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猪流行性腹泻病毒主要结构蛋白不同抗原片段在重组干酪乳杆菌中的表达及其免疫学评价

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-13页
1.引言第13-33页
   ·研究的目的和意义第13-14页
   ·猪流行性腹泻的流行与危害第14-15页
   ·PEDV的病原学特征第15-23页
     ·PEDV的分类地位与生物学特征第15-17页
     ·PEDV的病原性第17页
     ·PEDV的分子生物学特征第17-22页
     ·PEDV的受体研究第22页
     ·PEDV的抗原表位研究第22-23页
   ·PEDV的免疫学研究概况第23-26页
     ·PEDV感染仔猪的免疫反应第23-24页
     ·PEDV感染后的抗体产生及其保护作用第24页
     ·PED疫苗的研究第24-26页
   ·乳酸杆菌表达外源抗原研究进展第26-33页
     ·乳酸杆菌受体系统第26页
     ·乳酸杆菌的益生作用第26-28页
     ·乳酸杆菌作为抗原表达载体的优势第28页
     ·乳酸杆菌与黏膜免疫第28-29页
     ·乳酸杆菌表达抗原及免疫效果第29-32页
     ·乳酸杆菌口服疫苗展望第32-33页
2.材料与方法第33-46页
   ·实验材料第33-37页
     ·病毒与细胞第33页
     ·菌种与质粒第33页
     ·引物第33页
     ·试剂第33-36页
     ·主要仪器设备第36页
     ·试验动物第36-37页
     ·血清第37页
   ·实验方法第37-46页
     ·n和s基因克隆与序列分析第37-39页
     ·全长s基因的获得第39页
     ·PEDV N蛋白和S蛋白的免疫原性分析第39-41页
     ·分子佐剂LTB基因的克隆及其与ps420基因串联第41页
     ·表达不同基因片段的重组干酪乳杆菌的构建第41-44页
     ·免疫效果评价第44-46页
3.实验结果第46-94页
   ·RT-PCR结果第46页
   ·测序结果与序列分析第46-50页
   ·s基因克隆结果第50页
   ·大肠杆菌中外源蛋白表达及纯化第50-51页
   ·抗血清滴度检测第51-52页
   ·中和试验第52页
   ·重组表达载体的鉴定第52-55页
   ·重组乳杆菌的表达鉴定第55-67页
     ·细胞表面表达型重组干酪乳杆菌的诱导表达鉴定结果第55-62页
     ·分泌表达型重组干酪乳杆菌的诱导表达鉴定结果第62-67页
   ·免疫小鼠后特异性抗体检测结果第67-89页
     ·小鼠血清中特异性IgG检测结果第67-71页
     ·免疫小鼠鼻冲洗液中特异性sIgA检测结果第71-75页
     ·免疫小鼠粪便中特异性sIgA检测结果第75-79页
     ·免疫小鼠外生殖道冲洗液中特异性sIgA检测结果第79-83页
     ·免疫小鼠眼冲洗液中特异性sIgA检测结果第83-88页
     ·肠粘液中特异性sIgA检测结果第88-89页
   ·特异性淋巴细胞增殖试验第89-90页
   ·细胞因子测定结果第90页
   ·口服重组干酪乳杆菌免疫小鼠所获得的血清抗体及肠黏液抗体中和试验结果第90-94页
4.讨论第94-105页
   ·PEDV LJB/03株s和n基因的分子特征第94页
   ·课题设计思路第94-97页
   ·PEDV抗原片段筛选及其意义第97-98页
   ·表达不同抗原片段的重组乳酸杆菌的免疫效果分析第98-102页
   ·提高乳酸杆菌转化效率的关键技术第102-105页
5.结论第105-106页
致谢第106-107页
参考文献第107-116页
附录第116-125页
攻读博士学位期间发表的学术论文第125页

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