| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-42页 |
| ·SOD 与氧自由基 | 第13-14页 |
| ·氧自由基的产生及其途径 | 第13-14页 |
| ·氧自由基的清除 | 第14页 |
| ·SOD 的种类和分布 | 第14页 |
| ·SOD 的结构特点及理化性质 | 第14-17页 |
| ·SOD 的结构特点 | 第15-17页 |
| ·SOD 的理化性质 | 第17页 |
| ·国内外 SOD 的研究与应用进展 | 第17-24页 |
| ·SOD 的分子修饰 | 第17-18页 |
| ·SOD 的基因与基因的表达调控 | 第18-21页 |
| ·SOD 的基因 | 第18-19页 |
| ·SOD 基因表达调控 | 第19-20页 |
| ·转 SOD 基因研究 | 第20-21页 |
| ·SOD 的应用 | 第21-24页 |
| ·SOD 的医学应用 | 第21-23页 |
| ·SOD 在食品保健工业的应用 | 第23页 |
| ·SOD 在日化工业上的应用 | 第23-24页 |
| ·SOD 在植物学方面的研究 | 第24页 |
| ·目前国内外对 SOD 在蓝藻中的研究 | 第24-26页 |
| ·念珠藻的研究进展 | 第26-32页 |
| ·分类学 | 第27-28页 |
| ·分布 | 第28-29页 |
| ·繁殖 | 第29-30页 |
| ·抗逆性的研究 | 第30-32页 |
| ·关于实验中所用的几种念珠藻 | 第32-41页 |
| ·发菜 | 第32-35页 |
| ·发菜的分类地位及描述 | 第32-33页 |
| ·发菜的分布和生理生态学 | 第33-34页 |
| ·发菜的营养成份分析和利用现状 | 第34-35页 |
| ·发菜的人工培养 | 第35页 |
| ·发菜的抗逆机制的分子生物学研究 | 第35页 |
| ·地木耳 | 第35-38页 |
| ·地木耳的分类地位及描述 | 第35-36页 |
| ·地木耳的分布和生理生态学 | 第36-37页 |
| ·地木耳的营养成份分析和利用现状 | 第37-38页 |
| ·地木耳的人工培养 | 第38页 |
| ·地木耳的抗逆机制的分子生物学研究 | 第38页 |
| ·葛仙米 | 第38-41页 |
| ·葛仙米的分类地位及描述 | 第38-39页 |
| ·葛仙米的分布和生理生态学 | 第39页 |
| ·葛仙米的营养成份分析和利用现状 | 第39-40页 |
| ·葛仙米的人工培养 | 第40页 |
| ·葛仙米的抗逆机制的分子生物学研究 | 第40-41页 |
| ·本论文的研究目的和意义 | 第41-42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-55页 |
| ·材料 | 第42-46页 |
| ·质粒、菌株与藻株 | 第42-43页 |
| ·工具酶与试剂 | 第43-44页 |
| ·主要仪器 | 第44-45页 |
| ·主要培养基 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-55页 |
| ·蓝藻总 DNA 的提取 | 第46页 |
| ·目的基因片断的获得 | 第46-49页 |
| ·常规PCR反应 | 第46-47页 |
| ·碱裂解法小量制备质粒DNA | 第47-48页 |
| ·酶解反应体系 | 第48页 |
| ·酶切片段的纯化和回收 | 第48-49页 |
| ·连接反应体系 | 第49页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制 | 第49页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第49页 |
| ·克隆载体的鉴定 | 第49页 |
| ·目的蛋白的诱导表达及活性测定 | 第49-54页 |
| ·BL21 菌的转化同上大肠杆菌的转化 | 第50页 |
| ·重组子的蓝白斑筛选 | 第50页 |
| ·诱导目的蛋白的表达 | 第50页 |
| ·亲和纯化目的蛋白 | 第50页 |
| ·总可溶性蛋白质浓度的测定 | 第50-51页 |
| ·可溶性蛋白活性的测定 | 第51-53页 |
| ·SDS-PAGE 电泳分析 | 第53-54页 |
| ·不同藻粗提 SOD 的制备方法 | 第54-55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-77页 |
| ·不同藻株的sod 基因的克隆与检测 | 第55-64页 |
| ·表达载体的构建 | 第55-56页 |
| ·PCR 调取基因片断 | 第56-64页 |
| ·将测序结果利用生物信息学知识进行核苷酸序列的比较 | 第64-67页 |
| ·目的蛋白的诱导表达及SDS-PAGE | 第67-69页 |
| ·蛋白纯化和活性测定 | 第69页 |
| ·胁迫对的酶活性的影响 | 第69-70页 |
| ·温度胁迫对的酶活性的影响 | 第69页 |
| ·盐胁迫对的酶活性的影响 | 第69-70页 |
| ·高pH 胁迫对的酶活性的影响 | 第70页 |
| ·不同胁迫环境对发菜、地木耳和葛仙米中 SOD 活性的影响 | 第70-77页 |
| ·不同盐度胁迫下SOD 活性随时间的变化 | 第71-73页 |
| ·不同pH 胁迫下 SOD 活性随时间的变化 | 第73-74页 |
| ·不同温度胁迫下SOD 活性随时间的变化 | 第74-77页 |
| 4 讨论 | 第77-83页 |
| ·研究材料选择的必要性 | 第77-79页 |
| ·选择不同念珠藻的超氧化物歧化酶基因研究的可行性 | 第79-80页 |
| ·不同盐度和不同pH 值胁迫对念珠藻粗体 SOD 活性的影响 | 第80-83页 |
| 5 总结与展望 | 第83-85页 |
| ·利用同源性设计引物，获得了5 个不同念珠藻株的编码超氧化物歧化酶的基因 | 第83页 |
| ·转化大肠杆菌，获得了以可溶性蛋白形式表达的目的蛋白 | 第83页 |
| ·获得就有较高活性的纯化的表达蛋白 | 第83页 |
| ·温度胁迫对的纯化酶活性的影响 | 第83页 |
| ·不同胁迫环境对粗提 SOD 活性的影响 | 第83-85页 |
| ·三种念珠藻在不同浓度盐（NaCl）胁迫下 SOD 活性随时间的变化 | 第83-84页 |
| ·三种念珠藻在不同pH 值的培养基胁迫下 SOD 活性随时间的变化 | 第84页 |
| ·三种念珠藻在不同温度的培养基胁迫下SOD 活性随时间的变化 | 第84-85页 |
| 6 参考文献 | 第85-90页 |
| 缩写表 | 第90-91页 |
| 附录 | 第91-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
