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纤维素降解细菌新种的酶学特性及基因组文库构建策略

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第1章 绪论第10-28页
   ·纤维素物质的结构特征及降解利用第10-11页
     ·纤维素生物质的结构组成第10页
     ·纤维素生物质的降解利用第10-11页
   ·纤溶性微生物种类的多样性第11-12页
     ·纤维素降解性真菌类群第11-12页
     ·纤维素降解性细菌类群第12页
   ·微生物纤维素酶系统的构成及特征第12-14页
     ·微生物纤维素酶系统的构成第12-14页
     ·纤维素酶组分的结构域特征第14页
   ·微生物纤维素酶系统的作用形式第14-24页
     ·微生物的非复合型纤维素酶系统第14-16页
     ·微生物的复合型纤维素酶系统第16-23页
     ·纤维小体基因的复制重排与同源转移第23-24页
   ·微生物对纤维素物质的降解机制第24-26页
     ·纤维素酶系统对纤维素水解的作用机理第24-25页
     ·纤维素酶系统中经典组分间的协同作用第25页
     ·纤维素降解过程中纤维二糖脱氢酶的作用第25-26页
     ·其它蛋白因子在纤维素降解过程的作用第26页
   ·课题来源及研究的目的意义和内容第26-28页
     ·课题来源第26页
     ·本课题研究的目的意义及内容第26-28页
第2章 实验材料与方法第28-38页
   ·实验仪器和试剂第28-29页
   ·细菌来源及分离培养第29-30页
     ·细菌菌株的来源第29页
     ·细菌菌株的分离培养第29-30页
   ·细菌的表型及生理特征鉴定第30-31页
     ·菌株的显微成像样品制备第30-31页
     ·菌株的生理生化特性鉴定第31页
   ·应用分子生物学手段对菌株的鉴定第31-36页
     ·分子克隆实验操作培养基第31-32页
     ·菌株的16S rDNA基因的克隆测序第32-35页
     ·菌株16S-23S rDNA间隔区(ISRs)的克隆测序第35页
     ·菌株基因组中G+C mol%的含量测定第35-36页
   ·菌株的纤维素酶学特性分析第36-38页
     ·菌株的纤维降解能力鉴定第36页
     ·不同细胞组分的制备及酶活力测定第36页
     ·温度及pH对纤维素酶活力的影响第36-37页
     ·金属离子对纤维素酶活力的影响第37页
     ·不同底物对纤维素酶活力的影响第37-38页
第3章 具纤溶性细菌Vibrio sp. N-1 的系统进化分析第38-51页
   ·具纤溶性菌株N-1 的分离纯化第38-39页
   ·菌株N-1 的形态学特征第39-41页
   ·菌株N-1 的生理生化特性第41-43页
   ·菌株N-1 的16S rRNA基因克隆和测序第43-45页
     ·菌株N-1 的基因组DNA的提取第43页
     ·16S rDNA 基因序列的PCR扩增第43-44页
     ·菌株16S rDNA 基因的部分序列第44-45页
   ·菌株N-1 的16S-23S rRNA ISRs序列第45-46页
   ·菌株N-1 的G+Cmol %含量第46-47页
   ·菌株的系统发育进化特征第47-50页
   ·本章小结第50-51页
第4章 细菌Vibrio sp. N-1 纤维素酶系统的酶学特性第51-64页
   ·菌株纤维素酶系统的纤维降解能力第52页
   ·菌株纤维素酶系统的单酶成分分析第52-53页
   ·pH对菌株纤维素酶系统活性的影响第53-56页
     ·菌株纤维素酶系统的最适pH值第53-55页
     ·菌株纤维素酶系统的pH稳定性第55-56页
   ·温度对菌株纤维素酶系统活性的影响第56-57页
     ·菌株纤维素酶系统的最适温度第56页
     ·酶系统在不同温度下的稳定性第56-57页
   ·金属离子对纤维素酶系的活性影响第57-58页
   ·不同的发酵底物对酶系的活性影响第58页
   ·菌株纤维素酶系统的诱导型特征第58-59页
   ·菌株表达纤维素酶的细胞定位第59-62页
     ·菌株表达CMCase的细胞定位第59-61页
     ·菌株表达FPase的细胞定位第61-62页
   ·本章小结第62-64页
第5章 细菌Vibrio sp. N-1 基因组文库的构建策略第64-81页
   ·菌株双基因组文库的构建与评估程序第65页
   ·菌株N-1 高浓度基因组DNA的制备第65-67页
   ·菌株Sau 3A I基因组文库的构建策略第67-74页
     ·菌株基因组的Sau 3A I部分酶切第67-70页
     ·载体PUC19 的Bam H I完全酶切第70-71页
     ·载体PUC19 的Bam H I完全酶切后去磷酸化第71-72页
     ·Sau 3A I酶切的基因组片段与载体重组第72-73页
     ·Sau 3A I文库中重组转化子的筛选与鉴定第73-74页
   ·菌株Pst I基因组文库的构建策略第74-78页
     ·菌株基因组的Pst I部分酶切第74-76页
     ·载体PUC19 的Pst I完全酶切第76页
     ·载体PUC19 的Pst I完全酶切后去磷酸化第76-77页
     ·Pst I酶切的基因组片段与载体重组第77页
     ·Pst I文库中重组转化子的筛选与鉴定第77-78页
   ·菌株双基因组文库构建完整性评估第78-80页
   ·本章小结第80-81页
结论第81-83页
参考文献第83-90页
攻读学位期间发表的学术论文第90-92页
致谢第92页

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