| 提要 | 第1-8页 |
| 英文缩略词 | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-37页 |
| 一、RNA干扰 | 第9-22页 |
| 二、线虫 | 第22-32页 |
| 三、线虫蛋白酪氨酸磷酸酶 PTP-2 | 第32-36页 |
| 四、本论文的实验方案 | 第36-37页 |
| 第一部分 ptp-2基因的克隆表达 | 第37-44页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·菌株及质粒 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37-38页 |
| ·仪器 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| ·基本分子生物学实验方法 | 第38页 |
| ·引物设计 | 第38页 |
| ·目的片段的扩增 | 第38-39页 |
| ·克隆载体的构建和测定 | 第39-40页 |
| ·表达载体的构建和诱导表达 | 第40-41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-43页 |
| ·目的片段的扩增 | 第41页 |
| ·克隆载体的构建 | 第41-42页 |
| ·表达载体的构建 | 第42页 |
| ·PTP-2蛋白的表达 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第二部分 ptp-2基因表达产物的分离纯化及抗体制备 | 第44-50页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·试剂及材料 | 第44页 |
| ·缓冲液 | 第44页 |
| ·仪器 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-47页 |
| ·PTP-2蛋白的分离纯化 | 第45-47页 |
| ·实验结果 | 第47-49页 |
| ·PTP-2蛋白的分离纯化 | 第47-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第三部分 干扰ptp-2基因后对线虫表型的影响 | 第50-64页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·菌株、线虫和质粒 | 第50页 |
| ·缓冲液及培养基 | 第50-51页 |
| ·仪器 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-59页 |
| ·表达ptp-2 dsRNA菌株的构建 | 第51-53页 |
| ·对照组菌株的构建 | 第53页 |
| ·线虫的一般培养 | 第53-55页 |
| ·对线虫ptp-2基因的干扰 | 第55-59页 |
| ·实验结果 | 第59-63页 |
| ·dsRNA表达载体的构建 | 第59页 |
| ·对照组细菌构建 | 第59页 |
| ·Western Blot检测干扰效果 | 第59-60页 |
| ·干扰后线虫表型变化的观测 | 第60-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录 ptp-2 cDNA序列及氨基酸序列 | 第71-74页 |
| 中文摘要 | 第74-76页 |
| Abstract | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78页 |