中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
1.引言 | 第13-33页 |
·研究的目的和意义 | 第13-14页 |
·猪流行性腹泻的流行与危害 | 第14-15页 |
·PEDV的病原学特征 | 第15-23页 |
·PEDV的分类地位与生物学特征 | 第15-17页 |
·PEDV的病原性 | 第17页 |
·PEDV的分子生物学特征 | 第17-22页 |
·PEDV的受体研究 | 第22页 |
·PEDV的抗原表位研究 | 第22-23页 |
·PEDV的免疫学研究概况 | 第23-26页 |
·PEDV感染仔猪的免疫反应 | 第23-24页 |
·PEDV感染后的抗体产生及其保护作用 | 第24页 |
·PED疫苗的研究 | 第24-26页 |
·乳酸杆菌表达外源抗原研究进展 | 第26-33页 |
·乳酸杆菌受体系统 | 第26页 |
·乳酸杆菌的益生作用 | 第26-28页 |
·乳酸杆菌作为抗原表达载体的优势 | 第28页 |
·乳酸杆菌与黏膜免疫 | 第28-29页 |
·乳酸杆菌表达抗原及免疫效果 | 第29-32页 |
·乳酸杆菌口服疫苗展望 | 第32-33页 |
2.材料与方法 | 第33-46页 |
·实验材料 | 第33-37页 |
·病毒与细胞 | 第33页 |
·菌种与质粒 | 第33页 |
·引物 | 第33页 |
·试剂 | 第33-36页 |
·主要仪器设备 | 第36页 |
·试验动物 | 第36-37页 |
·血清 | 第37页 |
·实验方法 | 第37-46页 |
·n和s基因克隆与序列分析 | 第37-39页 |
·全长s基因的获得 | 第39页 |
·PEDV N蛋白和S蛋白的免疫原性分析 | 第39-41页 |
·分子佐剂LTB基因的克隆及其与ps420基因串联 | 第41页 |
·表达不同基因片段的重组干酪乳杆菌的构建 | 第41-44页 |
·免疫效果评价 | 第44-46页 |
3.实验结果 | 第46-94页 |
·RT-PCR结果 | 第46页 |
·测序结果与序列分析 | 第46-50页 |
·s基因克隆结果 | 第50页 |
·大肠杆菌中外源蛋白表达及纯化 | 第50-51页 |
·抗血清滴度检测 | 第51-52页 |
·中和试验 | 第52页 |
·重组表达载体的鉴定 | 第52-55页 |
·重组乳杆菌的表达鉴定 | 第55-67页 |
·细胞表面表达型重组干酪乳杆菌的诱导表达鉴定结果 | 第55-62页 |
·分泌表达型重组干酪乳杆菌的诱导表达鉴定结果 | 第62-67页 |
·免疫小鼠后特异性抗体检测结果 | 第67-89页 |
·小鼠血清中特异性IgG检测结果 | 第67-71页 |
·免疫小鼠鼻冲洗液中特异性sIgA检测结果 | 第71-75页 |
·免疫小鼠粪便中特异性sIgA检测结果 | 第75-79页 |
·免疫小鼠外生殖道冲洗液中特异性sIgA检测结果 | 第79-83页 |
·免疫小鼠眼冲洗液中特异性sIgA检测结果 | 第83-88页 |
·肠粘液中特异性sIgA检测结果 | 第88-89页 |
·特异性淋巴细胞增殖试验 | 第89-90页 |
·细胞因子测定结果 | 第90页 |
·口服重组干酪乳杆菌免疫小鼠所获得的血清抗体及肠黏液抗体中和试验结果 | 第90-94页 |
4.讨论 | 第94-105页 |
·PEDV LJB/03株s和n基因的分子特征 | 第94页 |
·课题设计思路 | 第94-97页 |
·PEDV抗原片段筛选及其意义 | 第97-98页 |
·表达不同抗原片段的重组乳酸杆菌的免疫效果分析 | 第98-102页 |
·提高乳酸杆菌转化效率的关键技术 | 第102-105页 |
5.结论 | 第105-106页 |
致谢 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-116页 |
附录 | 第116-125页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第125页 |