| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语表 | 第9-12页 |
| 文献综述 | 第12-21页 |
| 1 玻璃化冷冻保存原理 | 第12页 |
| 2 影响卵母细胞玻璃化冷冻效果的因素 | 第12-18页 |
| ·卵母细胞的种类 | 第12-13页 |
| ·卵母细胞的发育阶段 | 第13页 |
| ·冷冻保护剂 | 第13-15页 |
| ·冷冻方法 | 第15-18页 |
| ·开放式拉长麦管(Open pulled straw,OPS)法 | 第15页 |
| ·封闭式拉长麦管(Closed pulled straw,CPS)法 | 第15-16页 |
| ·固体表面玻璃化(Solid surface vitrification,SSV)法 | 第16页 |
| ·尼龙网(nylon-mesh)法 | 第16页 |
| ·冷冻环(Cryoloop或microloop)法 | 第16-17页 |
| ·半麦管(Hemi-straw)法 | 第17页 |
| ·冷冻盖(Cryotop vitrification)法 | 第17-18页 |
| 3 冷冻过程对卵母细胞的影响 | 第18-19页 |
| ·对细胞膜和绒毛膜的损伤 | 第18页 |
| ·对细胞骨架、纺锤体和染色体的损伤 | 第18-19页 |
| ·对透明带和皮质颗粒的损伤 | 第19页 |
| 4 展望 | 第19-21页 |
| 引言 | 第21-23页 |
| 1 材料与方法 | 第23-33页 |
| ·试验材料 | 第23-26页 |
| ·卵巢 | 第23页 |
| ·主要仪器和设备 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·试验用培养液及试剂配制方法 | 第24-26页 |
| ·卵巢采集液 | 第24页 |
| ·卵母细胞收集液 | 第24页 |
| ·成熟培养液 | 第24页 |
| ·PMSG和hCG | 第24页 |
| ·丙酮酸钠储存液 | 第24页 |
| ·脱卵丘液 | 第24页 |
| ·玻璃化冷冻用液 | 第24-25页 |
| ·细胞松弛素B(CB)储存液 | 第25页 |
| ·激活液 | 第25页 |
| ·胚胎培养液 | 第25页 |
| ·6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP) | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-33页 |
| ·卵丘-卵母细胞复合体的获取和体外成熟培养 | 第26页 |
| ·冷冻载体的制备 | 第26页 |
| ·猪卵泡液的制备 | 第26页 |
| ·FCS的灭活 | 第26-27页 |
| ·玻璃化冷冻及解冻 | 第27-29页 |
| ·卵母细胞冷冻解冻后的形态完整和存活判断 | 第29-30页 |
| ·卵母细胞的孤雌激活 | 第30页 |
| ·胚胎的体外培养 | 第30-31页 |
| ·试验设计 | 第31-32页 |
| ·数据分析 | 第32-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-38页 |
| ·渗透性冷冻保护剂对猪MⅡ期卵母细胞的毒性 | 第33-34页 |
| ·渗透性冷冻保护剂对卵母细胞玻璃化冷冻的影响 | 第34页 |
| ·细胞松弛素B对猪MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响 | 第34-35页 |
| ·冷冻载体对猪卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响 | 第35-37页 |
| ·离心和显微操作去脂对猪卵母细胞玻璃化冷冻的影响 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-42页 |
| ·渗透性冷冻保护剂对卵母细胞的毒性 | 第38-39页 |
| ·冷冻保护剂对卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响 | 第39页 |
| ·细胞松弛素B和对卵母细胞玻璃化冷冻的影响 | 第39-40页 |
| ·冷冻载体对猪卵母细胞冷冻效果的影响 | 第40页 |
| ·脂滴对猪卵母细胞玻璃化冷冻后发育能力的影响 | 第40-42页 |
| 4 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 致谢 | 第50-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
