| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-21页 |
| ·番茄细菌性斑点病研究进展 | 第12-18页 |
| ·番茄细菌性斑点病及其病原菌简介 | 第12页 |
| ·植物防御反应机制 | 第12-13页 |
| ·番茄细菌性斑点病病原菌无毒基因AvrPto/AvrPtoB | 第13-16页 |
| ·番茄细菌性斑点病抗病基因Pto | 第16-17页 |
| ·番茄细菌性斑点病抗病分子机制研究进展 | 第17-18页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第18-20页 |
| ·酵母双杂交技术的原理 | 第18-19页 |
| ·酵母双杂交技术的应用 | 第19页 |
| ·酵母双杂交技术的优缺点 | 第19-20页 |
| ·本论文研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 Lescpth5 基因的表达研究 | 第21-30页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·供试菌株 | 第21页 |
| ·供试植物 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·其他材料 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-27页 |
| ·中蔬四号总RNA的提取 | 第22-23页 |
| ·RNA样品质量检测 | 第23页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第23页 |
| ·引物设计 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR反应 | 第24页 |
| ·PCR产物的回收纯化 | 第24-25页 |
| ·连接反应 | 第25页 |
| ·重组质粒转化大肠杆菌 | 第25-26页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-29页 |
| ·实验结果 | 第27-28页 |
| ·编码蛋白质生物信息学分析 | 第28-29页 |
| ·小结与讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 AvrPto、AvrPtoB与Lescpth5 之间的互作分析 | 第30-49页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·供试菌株 | 第30页 |
| ·供试植物 | 第30页 |
| ·试剂及培养基 | 第30-31页 |
| ·各种工具酶及其他试剂 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-44页 |
| ·pGBKT7 质粒载体的制备 | 第31-33页 |
| ·pGADT7 质粒载体的制备 | 第33-34页 |
| ·无毒基因AvrPto/AvrPtoB的克隆 | 第34-37页 |
| ·Lescpth5 基因的克隆 | 第37-38页 |
| ·诱饵载体和猎物载体的构建 | 第38-40页 |
| ·融合蛋白的转录激活特性检测和毒性检测 | 第40-42页 |
| ·共转化验证Lescpth5 与AvrPto/AvrPtoB之间的互作 | 第42-43页 |
| ·对照 | 第43页 |
| ·再次共转化验证Lescpth5 与AvrPto/AvrPtoB之间的互作 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-47页 |
| ·互作分析流程图 | 第44页 |
| ·基因组DNA提取结果 | 第44-45页 |
| ·AvrPto/AvrPtoB/Lescpth5 的PCR扩增 | 第45页 |
| ·诱饵载体酶切鉴定 | 第45-46页 |
| ·猎物载体酶切鉴定 | 第46页 |
| ·载体插入片段的读码框验证 | 第46页 |
| ·自激活和毒性检测结果 | 第46-47页 |
| ·共转化验证Lescpth5 与AvrPto/AvrPtoB的互作 | 第47页 |
| ·小结和讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 酵母双杂交筛选与AvrPto、AvrPtoB互作的蛋白 | 第49-65页 |
| ·实验材料 | 第49-51页 |
| ·实验方法 | 第51-57页 |
| ·构建中蔬四号cDNA文库 | 第51-53页 |
| ·共转化筛选和AvrPto、AvrPtoB互作的蛋白 | 第53页 |
| ·阳性克隆分析与鉴定 | 第53-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-61页 |
| ·共转化筛选流程 | 第57页 |
| ·LD-PCR扩增dscDNA结果 | 第57-58页 |
| ·共转化结果 | 第58-59页 |
| ·互作的阳性克隆分析 | 第59页 |
| ·菌落PCR的验证 | 第59页 |
| ·AD质粒酶切鉴定结果 | 第59-60页 |
| ·再次共转化验证 | 第60页 |
| ·测序结果与分析 | 第60-61页 |
| ·小结与讨论 | 第61-65页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第65-67页 |
| ·结论 | 第65-66页 |
| ·下一步研究设想 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简介 | 第73页 |
