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钝顶节旋藻高浓度NH4HCO3耐受株诱变选育及二氧化碳浓缩机制相关基因表达分析

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一部分 钝顶节旋藻高浓度NH_4HCO_3 耐受株诱变选育第12-52页
 0 前言第12-21页
   ·微藻诱变育种技术进展第12-15页
     ·微藻利用价值第12页
     ·微藻诱变技术第12-13页
     ·微藻诱变育种进展第13-15页
   ·节旋藻诱变育种技术进展第15-18页
     ·节旋藻概述第15-16页
     ·节旋藻的利用价值第16-17页
     ·节旋藻的诱变进展第17-18页
   ·节旋藻耐高铵品系选育与应用第18-21页
 1 材料与方法第21-27页
   ·实验材料第21页
   ·主要仪器第21-22页
   ·试剂及其配制第22-23页
     ·PBS 缓冲液配制第22页
     ·pH6.0 的磷酸缓冲液第22页
     ·pH7.2 的磷酸缓冲液第22页
     ·EMS 母液配制第22-23页
     ·NTG 母液配制第23页
   ·实验方法第23-27页
     ·正常藻株生长情况测定方法第23页
     ·钝顶节旋藻光合生理特性测定方法第23页
     ·钝顶节旋藻高浓度碳酸氢铵耐受能力实验第23-24页
     ·紫外线诱变钝顶节旋藻流程第24页
     ·EMS 诱变钝顶节旋藻流程第24-25页
     ·NTG 诱变钝顶节旋藻流程第25页
     ·耐高碳酸氢铵突变株的筛选第25-26页
     ·耐高碳酸氢铵突变株遗传稳定性研究方法第26页
     ·突变藻株对碳酸氢铵耐受性研究及光合生理特性研究第26-27页
 2 研究结果第27-48页
   ·节旋藻出发株生理特性第27-32页
     ·钝顶节旋藻OD 值与细胞密度关系第27-28页
     ·钝顶节旋藻出发藻株在正常培养条件下的生长情况第28-29页
     ·钝顶节旋藻出发藻株光饱和点测定情况第29-30页
     ·钝顶节旋藻出发藻株碳酸氢铵浓度耐受范围第30-32页
   ·三种方法诱变钝顶节旋藻藻株的比较第32-40页
     ·紫外线诱变钝顶节旋藻藻株第32-34页
     ·EMS 诱变钝顶节旋藻藻株第34-36页
     ·NTG 诱变钝顶节旋藻藻株第36-38页
     ·三种诱变方法对钝顶节旋藻诱变效果比较第38-40页
   ·钝顶节旋藻突变藻株生长特性第40-48页
     ·NTG 诱变钝顶节旋藻耐高碳酸氢铵突变株的筛选第40-42页
     ·NTG 诱变钝顶节旋藻高碳酸氢铵耐受突变株的净光合速率研究第42-43页
     ·耐高碳酸氢铵突变株遗传稳定性研究第43-48页
 3 讨论第48-52页
   ·不同诱变剂诱变效应存在差异的原因第48-49页
   ·遗传突变与环境适应第49页
   ·节旋藻具有较强抗诱变能力的原因第49-50页
   ·随机诱变与定向选育第50-52页
第二部分 节旋藻二氧化碳浓缩机制相关基因表达特性分析第52-73页
 0 前言第52-59页
   ·CO_2 浓缩机制(CO_2 Concentrating Mechanism, CCM)研究进展第52-55页
     ·蓝藻CCM 机制的运行机制第52-53页
     ·蓝藻CCM 机制的组成第53-55页
   ·节旋藻CCM 研究进展第55-56页
   ·钝顶节旋藻CCM 相关基因第56-59页
 1 材料与方法第59-65页
   ·材料第59页
   ·试剂第59-60页
   ·主要仪器第60页
   ·实验方法第60-65页
     ·引物设计第60-61页
     ·藻株处理方法第61页
     ·钝顶节选藻总RNA 提取第61-62页
     ·钝顶节选藻总RNA 纯化第62页
     ·cDNA 制备第62页
     ·实时荧光定量PCR(RT-PCR)反应体系及反应条件第62-63页
     ·RT-PCR 数据分析方法-相对定量:第63-65页
 2 研究结果第65-70页
   ·钝顶节旋藻低碳条件下光合强度分析第65页
   ·RNA 制备第65-66页
   ·CCM 相关基因表达分析第66-70页
     ·内参基因和目标基因扩增效率检测第66-67页
     ·低碳处理不同时间ccmM 基因表达分析第67-68页
     ·低碳处理不同时间ccmO 基因表达分析第68-70页
 3 讨论第70-73页
   ·钝顶节旋藻在低浓度Ci 诱导下生理情况的变化第70页
   ·钝顶节旋藻藻体内碳酸酐酶的分析第70-71页
   ·钝顶节旋藻二氧化碳浓缩机制的特殊性第71-73页
参考文献第73-84页
致谢第84页

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