第132-134页
     ·Insulin在IR信号转导中的诱导作用第134-137页
   ·结论第137页
   ·参考文献第137-145页
第四章 全内反射结合胞内落射荧光成像法观测活细胞内IR-insulin内涵体第145-177页
   ·引言第145-148页
   ·实验部分第148-149页
     ·试剂第148页
     ·细胞培养第148页
     ·细胞自发荧光的漂白第148页
     ·观察质膜上IR-insulin聚集体的内吞第148页
     ·观察细胞内IR-insulin内涵体第148-149页
     ·观察不同孵育时间IR-insulin的内在化第149页
     ·连续观测胞内IR-insulin内涵体第149页
     ·特异性结合实验第149页
     ·仪器、成像方法及数据分析第149页
   ·结果与讨论第149-172页
     ·细胞膜IR结合insulin的特异性第150页
     ·细胞内IR-insulin内涵体的形成第150-152页
     ·质膜上及胞内IR-insulin的荧光观测第152-157页
     ·早期内涵体和晚期内涵体的荧光观测第157-160页
     ·追踪观察质膜上IR-insulin聚集体的内吞第160-162页
     ·实时观测胞内IR-insulin内涵体第162-172页
   ·结论第172页
   ·参考文献第172-177页
致谢第177-178页
博士期间发表论文第178-179页
学位论文评阅及答辩情况表第179-180页
英文论文第180-224页

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